A. 苯基键合硅胶色谱柱柱为什么不能用纯水冲洗
这个问题比较难回答。因为注意的东西比较多,比如:
首先是色谱柱的方向问题。大多数色谱柱会标明方向。这个傻子都知道,安装的时候要顺着方向安装。不过也有一些色谱柱没有方向,这些是双相填料的色谱柱。第一次使用时的方向就是它的方向。不过所有的色谱柱都是,一旦开始使用,就不要转换方向。这样会损毁色谱柱。
第二个是柱压问题。一般的色谱柱压力最好不要超过20MPa,压力过高会加速损毁色谱柱。
第三,柱温。色谱柱温度最好不要超过45℃。也是会加速损毁色谱柱。
还有pH值。色谱柱的pH值范围是不同的。大多数色谱柱的pH值范围是4-7左右。有些偏向酸性,有些偏向碱性的,还有一些pH值广泛的。这些按照说明书操作即可。
除此之外,色谱柱还有别的一些需要注意的事情。
首先,键合硅胶色谱柱分成几种。比如C18、C8、苯基柱这些的使用方法都差不多。是反相色谱柱。它们的流动相中还有大量的水,还有无机盐。这个时候需要注意,无机盐是不能够长时间留在色谱柱里面的。色谱柱最好保存在纯甲醇或者纯乙腈里面。但是无机盐不能溶于纯甲醇或者纯乙腈。所以中间要过渡甲醇水或者乙腈水。
而有些色谱柱比较特殊,比如氨基柱、氰基柱。他们是可以用于正相,也可以用于反相。所以使用的时候注意区分。配置流动相的时候也避免使用大量的水相。
其他的暂时想不到。或者说你想问的问题可以提出来,大家讨论讨论。
B. 液相中用水洗柱子压力上升过高
这个柱子不适合用纯水冲洗。
C. 纯水是否能通过高效液相色谱柱
看是什么柱子,有一些做糖的柱子就是要求纯水做流动相的。但一般的C8或C18柱子不行,要求最少5%有机相,以防对色谱柱伤害
D. 液相色谱用氨基柱平时都是走的80%乙腈溶液,错用了5%的硫酸溶液,柱子还有用吗
基本是废掉了。
具体情况就看你冲洗的时间和柱子的质量了。你是纯水相,pH极低。
一般氨基柱的pH值范围也和C18一样是2-9,这么低,应该就不能用了吧?
E. 神仙水不小心倒了纯净水进去有影响么
神仙水不小心倒了纯净水进去我个人觉得没关系的,如果不多的话可以继续使用的,不影响。
F. 岛津液相色谱仪的问题。
目前液相色谱复只有极制少数可以用超纯水冲洗,一般的C8和C18柱都不能用纯水冲水,即使是说明书说可以用超纯水清洗,也不益这么做,这样易造成填料坍塌。泵压高,这是很正常,但不建议用大流量冲冼,一般情况不能超过泵能承受的压力,比泵的最高承受压力低10Mpa。即使用纯的甲醇和乙腈,虽压力不会过线,但最好不要这样用,因为这样容易造成柱的填料坍塌,
G. 糖柱是否可以用水反冲
看柱子的种类吧,c18的应该都可以,看分离效果了。
如果是氨基柱的话估计不能用纯水吧。一些柱子纯水会塌陷,这个看具体情况。
买柱子时问问厂家就行。
H. 有使用过氰基色谱柱的吗
跟柱子类型有关
一般C18或C8反相色谱柱,不能用纯水冲洗,有机相比例至少5%,否则键合相碳链会发生卷曲,导致色谱柱性能不稳定。
如果是正相柱,是肯定不能用水冲的,极少量的水都可能对色谱柱造成不可逆的损害。
其他柱,氨基柱由正相过渡到反相系统时,可以用碱性水溶液(pH不可过高,会水解)和纯水冲洗,氰基柱一般不用纯水,但可以用乙腈等的水溶液冲柱,但是不能长时间冲。氨基柱跟氰基柱在水相中都有水解问题,用在反相系统时需特别注意pH值。
至于另外类型的柱子就不太清楚了,色谱柱上都会附使用说明和注意事项,认真阅读一下就知道了
I. 液相色谱的柱子接反了对样品有影响吗
柱子质量比较好,理论上没有影响,如果柱子质量不好,可能会导致分离度下降、柱效降低。一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
一般液相色谱柱是有方向的,通常情况下只能按照其规定流向通过流动相,尤其当色谱柱填充质量不高的时候。
比如实验室自制色谱柱、使用压力超高的色谱柱等。这类色谱柱的进口端一般会有一定的凹陷,如果反过来使用,会导致色谱柱填料的塌陷,产生柱效降低等后果。
但是如果制备良好的色谱柱,比如热电的色谱柱,在进了比较脏的样品后,可以反冲洗来冲出杂质。
色谱柱的流动相
1、在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。
2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱,以免柱性能损坏(添加5%的有机溶剂冲洗色谱柱,同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。还可以使色谱柱更容易平衡)。
3、流动相需脱气后使用,可避免因气泡导致的泵和检测器的工作不正常。如果测试时使用的流动相与色谱柱保存使用的流动相有较大区别,应该使用过度分布的形式进行平衡。避免由于流动相的突然变化造成柱压增加过大或流动相缓冲盐结晶造成对色谱柱和仪器系统的损坏。正相色谱柱比反相色谱柱需要更长的平衡时间。
J. 液相色谱可以用100%水冲吗,我的色谱柱不小心用纯水冲了10分钟左右,然后压力就上不去了,我该怎
如果流动相里本来就有水 短时间内没问题 切成流动相多冲一会儿就没事了