Ⅰ 配制培养基时不小心撒了一点氯化钠,然后凭感觉加了一点进去 有误差的话影响大吗 会不会要重做
肯定会用些影响的,最好是重做一份。
可以看下下面的培养基配制的注意事项:
培养基是绝大多数微生物试验的基础。因此,培养基的质量是微生物试验成功与否的关键因素。适宜的中海生物技术培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。
⑴培养基可按处方制备也可使用按处方生产的符合规定的商品化成品培养基,脱水培养基除附有处方和使用说明外还应注明有效期、贮存条件、适用性试验的质控菌株和用途。配制时应按使用说明上的要求操作,受潮结块不能使用,以确保培养基的质量符合要求。
⑵配制培养基使用的容器应是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角烧瓶、刻度吸管、试管、培养皿等。使用的器皿应 洗净,用蒸馏水冲净,烘干后方可使用。禁用金属容器如铁、铜、铝容器,避免金属离子与培养基成分结合,生成有害物质,影响细菌生长。
⑶培养基若于非洁净的玻璃器皿中制备,可能导致抑菌物质进入培养基中。抑菌物质可能是残留的玻璃器皿清洁用的清洁剂或之前玻璃器皿所盛装的物质。因此。应使用纯化水完全冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来物质的残留,并进行清除污物的确认。
⑷ 配制培养基最常用的溶剂是纯化水,特殊情况下需要用去离子水和蒸馏水,对热敏感的培养基应用灭菌水和无菌容器配制与分装,配制时若需加热助溶应注意温度不要过高
⑸、对配制培养基的过程作详细的记录,记录内容包括:配制日期、培养基名称、成分、配制数量、质量监控结果等进行全面详细记录。
Ⅱ 微生物培养基的配制原则有哪些(望详解)
培养基的制备和质量控制-培养基的制备
培养基是微生物测定的基础,培养基的质量因而成了保证微生物实验成功的关键。培养基的制备、合理的贮存、培养基的质量检验,能确保提供持续高质量的培养基。在按照可接受的来源和标准中的配方制备培养基的过程中,重要的是选择正确的培养基和成分。与脱水和制备好的培养基一起的还常常伴有供应商的配方和说明。因为不同的培养基可能有不同的制备要求(如:加热、填加物、
ph值的调节等),按照说明确保制备可接受的培养基是重要的。一份描述效期和建议贮存条件的COA是同制备好的培养基一起的,同时附有用于培养基的促生长试验和灵敏度测试的菌种。
水普遍用于微生物培养基的稀释。纯化水是最常用的,但是在有些情况下,也用去离子水和蒸馏水。稀释用水的体积应该记录。
使用脱水培养基和培养基组分来制备培养基时要准确称量。使用己校正的具有适合的称量范围的天平。使用清洁的容器和工具,防止配方中带入外来物质,改变培养基的最终组成。称量也应该记录。
脱水培养基先在水中分散,并完全溶解和灭菌。如果必要可以加热使溶解,但要防止过度加热,因为所有的培养基或多或少有对热敏感的。用于培养基制备的设备应适于加热控制,持续搅拌,溶质混合。培养基变黑(梅特拉反应和非酶的棕色着色剂)通常显示过度加热。当需要向培养基中添加补充物时,添加后应充分混合。
制备好的培养基应放在清洁无菌的玻璃器具中,也可以加入抑制性物质。抑制性物质可以由器具清洁时产生也可由先前贮存在此器具的物质产生。必须确保清洁过程能有效去除残留和异物,确保清洁剂用纯化水充分清洗。参见《1051玻璃器具的清洗》。
培养基的灭菌应根据供应商提供的参数或用户自己的验证。买来的制备好的培养基应提供其使用的灭菌方法的文件。理想的供应商应提供培养基的灭菌保证水平(SAL),此水平是依靠公认的生物指示剂确定的。湿热高压灭菌是首选的灭菌技术,除了一些为避免培养基中的热敏物质遭到破坏而采用的煮沸方法。通过过滤灭菌对有些配方也是合适的。
培养基的灭菌方法、灭菌条件的效果应通过培养基的灭菌和促生长试验来验证。另外,如果通过湿热灭菌,灭菌周期应经过验证,对选择合适的负载和体积来确保合适的热分布。通常供应商建议采用一个已校正过的灭菌高压锅,在121°灭菌15分钟。通常指培养基达到温度的时间。当灭菌锅负载结构影响加热的速度是时,越多的负载就需要越长的灭菌周期。然而,灭菌的时间取决于培养基的体积和高压锅的负载。灭菌周期中,当温度是慢慢上升时,可能导致培养基的过度加热。因此,必须仔细确认能达到最小的SAL要求的灭菌周期,在过度加热时,抑制培养基降解的趋势。在流体循环完成后,不主张放冷后的培养基中放在灭菌锅中贮存,因为这样可能破坏培养基。不合适的加热或灭菌(对买来的培养基或是内部制备的培养基)可能导致颜色的不同变化,不透明,改变培养基的规格,或是PH发生漂移(与供应商的提议范围)。
通过无菌技术为测试制备的每一批培养基其PH在放冷至室温(25°)后,都应测定。一个扁平的pH计用于培养基表面pH值的测定,浸入式的pH计用于液体的测定。各供应商提供的培养基的pH应该在规定的±0.2的范围内,除非通过验证得到更宽的范围。
制备培养基应对培养皿和试管进行适当如下的检查:
有裂纹的容器和盖子;
容器内不同的填充体积;
有裂纹容器内可导致脱水的结果或是固体培养基表面起皱;
溶血;
额外黑或颜色改变;
可能过冷引起的结晶;
过量的气泡;
微生物的污染;
氧化显示的情况;
批号、效期的检查和记录;
培养基的灭菌。
Ⅲ 微生物配置培养基用什么水
不同的来培养基选用不同的水
细胞培养基源一般用新鲜三蒸水或Millipore超纯水(分子生物学及生命科学,动物细胞及植物细胞培养,组织培养,试管婴儿,电泳、凝胶分析,生物工程,培养基制备)
医院检验科培养病人标本的培养基用的是普通蒸馏水
现在有的实验室使用的是反渗透纯水,应用:① 实验室器皿的最后清洗② 缓冲液、化学试剂配制用水③ 微生物培养基制备用水④ 氢气发生器、室内加湿器、高压消毒锅用纯水⑤ 人或实验动物饮用水等
超纯水的应用① 医院、医药制剂室及中心供应室用纯化水和高纯水② 各种医疗用生化仪、分析仪、血液透析仪用水③ 分析试剂及药品配置稀释用水④ 生理、病理、毒理学实验用水⑤ 动、植物细细胞培养用水⑥ 原子吸收光谱用水⑦ 试管婴儿用水⑧ 各种高效液相色谱、离子色谱用水⑨ 其他各种实验室用水和医药用水
Ⅳ 实验室纯水分几个等级
实验室纯水分四个等级,即:
1、蒸馏水:
实验室最常用的一种纯水,虽设备便宜,但极其耗能和费水且速度慢,应用会逐渐减少。蒸馏水能去除自来水内大部分的污染物。
2、去离子水:
应用离子交换树脂去除水中的阴离子和阳离子,但水中仍然存在可溶性的有机物,可以污染离子交换柱从而降低其功效,去离子水存放后也容易引起细菌的繁殖。
3、反渗水:
反渗水克服了蒸馏水和去离子水的许多缺点,利用反渗透技术可以有效的去除水中的溶解盐、胶体,细菌、病毒、细菌内毒素和大部分有机物等杂质。
4、超纯水:
超纯水在TOC、细菌、内毒素等指标方面并不相同,要根据实验的要求来确定,如细胞培养则对细菌和内毒素有要求,而HPLC则要求TOC低。
拓展资料:
实验室纯水的分类与标准:国家实验室纯水标准(GB/T 6682)依据水的纯度(水的导电性)分1、2、3级,1级电导率小于0.1μs/cm;2级电导率小于1.0μs/cm;3级电导率小于5.0μs/cm;
泉瑞QTCJ系列小型去离子水设备可满足用户的不同需求,产水水量10L-50L/h,水质完全符合国家实验室1、2、3级标准,不同级别的水其生产工艺、生产产本相差较大,所以其用途也相以区分。
三级水是**级别的实验室级纯水,推荐用于玻璃器皿洗涤;水浴、高压灭菌锅用水以及超纯水系统的进水。
二级水一般用于常规实验室应用,比如缓冲液、pH 溶液及微生物培养基的制备;为超纯水系统、临床生化分析仪、培养箱、老化机供水;也可为化学分析或合成制备试剂。
一级水往往用于严格的实验应用,如HPLC 流动相制备;GC 空白样制备和样品稀释、HPLC、AA、ICP-MS等高精度分析技术;缓冲液、哺乳动物培养基制备及试管婴儿;分子生物学试剂制备(DNA 测序、PCR 扩增等);电泳及杂交实验溶液配制等。
通常我们实验室工作人员为了实验的准确与精确性,采用一级标准的水用于二级水的实验应用中。
Ⅳ 培养基的制备原则和要求是什么
培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要,用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择培养基、鉴别培养基和厌氧培养基。在制备培养基时,应掌握如下原则和要求:
(一)培养基必须含有细菌生长繁殖所需要的营养物质。所用的化学药品必须纯净,称取的份量务必准确。
(二)培养基的酸碱度应符合细菌生长要求。按各种培养基要求准确测定调节pH值。多数细菌生长的适宜pH值为7.2~7.6,呈弱碱性。
Ⅵ 纯化水微生物限度检查方法
在医药的生产过程中,纯化水的质量是关系到药品质量的一个首要原因。纯化水在生产,储存和运输的过程中,非常容易受到微生物的污染,因此对于水质的日常检测是质量部门一个重要工作。对于纯化水微生物限度检查,各国所使用的方法不外乎与培养基浇注法,涂布法,膜过滤法,以及最大可能数法,最大的区别在于所使用的培养基不同。
我总结了以下对于纯化水微生物限度检查方法,同时我司熟悉纯化水检测相关标准和检测项目要求,可提供专业、可靠的纯化水检测服务,出具国家认可的纯化水微生物限度检查报告。cma资质认证如下:
对于活力比较强的微生物,在高营养性培养基上可以快速大量的生长,而对于活力比较差的微生物,生长速度会比较缓慢。在日常生活中,这两种微生物经常会同时出现由由于它们的生长速率不同,会产生无法完全检出的现象,因此高营养性培养基和低营养性培养基常常会同时使用来提高微生物的检出率,
培养的温度和时间同样是影响检测的条件,高营养性培养基通常在30-35℃培养48-72小时,但是在同一个系统中,培养的时间越长,可以检出的微生物数量就越多,低营养性培养基就在这时候被设计出来,有些培养基的培养时间甚至达到14天,可以至大化的复苏低营养性微生物及受损伤的微生物。但是检测周期的延长,对于工作效率来说,是很不利的,因此我们需要一个既能保证效率,又能保证检出率的办法。
在比较了中国药典,美国药典中所记载的方法,中国药典中纯化水微生物检查所用到的培养基是 R2A 琼脂培养基,在30-35℃培养大于5天。美国药典中对于纯化水的微生物检测用何种培养基没有做强制性规定,只要求在水系统确认验证及周期性确认验证时,使用适当的方法对水系统中的微生物做出评价即可。
《中国药典》2010版、2015版以及2020版纯化水微生物限度检查中表示,生产企业必须确保纯化水的质量符合药典要求,但药典对于纯化水的规定其实也只是至低水平,满足了药典的标准不一定就能保证符合企业预期用途的要求。因此,开展纯化水微生物限度检查直接影响到生产产品的安全质量,中科检测具有纯化水微生物限度核查检测,具有独立实验室,报告具有CMA和CNAS资质。
Ⅶ 纯化水采用的r2a培养基原理是什么
纯化水采用的r2a培养基原理如下:
1、r2a培养基可以修复被氯气损伤的细菌,支持专耐受氯气的微生物的属生长。
2、r2a培养基中的酵母浸出粉、蛋白胨、酸蛋白水解物提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖、为可发酵糖类;可溶性淀粉可以吸收菌在复苏过程产生的有害物质;
3、r2a培养基中的丙酮酸钠可增强细菌的复苏。
4、r2a培养基中的磷酸二氢钾为酸碱缓冲剂,无水硫酸镁提供二价阳离子,琼脂为凝固剂。
Ⅷ 配制培养基的流程
不是啊用灵敏度为0.1mg的天平称取药品.
(2) 往烧杯加入适量蒸馏水或无菌水.
(3) 将药品放入烧杯内,并用玻璃棒搅拌使其溶解,难溶时可适当加温以加速溶解.
(4) 要待一种药品完全溶解后再加入下一种药品.
(5) 所加入的药品应依次加入,直至药品全部加入溶解为止。 例MS母液的配制
按MS培养基成分表,将各种化学物质归成几大类,分别为大量元素、微量元素、铁盐、有机物。 大量元素10倍液(mg/L)微量元素1000倍液(mg/L)有机物100倍液(mg/L)铁盐NH4NO3 1,6500
KNO3 1,9000
CaCl2?2H2O 4,400
MgSO4?7H2O 3,700
KH2PO4 1,700HBO3 6,200
MnSO4?4H2O 22,300
ZnSO4?7H2O 8,600
KI 830
Na2MoO4?2H2O 250
CuSO4?5H2O 25
CoCl2?6H2O 25甘氨酸 200
肌醇 10,000
烟酸 50
维生素B6 50
维生素B1 405.57g FeS04?7H2O和7.45g Na2一EDTA溶于1升蒸馏水里,用时每配1升MS培养基取5ml。取烧杯注入约600ml蒸馏水,按顺序加入药品并使其溶解,最后加蒸馏水定容至1000ml。取烧杯注入约600ml蒸馏水,按顺序加入药品并使其溶解,最后加蒸馏水定容至1000ml。 2. 培养基制备
配制流程见图1-2,其顺序是:
① 取烧杯或三角瓶注入一定量的蒸馏水,将各种母液按所需容积分别用移液管吸取并混合在一起,然后按要求加入一定量的激素、蔗糖后定容至一定体积。
② 用1mol/L的NaOH或HCl调节pH
③ 如制固体培养基,则加入1%左右的琼脂后加热煮沸,使其熔化。
④ 分装,可用漏斗将液状培养基注入培养瓶,注入量视培养瓶容量大小而定,通常为容器的1/5左右。
⑤ 封瓶口。
⑥ 高压蒸汽灭菌。120℃,1.5Mpa,消毒15~20min。注意压力不能太大,时间也不宜过长,否则蔗糖、有机物特别是维生素类物质会在高温下分解,影响培养基的酸碱度,琼脂也会分解,颜色变深且不易凝固。
⑦ 灭菌后的培养基可放入接种室内静置,让其降温后凝固,如需斜面可将其斜放。
Ⅸ 请问纯化水的微生物检测的培养基用什么
CP用营养琼脂培养细菌、玫瑰红纳琼脂培养霉菌及酵母
USP用SCDA培养总需氧菌、SDA培养霉菌及酵母