① 纯化水微生物限度检测
采用滤膜法进行微生物检测是一种国际公认的微生物标准检验方法,其得到AOAC、美国、欧洲和日本等国家的药典、FDA和EPA等组织的承认,广泛应用于环境监测、食品及饮料工业、化妆品、制药工业品质控制和电子工业等领域。赛多利斯公司的滤膜法微生物检测产品成功地应用于滤膜法已有20多年的历史,实用而且方便实用,它简化了微生物检测程序。
滤膜法微生物检测:
将适当孔径的滤膜放入滤器,过滤样品,由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上。样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去。然后,将滤膜放在培养基上培养,营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换,在滤膜表面上培养出的菌落可以计数,并和样品量相关。
滤膜法的优点:
- 与直接法比较,可以检测大量的样品
- 浓缩效应使微生物检测的准确度提高
- 带有菌落的滤膜,可作为检测的永久记录存档
- 可见的菌落和样品量直接对应,得出定量结果
操作具体一点就是:薄膜过滤法检测,一个样过滤一份,就是200ml的纯化水通过滤膜,将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中,再接种到平皿中,制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿,即可
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② 微生物检测出现红色菌落是什么细菌
细菌菌落总数是微生态制剂样品检测必做的一项指标。菌落总数检测同其他检验一样,也存在检测误差。平板计数法是检测饲料中细菌总数、活酵母数、芽孢杆菌数及乳酸菌数的常用方法之一,因此,该值准确与否直接关系到微生物饲料添加剂类产品的质量好坏。微生物平板计数的通常方法为每个样品用 3个稀释度,每个稀释度常做 3个重复。但如何对平板菌落进行正确计数、3个稀释度以哪一个稀释度进行计数及微生物检测允许误差等问题,在饲料标准中并未有所规定,而这些问题与统计值的准确性密切相关。我们就实际检测芽孢杆菌工作中遇到一些菌落计数的问题,与大家进行探讨。
1材料与方法
1.1试验材料
1.1.1样品:随机抽取微生态饲料添加剂合生素样品3份。
1.1.2培养基:营养琼脂。
1.1.3仪器设备:磁力搅拌器,无菌培养皿,培养箱,振荡器。
1.2 试验方法
1.2.1样品的振荡时间对菌数检测的影响
选择1个样品,称取10 g,放入无菌锥形瓶内,加入90 mL无离子水,磁力搅拌分别为l0、20、30、40和60 min。
用1 mL移液枪从中吸取1 mL样品悬浊液加入到盛有9 mL去离子水的试管中,用振荡器使样品充分均匀,以此类推,制成10-1~1O-7不同稀释度的样品溶液。
平板涂布法检测菌含量:用移液枪从样品稀释液中各吸取200uL,每个样品稀释液3个重复;将平板倒置于35-37℃培养箱中培养24 h。
1.2.2检测方法对菌数检测的影响
各个样品称取l0 g,放入无菌锥形瓶内,加入90 mL无离子水,磁力搅拌分别为40 min。并稀释成10-1~l0-7不同稀释度的样品溶液。
倾注平板法检测菌含量:用移液枪从各个平行样品相应稀释液中各吸取1 mL,每个样品稀释液3个重复,待培养基表面干燥后,将平板倒置于35-37℃培养箱中培养24 h。
平板涂布法检测菌含量:用移液枪从各个平行样品相应稀释液中各吸取200uL涂布平板,每个样品稀释液3个重复;将平板倒置于35~37℃培养箱中培养24 h。
2结果
2.1样品的振荡时间对菌数检测结果的影响
采用细菌平板计数的方法,不同振荡时间对合生素中芽孢杆菌检出量的结果见表1。从表l中可见:不同振荡时间获得的细菌菌落数量有较大差别。总体而言,在一定时间内,随着振荡时间的延长检出有效菌含量增加,说明细菌从载体上解析需要一定的时间;当振荡时间为40 min后产品中的菌含量基本稳定。采用适当振荡时间才能更精确的显示产品中有效菌的含量。
表1 震荡时间对有效菌含量结果的影响 亿CFU/g
震荡时间
10min
20min
30min
40min
60min
含菌量
2
6
10.5
15
14
2.2 检测方法对菌数检测结果的影响
表2 检测方法对有效菌含量结果的影响 亿CFU/g
检测方法
样品平行
1
2
3
倾注平板法检测有效菌含量
16.1
13.0
15.3
平板涂布法检测有效菌含量
14.5
11.2
14.2
采用不同的检测方法,对合生素中芽孢杆菌检出量的结果见表2。从表2可见:不同方法获得的细菌菌落数量有差别,倾注平板法相较平板涂布法检测的菌含量多,但基本在20%误差范围内。平板计数法操作相对简单、快捷且影响因素较少。倾注法培养基营养分布较均匀,对部分蔓延菌落能控制,但对操作人员熟练程度要求相对较高。
3分析与讨论
3.1样品处理对结果的影响
取样时对样品取样口和取样工具要消毒,防止样品交叉污染。
3.2样品的均质处理对结果的影响
固体样品要用均质器或玻璃珠等充分均质,也可在稀释液中添加相应溶解液(如吐温80和液体石蜡等)的稀释液,以保证样品的充分均质。
测定芽孢杆菌活菌数时,不同振荡时间获得的细菌菌落数量有较大差别,因为细菌从载体上解析并均匀分散到溶液中需要一定的时间,待测样品应在振荡器上充分振荡,使得芽孢杆菌可以充分和均匀地分散到待测溶液中,避免因为菌体未完全释放而引起结果中细菌含量偏低的现象。
3.3 试验过程中操作方法的影响
加样l mL时,用1 mL的吸管并且每做一个稀释度都要换1支吸管,否则稀释度间菌落计数误差会超过10%,说明存在操作误差。用吸管向平皿里加样,平皿开口要小,吸管要直立且加样结束后,让吸头接触皿底干燥处,保证加样的体积不少。
③ 纯化水微生物真菌检测,培养出红色小点和白色大圆点,请问这两个分别是什么品种的菌
白色大圆点可能是酵母菌吧,酵母菌菌落形态与细菌相似,但较大较厚,呈乳白色或红色,表面湿润、粘稠,易被挑起。
④ 纯化水微生物限度检查什么菌,5种标准菌菌种可以只选其中一两种吗
5种菌种是做验证用的,用一次就好,平时做纯化水微生物限度只要金黄色葡萄球菌做阳性对照就好。
⑤ 做纯化水微生物限度时滤膜周围长了一圈菌是怎么回事
有可能是污染了,滤膜上是否有菌落?所有器具好好消毒下,在做一下看看!希望对你有帮助
⑥ 纯化水微生物限度,按照药典要5种菌种。然后看您的回答是可以只用金黄色葡萄球菌,请问有什么依据吗
纯化水的微生物的限抄度,按照2015版药典是只需计数就好吧,而5种细菌分别是:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉。这5种是用来做纯化水的验证的。一种都不能少。具体检验纯水水的方法药典上有可以查看。
⑦ 纯化水的微生物限度里的薄膜过滤法如何计数啊
一次两毫升水。把过滤完成的薄膜正面贴在R2A平板上,18小时后计数,每天数一次,可以用软件数,也可以人工数,用记号笔在碟子上打点。细菌三天,霉菌五天。
⑧ 纯化水微生物限度检查用薄膜过滤法怎么做
准备工作:
用纯化水浸泡滤膜,浸泡完全后放入滤杯中,包好滤杯,连同回量筒、培养基、平皿、答取膜器、三角烧瓶等一起121℃灭菌30min。
灭菌后的物品一并传入洁净室中,微生物限度过滤器上连好已经灭好的滤杯,用缓冲液先润湿滤膜,抽掉缓冲液,然后倒入供试液(10倍稀释),滤过,再用缓冲液冲洗滤膜。
过滤结束后取下滤膜平贴于R2A琼脂培养基平板上,32℃倒置培养5天。菌落计数(平皿上长几个菌结果就报几个菌)
(8)纯化水限度检测薄膜上出现红色点是什么菌扩展阅读:
薄膜过滤系统主要用于去除小颗粒及溶解盐,一般可分为微滤、超滤、纳滤和薄膜过滤反渗透。
微滤又称微孔过滤,它属于精密过滤,截留溶液中的砂砾、淤泥、黏土等颗粒和贾第虫、隐抱子虫、藻类和一些细菌等,而大量溶剂、小分子及少量大分子溶质都能透过膜的分离过程。
超滤是一种加压膜分离技术,即在一定的压力下,使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜,而使大分子溶质不能透过,留在膜的一边,从而使大分子物质得到了部分的纯化
纳滤 ( NF,Nanofiltration)是一种介于反渗透和超滤之间的压力驱动膜分离过程,纳滤膜的孔径范围在几个纳米左右。
参考资料来源:网络-薄膜过滤
⑨ 请问,在制作乳酸菌的过程中出现了红色的菌落是什么
肯定是霉菌,很可能是曲霉菌中的红曲霉,但具体是哪一种霉菌只凭颜色是判断不了的,一般没有什么影响。