① 离子色谱柱能用纯水冲洗吗,这样是否会影响柱子的性能。
按看说明书或咨询色谱柱厂商,防止损害色谱柱,离子柱都不便宜,小心为上。
用纯水短时间内冲洗色谱柱,通常不会对色谱柱造成较大的损伤,但如果长时间用水冲洗色谱柱则
可能引起固定相流失和相塌陷现象,所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱,建议在水中加入一定
量的甲醇或乙腈进行冲洗,通常水的含量<90%不会对色谱柱造成任何影响。
原因分析:
首先,由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质,硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一
定浓度有机溶剂的流动相中要大得多,所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,对于常规的 C18 柱而言,由于C18 长链与水是不互溶的,C18 长链之间的相互作用力大于
C18 与水分子的作用力,长时间的用水冲洗,使得C18 长链之间相互靠近,水流的冲刷,导致相互联结
的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面,对疏水性物质的保留能力下降,即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出
现相塌陷的现象,有些厂家推出了纯水柱(如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱),这种纯水柱可以用纯
水作流动相而不会产生相塌陷,这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。
第三,如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱,用纯水冲洗,并一定能将缓冲盐完全洗去。因为,由
于缓冲盐难溶于有机溶剂,C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链,相当于一
个疏水的有机相,而硅胶基体被有机物质包裹着,所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易
到达硅胶基质,不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂,而且这些有机溶剂与C18
长链是互溶的,因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力,能使部分缓冲盐达到硅胶基质。
同样的道理,用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐,而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在
水中加入部分有机溶剂进行冲洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要视分析
时使用的流动相来定,原则上,用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于(缓冲盐用后清洗的情况,
推荐使用“等于”)分析时所用流动相中水的比例。
② 新买的高效液相色谱柱在正式使用之前需要做什么比如什么配比的流动相冲洗
主要是看你购买的是哪个品牌的液相,首先应该进行性能测试,对各个部件的性能有所了解,大部分的液相都可以用乙腈比水进行冲洗系统,希望我的答案能帮到你。
③ 2、简述反相高效液相色谱中常用的流动相系统
同一根柱子,可能是正相,也可能是反相,例如安捷伦 ZORBAX CN柱,用正己烷-异丙醇作流动相就是正相HPLC,用水-甲醇/乙腈就是反相HPLC
④ 反相键合相色谱中,C18柱的分离原理是什么
针对常规C18反相色谱柱无法满足在高水相及纯水流动相条件下的液相色谱分析,采用混合键合的方式得到一种新型亲水
⑤ 为什么高效液相色谱要用甲醇和水做洗脱剂
因为水的极性最高,甲醇也是强极性的,如果你是做反相色谱(流动相极性强于固定相)通常就是用甲醇和水做流动相,如果是正相色谱可以使用极性较低的溶剂,如乙酸乙酯、苯之类的,一般来讲液相色谱法大多数是反相色谱,所以使用甲醇水做流动相很常见,流动相可以100%的甲醇,但是没办法100%的水,因为纯水做流动相压力过大,仪器承受不住。
⑥ 反相液相色谱法固定相和流动相通常为哪类物质
反相色谱:流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。
常用的固定相:氰基、苯基、C8、C18等
常用的流动相:有机相为乙腈,甲醇,四氢呋喃,水相为超纯水。调节ph值一般酸有磷酸,三氟乙酸,乙酸,三乙胺,磷酸盐(钾盐和钠盐),乙酸钠等。
⑦ 那些HPLC色谱柱可以用纯水
你问的应该是反相色谱抄柱,因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列,Aichorm的Aqua系列,都是可以做纯水相的。
但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例,那就不必了,普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗,不超过10个柱体积,是没什么问题的。
⑧ 液相色谱可以用100%水冲吗,我的色谱柱不小心用纯水冲了10分钟左右,然后压力就上不去了,我该怎
如果流动相里本来就有水 短时间内没问题 切成流动相多冲一会儿就没事了
⑨ 纯水是否能通过高效液相色谱柱
看是什么柱子,有一些做糖的柱子就是要求纯水做流动相的。但一般的C8或C18柱子不行,要求最少5%有机相,以防对色谱柱伤害
⑩ 液相色谱里面能只用水做流动相吗
这个得看你的色谱柱。
一般的反相色谱柱不耐纯水。如果用的话会特别费。专
我当初做过属一个实验,流动相是0.025mol/L的KH2PO4,色谱柱是C18柱,大概半个月换一根吧。
特殊的色谱柱可以耐受纯水,但是可能分离效果不好,峰型也不一定好。
另外,纯水很 容 易 长微生物。一般纯净水开瓶之后在25℃放置1天,过滤的速度就会缓慢,放三天就浑浊了。如果你的流动相是纯水,那么系统、色谱柱很容易堵塞。所以不建议使用。