A. 细胞实验室是否需要纯水、超纯水,设计时要不要把纯水系统设计进去
你做细胞实验基本是离不开纯水和超纯水的,不论你是做动植物实验、细胞免疫化学、PCR实验、蛋白质纯化以及电泳/凝胶分析,都是要用到超纯水的。建议你设计时最好把超纯水系统也设计进去,以后你的几个实验室直接用设计好的超纯水系统的管道取水即可。你可以联系南京权坤。
B. PCR 进行的基本条件是什么
PCR反应进行的条件:引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。
引物有多种设计方法,由PCR在实验中的目的决定,但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源:Taq和Pfu,分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。
(2)超纯水可以做pcr么扩展阅读:
PCR的特点:
1、灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12)量级的起始待测模板扩增到微克(μg=-6)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中最小检出率为3个细菌。
2、简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
3、纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等DNA扩增检测。
参考资料来源:网络—PCR
C. 做配药品,稀释引物,PCR实验中,对水的要求要很高么
配制一般化学试剂使用二级水即可。
配制生化试剂,包括引物稀释、PCR所用水,以及转膜、核酸抽提等,必须使用二次蒸馏水或一级水。
D. 求助:做PCR用什么水的效果是最好的
因为你已经加了Buffer有了一个缓冲条件,理想状态下,新鲜制备的蒸馏水也是可行的。
但为了保证PCR质量,减少麻烦,大家的做法是使用灭菌的去离子水。
水到不必最纯净,但是一定要保证无核酸酶最重要。一般灭菌都能除去dna酶,rna要是特别在意就用depc处理。
不厚道的说一下,你没有师兄师姐么,这种入门的东西问一下就知道了,干嘛还发这种帖子。
沟通是科研第一要务。
E. 自由的去离子水可以做PCR吗
可以,如果你一下子找不到的话,可以使用屈臣氏的双蒸馏水和DEPH水
F. 做PCR如何设置条件
仪器不一样,设置的具体操作有点差别。
PCR条件一般是:
95° 3--10min
95° 15-45s
退货温度 15-45s
72° 15-90s 35cycles
72° 10min
G. 做hplc一定要用超纯水吗,用纯化水可以吗
是必须用纯水,而且最好是用二级以上的纯化水来做。
H. 做PCR的水要求高吗
不需要.但必须专用于PCR,可分装成500ul的小包装,使用次数太多,或者觉得可能污染可以丢掉而不会太浪费.
如果PCR的操作环境比较好,那么试剂很安全、很稳定
I. pcr用超纯水
最好还是在冰上做啦,一次两次没有问题,久了多了可能问题就出来了
一般用的是灭菌的双蒸水
保证引物的终浓度就可以.都是用水稀释的,没啥差别
J. pcr 去离子水
diH2O是去离子水,ddH2O是双蒸水,不太一样,但我觉得在PCR体系里完全可以相互替代.