纯化水微生物检测供试液的制备

1. 怎样制备微生物回收实验用的供试液

微生物限度检查中，供试液制备方法反复提到制成1:10供试液，如“水溶性供试品：取供试品，用PH7.0无菌气化钠-蛋白胨缓冲液，或PH7. 2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1:10供试液”。那么这个1:10的供试液是怎么配制？下面两种做法：

1、目前多数做法，固体样品，取10g，加入100ml稀释液；液体样品，取10ml，加入90ml稀释液。

2、而有些人认为1:10是比例浓度，固体样品，取10g，加入100ml供试液；液体样品，是取10ml，加入100ml供试液。

从后续实验操作过程来看，都是要求取相当于1g或1ml的供试液进行操作，另外从微生物限度判断标准来看，也是以1g或1ml含有的菌落数报告，那么，无疑，液体样品的配制，取10ml，加入90ml稀释液，这种方法是对的，利于后续实验步骤的操作。同样，固体样品，也应该是配制完成后液体体积是100ml，但容量瓶不能灭菌，无法定容，同时固体样品10g体积较小，忽略体积的话，直接加入100ml稀释液也可以。

2. 纯化水微生物限度检查用薄膜过滤法怎么做

准备工作：

用纯化水浸泡滤膜，浸泡完全后放入滤杯中，包好滤杯，连同回量筒、培养基、平皿、答取膜器、三角烧瓶等一起121℃灭菌30min。

灭菌后的物品一并传入洁净室中，微生物限度过滤器上连好已经灭好的滤杯，用缓冲液先润湿滤膜，抽掉缓冲液，然后倒入供试液（10倍稀释），滤过，再用缓冲液冲洗滤膜。

过滤结束后取下滤膜平贴于R2A琼脂培养基平板上，32℃倒置培养5天。菌落计数（平皿上长几个菌结果就报几个菌）

(2)纯化水微生物检测供试液的制备扩展阅读：

薄膜过滤系统主要用于去除小颗粒及溶解盐，一般可分为微滤、超滤、纳滤和薄膜过滤反渗透。

微滤又称微孔过滤，它属于精密过滤，截留溶液中的砂砾、淤泥、黏土等颗粒和贾第虫、隐抱子虫、藻类和一些细菌等，而大量溶剂、小分子及少量大分子溶质都能透过膜的分离过程。

超滤是一种加压膜分离技术，即在一定的压力下，使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜，而使大分子溶质不能透过，留在膜的一边，从而使大分子物质得到了部分的纯化

纳滤 ( NF，Nanofiltration)是一种介于反渗透和超滤之间的压力驱动膜分离过程，纳滤膜的孔径范围在几个纳米左右。

参考资料来源：网络-薄膜过滤

3. 纯化水中的微生物检测怎么做 要详细

采用滤膜法进来行微生物检测源是一种国际公认的微生物标准检验方法，其得到AOAC、美国、欧洲和日本等国家的药典、FDA和EPA等组织的承认，广泛应用于环境监测、食品及饮料工业、化妆品、制药工业品质控制和电子工业等领域。赛多利斯公司的滤膜法微生物检测产品成功地应用于滤膜法已有20多年的历史，实用而且方便实用，它简化了微生物检测程序。
滤膜法微生物检测：
将适当孔径的滤膜放入滤器，过滤样品，由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上。样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去。然后，将滤膜放在培养基上培养，营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换，在滤膜表面上培养出的菌落可以计数，并和样品量相关。
滤膜法的优点：
- 与直接法比较，可以检测大量的样品
- 浓缩效应使微生物检测的准确度提高
- 带有菌落的滤膜，可作为检测的永久记录存档
- 可见的菌落和样品量直接对应，得出定量结果

操作具体一点就是：薄膜过滤法检测，一个样过滤一份，就是200ml的纯化水通过滤膜，将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中，再接种到平皿中，制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿，即可

4. 中国药典微生物限度检查法的检验量和供试液制备

检验量即一次试验所用的供试品量（g、ml或cm²）。
除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或10ml；膜剂为100cm²；贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加20g或20ml（其中10g或10ml用于阳性对照试验）。
检验时,应从2个以上最小包装单位中抽取供试品，膜剂还不得少于4片。
一般应随机抽取不少于检验用星（两个以上最小包装单位）的3倍最供试品。 根据供试品的理化特性与生物学特性，采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时，应均匀加热，且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。
除另有规定外，常用的供试液制备方法如下。
1.液体供试品
取供试品10ml，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为l:10的供试液。油剂可加入适量的无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。
2.固体、半固体或黏稠性供试品
取供试品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，用匀浆仪或其他适宜的方法，混匀，作为1:10的供试液。必要时加适量的无菌聚山梨酯80，并置水浴中适当加温使供试品分散均匀。
3.需用特殊方法制备供试液的供试品
（1）非水溶性供试品
方法1 取供试品5g（或5ml )，加至含溶化的（温度不超过45℃）5g司盘80、3g单硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80无菌混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，慢慢加人45 ℃的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，边加边搅拌，使供试品充分乳化，作为1 : 20的供试液。
方法2 取供试品10g，加至含20ml无菌十四烷酸异丙酯（制法见附录XII A无菌检查法中供试品的无菌检查项下）和无菌玻璃珠的适宜容器中．必要时可增加十四烷酸异丙酯的用量，充分振摇，使供试品溶解。然后加入45 ℃的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，振摇5～10分钟，萃取，静置使油水明显分层，取其水层作为l : 10的供试液。
（2）膜剂供试品
取供试品100cm²，剪碎，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml（必要时可增加稀释液），浸泡，振摇，作为1:10的供试液。
（3）肠溶及结肠溶制剂供试品
取供试品10g，加pH6.8无菌磷酸盐缓冲液（用于肠溶制剂）或pH7.6无菌磷酸盐缓冲液（用于结肠溶制剂）至100ml，置45 ℃水浴中，振摇，使溶解，作为1 :10的供试液。
（4）气雾剂、喷雾剂供试品
取规定量供试品，置冰冻室冷冻约1小时，取出，迅速消毒供试品开启部位，用无菌钢锥在该部位钻一小孔，放至室温，并轻轻转动容器，使抛射剂缓缓全部释出。用无菌注射器吸出全部药液，加至适量的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（若含非水溶性成分，加适觉的无菌聚山梨酯80）中，混匀，取相当于10g或10ml的供试品，再稀释成1:10的供试液。
（5）贴剂供试品
取规定量供试品，去掉贴剂的保护层，放置在无菌玻璃或塑料片上，粘贴面朝上。用适宜的无菌多孔材料（如无菌纱布）覆盖贴剂的粘贴面，以避免贴剂粘贴在一起。然后将其置于适宜体积并含有表面活性剂（如聚山梨酯80或卵磷脂）的稀释剂中，用力振荡至少30分钟，制成供试液。贴剂也可采用其他适宜的方法制备成供试液。
（6）具抑菌活性的供试品
当供试品有抑菌活性时，采用下列方法进行处理，以消除供试液的抑菌活性，再依法检查。常用的方法如下。
①培养基稀释法取规定量的供试液，至较大量的培养基中，使单位体积内的供试品含量减少，至不含抑菌作用。测定细菌、霉菌及酵母菌的菌数时，取同稀释级的供试液2ml，每1ml供试液可等量分注多个平皿，倾注琼脂培养基，混匀，凝固，培养，计数。每1ml供试液所注的平皿中生长的菌落数之和即为1ml的菌落数，计算每1ml供试液的平均菌落数，按平皿法计数规则报告菌数；控制菌检查时，可加大增菌培养基的用量。
②离心沉淀法取一定量的供试液，500转/分钟离心3分钟，取全部上清液混合。用于细菌检查。
③薄膜过滤法见细菌、霉菌及酵母菌计数项下的“薄膜过滤法”。
④中和法凡含汞、砷或防腐剂等具有抑菌作用的供试品，可用适宜的中和剂或灭活剂消除其抑菌成分。中和剂或灭活剂可加在所用的稀释液或培养基中。

5. 纯化水微生物限度检查法需要阳性对照吗

4.10微生物限度(薄膜过滤法)
4.10.1取相当于每张滤膜含1g或1ml供试品的供试液，加至适量的稀释剂中，混匀，过滤。若供试品每1g或1ml所含的菌数较多时，可取适量稀释剂的供试液1ml过滤。用pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液或其他适宜的冲洗液冲洗滤膜，冲洗方法和冲洗量同“计数方法的验证”。冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基平板上培养。每种培养基至少制备一张滤膜。
4.10.2阴性对照试验 取试验用的稀释液1ml，照上述薄膜过滤法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。
4.10.3培养和计数 除另有规定外，细菌培养48小时，逐日点计菌落数，一般以48小时的菌落数报告；霉菌、酵母菌培养72小时，逐日点计菌落数，一般以72小时的菌落数报告；必要时，可适当延长培养时间至5～7天进行菌落计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落平均数不少于15，则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。
4.10.4菌数报告原则 以相当于1g或1ml供试品的菌落数报告菌数；若滤膜上无菌落生长，以<1报告菌数（每张滤膜过滤1g或1ml供试品），或<1乘以稀释倍数的值报告菌数。

6. 薄膜过滤法，纯化水的微生物限度检验，都需要什么设备

准备工作：
用纯化水浸泡滤膜，浸泡完全后放入滤杯中，包好滤杯，连同回量筒、培养基、平皿答、取膜器、三角烧瓶等一起121℃灭菌30min。
灭菌后的物品一并传入洁净室中，微生物限度过滤器上连好已经灭好的滤杯，用缓冲液先润湿滤膜，抽掉缓冲液，然后倒入供试液（10倍稀释），滤过，再用缓冲液冲洗滤膜。
过滤结束后取下滤膜平贴于R2A琼脂培养基平板上，32℃倒置培养5天。
菌落计数（平皿上长几个菌结果就报几个菌）

7. 纯化水微生物限度检查方法

4.10微生物限度(薄膜过滤法)
4.10.1取相当于每张滤膜含1g或1ml供试品的供试液，加至适量的稀释剂中，混匀，过滤。若供试品每1g或1ml所含的菌数较多时，可取适量稀释剂的供试液1ml过滤。用pH7.0无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液或其他适宜的冲洗液冲洗滤膜，冲洗方法和冲洗量同“计数方法的验证”。冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基平板上培养。每种培养基至少制备一张滤膜。
4.10.2阴性对照试验 取试验用的稀释液1ml，照上述薄膜过滤法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。
4.10.3培养和计数 除另有规定外，细菌培养48小时，逐日点计菌落数，一般以48小时的菌落数报告；霉菌、酵母菌培养72小时，逐日点计菌落数，一般以72小时的菌落数报告；必要时，可适当延长培养时间至5～7天进行菌落计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落平均数不少于15，则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。
4.10.4菌数报告原则 以相当于1g或1ml供试品的菌落数报告菌数；若滤膜上无菌落生长，以<1报告菌数（每张滤膜过滤1g或1ml供试品），或<1乘以稀释倍数的值报告菌数。
这是我们公司的纯化水微生物检测部分内容，请参考。

8. 中国药典微生物限度检查法的稀释液和培养基制备方法

稀释液配制后，应采用验证合格的灭菌程序灭菌。
1 .pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液
照无菌检查法（附录XII A）制备。
2.pH6.8无菌磷酸盐缓冲液、pH7.6无菌磷酸盐缓冲液
按缓冲液（二部附录XV D）配制后，过滤，分装，灭菌。
如需要，可在上述稀释液灭菌前或灭菌后加入表面活性剂或中和剂等。
3.0.9%无菌氯化钠溶液
取氯化钠9.0g，加水溶解使成1000ml，过滤，分装，灭菌。 培养基可按以下处方制备，也可使用按该处方生产的符合要求的脱水培养基。配制后，应采用验证合格的灭菌程序灭菌。
1.营养琼脂培养基、营养肉汤培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基及改良马丁琼脂培养基
照无菌检查法（附录XII A）制备。
2.玫瑰红钠琼脂培养基
胨 5.0g
玫瑰红钠 0.0133g
葡萄糖 10.0g
琼脂 14.0g
磷酸二氢钾 1.0g
水 1000ml
硫酸镁 0.5g
除葡萄糖、玫瑰红钠外，取上述成分，混合，微温溶解，滤过，加入葡萄糖、玫瑰红钠，分装．灭菌。
3.酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基（YPD )
胨 10.0g
琼脂 14.0g
酵母浸出粉 5.0g
水 1000ml
葡萄糖 20.0g
除葡萄糖外，取上述成分．混合，微温溶解，滤过，加人葡萄糖，分装．灭菌。
4．胆盐乳糖培养基(BL )胨20.0g
磷酸二氢钾 1.3g
乳糖 5.0g
牛胆盐 2.0g
氯化钠 5.0g
（或去氧胆酸钠） ( 0.5g)
磷酸氢二钾 4.0g
水 1000ml
除乳糖、牛胆盐或去氧胆酸钠外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.4 ±0.2，煮沸，滤清，加人乳糖、牛胆盐或去氧胆酸钠，分装，灭菌。
5.乳糖胆盐发酵培养基
胨 20.0g
0.04%溴甲酚紫指示液 25ml
乳糖 10.0g
水 l000ml
牛胆盐 5.0g
除0.04%溴甲酚紫指示液外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.4 ±0.2，加人0.04%溴甲酚紫指示液，根据要求的用量分装于含倒管的试管中。灭菌。所用倒管的规格应保证产气结果的观察。
6．曙红亚甲蓝琼脂培养基（EMB )
营养琼脂培养基 100ml
曙红钠指示液 2ml
20%乳糖溶液 5ml
亚甲蓝指示液 1.3～1.6ml
取营养琼脂培养基，加热溶化后，冷至60℃，按无菌操作加入灭菌的其他3种溶液，摇匀，倾注平皿。
7.麦康凯琼脂培养基（MacC）胨20.0g
1%中性红指示液 3ml
乳糖 10.0g
琼脂 14.0g
牛胆盐 5.0g
水 l000ml
氯化钠 5.0g
除乳糖、1%中性红指示液、牛胆盐及琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.2 ±0.2，加入琼脂，加热溶化后，再加入其余各成分，摇匀，分装，灭菌，冷至约60℃，倾注平皿。
8.4 -甲基伞形酮葡糖昔酸（4-methylumbelliferyl-β-D-glucuionide，MUG）培养基
胨 10.0g
磷酸二氢钾（无水） 0.9g
硫酸锰 0.5mg
磷酸氢二钠（无水） 6.2g
硫酸锌 0.5mg
亚硫酸钠 40mg
硫酸镁 0.1g
去氧胆酸钠 1.0g
氯化钠 5.0g
MUG 75mg
氯化钙 50mg
水 l000ml
除MUG外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，加人MUG，溶解，每管分装5ml，灭菌。
9.三糖铁琼脂培养基（TSI )
胨 20.0g
牛肉浸出粉 5.0g
乳糖 10.0g
蔗糖 10.0g
葡萄糖 1.0g
氯化钠 5.0g
硫酸亚铁 0.2g
硫代硫酸钠 0.2g
0.2%酚磺酞指示液 12.5ml
琼脂 12.0g
水 1000ml
除三种糖、0.2%酚磺酞指示液、琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.3±0.1,加入琼脂，加热溶化后，再加入其余各成分，摇匀，分装，灭菌，制成高底层（2～75px）短斜面。
10．四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）
胨 5.0g
硫代硫酸钠 30.0g
牛胆盐 1.0g
水 l000ml
碳酸钙 10.0g
取上述成分，混合，微温溶解，灭菌。
临用前，取上述培养基，每10ml加入碘试液0.2ml和亮绿试液0.lml，混匀。
11.沙门、志贺菌属琼脂培养基（SS）
胨 5.0g
硫代硫酸钠 8.5g
牛肉浸出粉 5.0g
中性红指示液 2.5ml
乳糖 10.0g
亮绿试液 0.33ml
牛胆盐 8.5g
琼脂 16.0g
枸橼酸钠 8.5g
水 1000ml
枸橼酸铁铵 1.0g
除乳糖、中性红指示液、琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.2±0.1,滤过，加入琼脂，加热溶化后，再加入其余各成分，摇匀，灭菌，冷至60℃，倾注平皿。
12．胆盐硫乳琼脂培养基（DHL )
胨 20.0g
枸橼酸钠 1.0g
牛肉浸出粉 3.0g
枸橼酸铁铵 1.0g
乳糖 10.0g
中性红指示液 3ml
蔗糖 10.0g
琼脂 16.0g
去氧胆酸钠 1.0g
水 l000ml
硫代硫酸钠 2.3g
除糖、指示液及琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.2±0.1,加入琼脂，加热溶化后，再加人其余成分，摇匀，冷至60 ℃，倾注平皿。
13.溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基
胨 10.0g
溴化十六烷基三甲铵 0.3g
牛肉浸出粉 3.0g
琼脂 14.0g
氯化钠 5.0g
水 l000ml
除琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.5±0.1，加入琼脂，加热溶化后，分装，灭菌，冷至60 ℃，倾注平皿。
14．亚碲酸盐肉汤培养基
临用前，取灭菌的营养肉汤培养基，每100ml中加人新配制的1%亚谛酸钠（钾）试液0.2ml，混匀，即得。
15．卵黄氯化钠琼脂培养基
胨 6.0g
10%氯化钠卵黄液 100ml
牛肉浸出粉 1.8g
琼脂 14.0g
氯化钠 30.0g
水 650ml
除10 %氯化钠卵黄液外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.6土0 .1，灭菌，待冷至约60 ℃，以无菌操作加入10%氯化钠卵黄液，充分振摇，倾注平皿。
10%氯化钠卵黄液的制备取新鲜鸡蛋1个，以无菌操作取出卵黄，放入10%无菌氯化钠溶液100ml中，充分振摇，即得。
16.甘露醇氯化钠琼脂培养基
胨 10.0g
酚磺酞指示液 2.5ml
牛肉浸出粉 1.0g
琼脂 14.0g
甘露醇 10.0g
水 l000ml
氯化钠 75.0g
除甘露醇、酚磺酞指示液及琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节州值使灭菌后为7.4 ±0.2，加入琼脂，加热溶化后，滤过，分装，灭菌，冷至60 ℃，倾注平皿。
17．乳糖发酵培养基
胨 20.0g
乳糖 10.0g
0.04%溴甲酚紫指示液 25ml
水 l000ml
除0.04%溴甲酚紫指示液外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.2±0.2，加入指示液，分装于含倒管的小试管中，每管3ml．灭菌。
18．绿脓菌素（Pyocyanin）测定用培养基（PDP琼脂培养基）
胨 20.0g
甘油 l0ml
氯化镁（无水） 1.4g
琼脂 14.0g
硫酸钾（无水） 10.0g
水 1000ml
取胨、氯化镁、硫酸钾和水混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.3±0.1，加入甘油及琼脂，加热溶化，混匀，分装于试管，灭菌，置成斜面。
19.梭菌增菌培养基
牛肉浸出粉 10.0g
盐酸半胱氨酸 0.5g
胨 10.0g
氯化钠 5.0g
酵母浸出粉 3.0g
醋酸钠 3.0g
可溶性淀粉 1.0g
琼脂 0.5g
葡萄糖 5.0g
水 1000ml
取上述成分，混合，加热煮沸使溶解，调节pH值使灭菌后为6.8士0.2，加热溶化，滤过，分装，灭菌。
20.哥伦比亚琼脂培养基
酪蛋白胰酶消化物 10.0g
肉胃酶消化物 5.0g
心胰酶消化物 3.0g
酵母浸出粉 5.0g
玉米淀粉 1.0g
氯化钠 5.0g
琼脂 15.0g
水 1000ml
除琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值使灭菌后为7.3士0.2，加入琼脂，加热溶化，滤过，分装，灭菌，冷至45～50 ℃，加人相当于20mg庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素，混匀，倾注平皿。
21．沙氏葡萄糖液体培养基
胨 10g
葡萄糖 40g
水 1000ml
除葡萄糖外，取上述成分，混合，微温溶解，滤过。加人葡萄糖，溶解，分装，灭菌。
22．沙氏葡萄糖琼脂培养基
胨 10g
水 1000ml
葡萄糖 40g
琼脂 14g
除琼脂和葡萄糖外，混合，微温溶解，滤过。加入琼脂和葡萄糖，溶解，分装，灭菌。
23.（科玛嘉）念珠菌显色培养基（注1）
胨 10.2g
琼脂 15g
氢罂素 0.5g
灭菌水 1000ml
色素 22.0g
除琼脂外，取上述成分，混合，微温溶解，调节pH值至6.3士0.2。滤过，加入琼脂，加热煮沸，不断搅拌至琼脂完全溶解，倾注平皿。
24.1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基
黄色玉米粉 40g
琼脂 10～15g
聚山梨酯80 10ml
水 1000ml
取玉米粉、聚山梨酯80及蒸馏水500ml，混合，65℃加热30分钟，混匀，用纱布滤过，补足原水量。取琼脂，水500ml，混合，加热溶解。将以上两种溶液混合，摇匀，分装，灭菌。

9. 微生物纯化水实验，做几个稀释度，是将供试液放到培养皿里还是放到抽滤那块儿

纯净水里面的微生物本身就很少 如果多了，人喝了肯定得拉肚子 所以测里面的微生物版含量的时候根本不用稀权释
如果经过稀释之后，测数反而长出菌来了，有可能是污染，有可能是本身水里面含有的杂菌正好在那0.1ml的水里存在，正好被吸上去了