A. C18色谱柱问题
你怎么保存的？
用的时候不能用酸性碱性过强的流动相，用完后一定要用有机相和水相梯度冲洗几遍（可能的话直接冲过夜），尤其是你用的流动相有酸、碱、缓冲液、盐等东西的时候一定要换成蒸馏水好好冲洗。
另外最后保存的时候一定要把柱子里灌满有机溶解（甲醇或乙腈），冲至平衡，一定不能留水在里面（尤其是酸性的水液）。
20个柱体积不够，你是不是用酸碱盐了？你最好用甲醇（乙腈）-水
梯度100%-10%
（每次梯度至少20min）反复洗涤，另外用乙腈保存比甲醇好。
B. 那些HPLC色谱柱可以用纯水
你问的应该是反相色谱抄柱，因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列，Aichorm的Aqua系列，都是可以做纯水相的。
但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例，那就不必了，普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗，不超过10个柱体积，是没什么问题的。
C. 正相C18色谱柱进一点水会影响柱效吗
正相C18色谱柱。判断色谱柱柱效下降可以通过以下几个途径： 1.看峰分离度内怎么样,分离度直接关系容测试结果准确性,可以判断柱效是否下降,柱效下降分离度一般会变差. 2.通过谱图峰型的变化,是否有严重前伸和拖尾现象,峰型是否规则来看,如果峰型很差了,柱效已经下降了,可以及时采用乙腈和甲醇等溶剂进行修复. 3.通过压力变化和出峰时间来判断,一般柱效下降时伴随着柱压的升高和降低,此时出峰的时间也会和之前有很大差异. 4.还可以根据新的柱子的保留时间判断,看重复性,平行性如何. 1) 保留时间变短； 2）理论塔板数降低； 3）峰对称度变差； 4）分离度减小.
D. 液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子，能用纯水 冲柱子吗
C18柱子不能用纯抄水冲洗，再说本来就堵了，压力很高应该选择压力低的溶剂。
如果你确定是堵塞了，就用纯乙腈反冲，先用低一点的流速，比如01ml/min，看压力情况，不要超过200bar，再慢慢提高流速，但不要超过1.的流速，如果是真的堵了，可能会压力慢慢降下来的。
如果上面方法不行，那还有可能是盐析堵的，那就用乙腈：水=90：10反冲。
E. 在冲洗高效液相C18反相柱的时候，为什么不能用纯水
相C18色谱柱（即憎水柱子）如果用纯水冲洗后，如果立即停泵则由于其憎水（疏水专）的缘故使得柱子内属的水因而流失掉，长时间停泵使得柱子干掉（变干），会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷（也说成是失去支撑倒下），柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢？诶！不要惊慌，只要你不停泵，上述情况不会立即发生，我们只要保证最后用有机相冲洗柱子，停泵后使柱子内留存的是有机相，就无大碍，
F. 为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗
容易引起疏水坍塌，把强保留物质冲出来，会毁了柱子的，所以水相不能超过95%，最开始的梯度淋洗也是高有机相到高水相，但是不是纯水相。
G. 用0.3%的冰乙酸水进HPLC C18色谱柱，对柱子有影响吗
如果所用色谱柱能耐酸和纯水，应该没有问题，但通常情况下，会加入一定量的有机相，如甲醇、乙腈等。
H. 纯水是否能通过高效液相色谱柱
看是什么柱子，有一些做糖的柱子就是要求纯水做流动相的。但一般的C8或C18柱子不行，要求最少5%有机相，以防对色谱柱伤害
I. 菲罗门色谱柱 gemini c18能走100%的水吗
可以。
但是对柱子损伤有点大，寿命会缩减很多。不光是菲罗门的，一般的色谱柱都会这样。即便官方说是100%耐水的柱子，用纯水相对于色谱柱也会有很大的伤害的。
记得用完之后一定要用甲醇或者乙腈封存。不然容易长微生物。
J. 色谱柱中固定相YWG-C18是什么物质
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