① 请问如何配制细胞用的EGTA,母液浓度是2M
这个用母液稀释就好了呀!细胞用的EGTA浓度要看你是做什么用了,对照觉得应该是等渗液http://ajpregu.physiology.org/content/269/4/R848
http://www.jbc.org/content/275/52/41227.full
可以参考下
② EGTA能溶解在蒸馏水中吗溶解度是多大
像这种多碳的有机酸都应该变成盐类再溶解吧,参见词条http://ke..com/view/1633343.htm,溶于氢氧化钠溶液。
③ 水杨基荧光酮-氯代十六烷基吡啶光度法
方法提要
水中铝离子与水杨基荧光酮及阳离子表面活性剂氯代十六烷基吡啶在pH在5.2~6.8范围内形成玫瑰红色三元配合物,用以光度法测定。
本法最低检测质量为0.2μg。若取10mL水样测定,检测下限为0.02mg/L。
仪器和装置
分光光度计。
具塞比色管25mL,使用前需经(1+9)HNO3浸泡除铝。
试剂
水杨基荧火酮溶液(0.2g/L)称取0.020g水杨基荧光酮,加入25mL(95+5)乙醇及1.6mLHCl,搅拌至溶解后加加纯水至100mL。
氟化钠溶液ρ(F-)=1.1mg/mL。
乙二醇双(氨乙基醚)四乙酸(EGTA)溶液(1g/L)称取0.1gETGTA,加纯水约80mL,加热并不断搅拌至溶解,冷却后加纯水至100mL。
二氮杂菲溶液(2.5g/L)称取0.25g二氮杂菲加90mL水,加热并不断搅拌至溶解,冷却后加水至100mL。
除干扰混合溶液临用前将EGTA溶液、二氮杂菲溶液及NaF溶液以(4+2+1)配制混合溶液。
缓冲液称取16.4g六亚甲基四胺,用纯水溶解后加入20mL三乙醇胺、80mL2mol/LHCl,加纯水至500mL。此液用酸度计测定并用2mol/LHCl及六亚甲基四胺调pH至6.2~6.3。
氯代十六烷基吡啶溶液(CPC)(10g/L)称取1.0g氯代十六烷基吡啶,加入少量纯水搅拌成糊状,加纯水至100mL,轻轻搅拌并放置至全部溶解。此液在室温低于20℃时可析出固形物。浸于热水中即可溶解,仍可继续使用。
铝标准储备溶液ρ(A1)=1.00mg/mL见81.30.1。
铝标准溶液ρ(A1)=1.00μg/mL见81.30.1。
校准曲线
分取0mL、0.20mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL和3.00mL铝标准溶液于25mL比色管中并加水至10.0mL。加入3.5mL除干扰混合溶液摇匀,加5.0mL缓冲液、1.0mLCPC溶液,盖上比色管塞,上下轻轻颠倒数次(尽可能少产生泡沫以免影响定容),再加1.0mL水杨基荧光酮溶液,加水至25mL,摇匀。20min后,于波长560nm处,用1cm比色皿,以试剂空白为参比,测量吸光度,绘制校准曲线。
分析步骤
取10.0mL水样于25mL比色管中。以下按校准曲线步骤操作,从曲线上查出水样中铝的质量。水样中铝的质量浓度计算参见公式(81.9)。
注意事项
水中常见的离子在以下浓度不干扰测定:K+20mg/L;Na+500mg/L;Pb2+1mg/L;Zn2+1mg/L;Cd2+0.5mg/L;Cu2+1mg/L;Mn2+1mg/L,Li+2mg/L,Sr2+5mg/L,Cr6+0.04mg/L,SO42-250mg/L,Cl-300mg/L,NO3--N50mg/L,NO2--N50mg/L。在乙二醇双(氨乙基醚)四乙酸(EGTA)存在下,Ca2+200mg/L,Mg2+100mg/L不干扰测定。在二氮杂菲在存在下,Fe2+0.3mg/L不干扰测定。磷酸氢二钾可隐蔽0.4mg/LTi4+的干扰。Mo6+0.1mg/L以上严重干扰。除余氯的Na2S3O3(7~21mg/L)、二氮杂菲(0.1~0.4g/L),EGTA(0.2g/L)不干扰测定。