Ⅰ 我的液相C18反相柱,用纯乙腈冲洗的压力由开始的3、4MPa上升到现在的20几MPa,怎么回事急需解救!
如果你接其他的柱子没有问题的话,肯定是你的柱子之前的盐没有专冲洗干净导致盐结晶了。属盐用有机相是冲不掉的,只能用水冲,但是像这种反相柱不能用纯水冲,纯水会溶解硅胶,导致相坍塌。
你可以视情况改变有机相与水的比例来冲。一般可用5%的甲醇溶液小流速冲洗。 不行就反冲吧。
希望对你有帮助,望采纳!!
Ⅱ 反相C18柱的展开剂怎么确定恩
相C18色谱柱(即憎水柱子)如果用纯水冲洗后,如果立即停泵则由于其憎水版(疏水)的缘故使得柱权子内的水因而流失掉,长时间停泵使得柱子干掉(变干),会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷(也说成是失去支撑倒下),柱子就这样报废了。
Ⅲ 安捷伦高效液相色谱c18柱的洗柱方法
第一、安捷伦的色谱柱有很多种,所以要分清类型去冲洗。
第二、作为普通C18柱,尤其是硅胶基质的普通C18柱,对酸碱盐以及水,都是造成柱子的损坏的流动相构成。水不能过多(除了带AQ的纯水柱,一般各家品牌都有这款防水柱)我个人认为只要超过80%的水的流动相,都会造成C18的寿命缩短。所以做高水相的流动相分析时请注意选合适的柱子。酸对柱子的损伤是不可逆的,一定要控制PH,我个人认为PH在2以下的都要做好费柱子的准备。碱性条件是对于硅胶基质的C18的弱项,一般的硅胶基质的C18碱性条件都不太耐用,但现在也有碱性PH11的柱子,但比较贵。盐对色谱柱的影响主要是盐析造成的,而且是致命。
第三冲洗方法的问题。冲洗方法根据使用的流动相和样品的不同冲洗方法要加以区分。一般不加酸碱盐,水相也不高的情况(如甲醇水60:40),无需太过冲洗,冲洗的目的就是为了把样品的杂质冲出即可。保存流动相保存即可。酸和碱的条件下,原则上是将酸碱冲出色谱柱,保存在甲醇水即可(如60:40比例可根据要使用的流动相,只要水相不高即可)。盐的条件比较麻烦,处理不好,不仅仅色谱柱出问题而且仪器也比较麻烦。常用的就是高水相流动相甲醇-水(10:90)将盐冲出(注意压力),然后用纯甲醇冲洗(这一步是恢复高水相对色谱柱的损伤),最后保存在一般的甲醇水体系即可。
第四点,冲洗的时候注意是压力,最好是从小流速开始慢慢提升流速到压力许可的范围。冲洗的时间,准确的是流量一般色谱柱的冲洗都要达到10-20倍的柱体积。
Ⅳ 老师,我做液相的,昨晚Agilent XDB C18的柱子被我用水冲了40分钟,有什么解救方法
你好,咱们C18的柱子一般是不能走纯水的,40min水应该还不是很严重,你用纯甲醇版低流速冲色谱柱2小时,进权样一个以前走过的物质,看看柱效情况。如果不理想了,进一针二氯甲烷,再用甲醇冲。冲完后,在进样看看。
Ⅳ C18反相柱怎样才能冲得够干净
相C18色谱柱(即来憎水柱自子)如果用纯水冲洗后,如果立即停泵则由于其憎水(疏水)的缘故使得柱子内的水因而流失掉,长时间停泵使得柱子干掉(变干),会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷(也说成是失去支撑倒下),柱子就这样报废了。
Ⅵ 在冲洗高效液相C18反相柱的时候,为什么不能用纯水
相C18色谱柱(即憎水柱子)如果用纯水冲洗后,如果立即停泵则由于其憎水(疏水专)的缘故使得柱子内属的水因而流失掉,长时间停泵使得柱子干掉(变干),会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷(也说成是失去支撑倒下),柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢?诶!不要惊慌,只要你不停泵,上述情况不会立即发生,我们只要保证最后用有机相冲洗柱子,停泵后使柱子内留存的是有机相,就无大碍,
Ⅶ 有谁知道用c18柱进行液相色谱,Boc-His(Boc)-OH的保留时间是多少
由于不知道是整来体后移还是部分源后移,我把两个问题都写出来了
保留时间漂移
首先走样之前色谱柱是否平衡好,压力是否稳定,还有,流动相的PH值会影响色谱柱的固定相,必须在范围内,否则固定相可能会溶解,还有就是色谱柱是不是被污染了,强保留组分可能降低或者影响柱效。
及时更换流动相也是必要的,有些流动相会随着时间而改变,影响检测,还有就是如果用的是疏水的色谱柱(如C18),不能用纯水相洗,防止疏水坍塌。
保留时间波动
色谱柱的温度是影响关键,需与室内温度上下波动二度为宜,还有就是流速是否稳定,泵中是否有气泡。是否平衡好,流动相是否不恰当等。
Ⅷ 为什么普通C18色谱柱不能用纯水冲洗
容易引起疏水坍塌,把强保留物质冲出来,会毁了柱子的,所以水相不能超过95%,最开始的梯度淋洗也是高有机相到高水相,但是不是纯水相。
Ⅸ 液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子,能用纯水 冲柱子吗
C18柱子不能用纯水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。
如果内你确定是堵容塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。
如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,那就用乙腈:水=90:10反冲。