HPLC用水来源
1 专门的纯水机或超纯水机;
2 去离子水重蒸;
3 二次或三次重蒸水;
4 采用类似家用的纯水机;
5 市场上瓶装的纯净水或蒸馏水;
6 其它途径
以上的水除第1项的水能用于梯度淋洗外,其余的水均难用于梯度淋洗。不管采用何种途径,配制流动相应用新鲜水,水质越高放置时间越短。
理想的HPLC用水应为18.2MΩ的超纯水,并通过0.22um的滤膜,除去热源、有机物、无机离子及空气等。
最小检测限的计算方法
(以N2000色谱工作站为例)
CL=2*Nd*c*20/HV
注:Nd 基线噪声,单位:mV
c 样品浓度
H 峰高,单位:mV(或AU)
V 进样体积
例:
如基线噪声为20微伏即0.02mV,萘的甲醇标样溶液浓度为0.0001g/L,峰高145000微伏即145mV,进样体积为20微升,即得:
CL=2*0.02*0.0001*20/145*20=2.76e-8
即10的负8次方
对仪器进行维护时应该遵循的几条基本规则
1. 一次规则
当系统出了故障,你可以试探性地改变某些状态,一次可以改变一个参数。例如,限制色谱峰脱维的问题,可以依次改变流动相,换保护柱,换分析柱等。做一些简单的改变步骤,也许就能解决问题。
2. 二次比较规则
在动手检修之前已经明确了故障所在,或者已经确定了解决故障的方案。换句话说,动手之前已经找对了解决办法。例如,在进样过程中发现内标物的峰值变低了,可以重复进样看看重复性如何,如果是偶然变低,是否是定量管里进了气泡。这个规则可用于考察系统改变后的情况。更换了流动向后在正式进样前可以进两次标准品以检查保留时间的稳定情况和色谱峰的稳定性。在梯度洗脱中如果出现了多余的峰,可以空载梯度洗脱一次(真的有问题吗?),用此规则可以避免不必要的改变,尽快确定纠正措施。
3. 取代规则
用好的部件换下可疑的部件,是查找故障的最好方法。如果你怀疑检测器引起了噪音,就换一个性能好的检测器。如果故障被排除了,就说明换下的检测器有问题。这个规则应用的规模有大有小,可以从换整个部件到换印刷线路板上的集成块。
4. 换回规则
这个规则和取代规则一起运用,好部件取代了可疑部件后情况并未得到改善,应重新换上原部件。这样做的维修费用最小,也防止了用过的部件积压下来。这条规则仅适用于单一的故障。换回原则不适用于以下的情况:
(1) 在取下时新部件已损坏(如泵密封垫圈);
(2) 部件价格低(如柱内衬过滤片);
(3) 重新装上原部件要冒损坏的风险;
(4) 定期更换的部件。
5. 参考条件规则
通常有两种参考条件:①标准参考条件;②试验参考条件。
标准参考条件也叫标准试验条件,是从一个系统到另一个系统,从一个实验室到另一个实验室都易于验证的条件。用该条件所测得的数据有助于识别实际试验和系统间的问题。如果在某试验条件下系统压力升高,而在标准条件下压力正常。这说明系统异常是由实验室的变化所引起的。下表列举了启用新色谱柱是的标准试验条件,在使用过程中也可用此标准试验条件检查系统的情况。
流动相 甲醇/水(体积比=70/30)
色谱柱 C18
反相 流速 1mL/min
检测器 UV 254nm
样品 尿嘧啶(用于t0)
苯酚,苯乙酮,硝基苯,苯甲醚,甲苯
流动相 正己烷/异丙醇(体积比=75/25)
色谱柱 腈基
极性键合相 流速 1mL/min
检测器 UV 254nm
样品 硝基苯,苄醇,2,4-二硝基甲苯,对硝基苄醇
流动相 正己烷/二氯甲烷/异丙醇胺(体积比=95/4/1)
色谱柱 硅胶
正相 流速 1mL/min
检测器 UV 254nm
样品 2-苯-2-丙醇,甲苄醇,肉桂醇
试验参考条件是用于检查正常系统每天的工作情况。要选最方便的方法验证这种条件。每天可以打印两张校正用色谱图作对照,检查保留时间、峰宽、系统压力等方面的变化。发现峰的斜率、色谱柱塔板数和其他参数与原来色谱图相比有了变化,说明系统在运行中可能发生了问题。当然发生问题不结合实际分析程序考虑,只通过查找标准参考色谱图是不能一目了然的。
6. 记录规则
这条规则往往被人忽视。应该在每次维护和故障排除后都作记录。例如,对系统的某
B. 纯净水桶形似一个圆柱形,从桶内量得底面直径为26厘米、高为36厘米。这个水桶大约
表面积:36*3.14*26=2939.04(平方厘米版)
26除以权2=13(厘米)
13*13*3.14*2=1061.32(平方厘米)
2939.04+1061.32=4000.36(平方厘米)
体积:26除以2=13(厘米)
13*13*3.14*36=19103.76(立方厘米)
C. 纯水是否能通过高效液相色谱柱
看是什么柱子,有一些做糖的柱子就是要求纯水做流动相的。但一般的C8或C18柱子不行,要求最少5%有机相,以防对色谱柱伤害
D. 超纯水机的纯化柱能用多少时间
超纯水机的纯化柱的使用时间和柱子的容量与产水量有关系的。还与进水水质有关。版所以不能轻易说能用多长权时间。 南京权坤生物科技有限公司(Nanjing QuanKun bio-technology Co.,Ltd)作为国内知名的超纯水设备生产供应商,专业专注于超纯水仪器的研发、生产、销售以及提供超纯水系统的全套解决方案。
E. 那些HPLC色谱柱可以用纯水
你问的应该是反相色谱抄柱,因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列,Aichorm的Aqua系列,都是可以做纯水相的。
但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例,那就不必了,普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗,不超过10个柱体积,是没什么问题的。
F. 液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子,能用纯水 冲柱子吗
C18柱子不能用纯水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。
如果内你确定是堵容塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。
如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,那就用乙腈:水=90:10反冲。
G. 纯净水用离子柱好,还是加阻垢剂好
纯净水,简称净水或纯水,是纯洁、干净,不含有杂质或细菌的水,是以符合生活饮用水卫生标准的水为原水,通过电渗析器法、离子交换器法、反渗透法、蒸馏法及其他适当的加工方法制得而成,密封于容器内,且不含任何添加物,无色透明,可直接饮用。市场上出售的太空水,蒸馏水均属纯净水。有时候这个词也和化学实验室中提炼的蒸馏水或雨水通用。
H. 超纯水机里面的两个柱子什么用途
“双肢”意思就是长了两个肢,就是说一个柱子上长了两个肢,应该是一个柱基上内两个肢的柱子。在容普钢结构里有两个肢的格构柱;在顶升大跨度预应力钢丝束块组合屋面大梁的工艺,大梁的两端支座都是混凝土双肢柱组成的。不知道题所说的是什么场合?
I. 求助求助,waters的柱子不小心用纯水冲了
你问的应该是反相色谱柱,因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列内,Aichorm的Aqua系列,都是可以做纯水容相的。
但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例,那就不必了,普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗,不超过10个柱体积,是没什么问题的。
J. 液相色谱能不能用纯水冲柱子为什么
C18柱子不能用纯水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂.如果你确定是回堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低答一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的...