A. 什么叫薄膜过滤法,具体怎么操作呀
5.7.7 薄膜过滤法:
5.7.7.1 本法适用于有抗菌作用或大容量的供试品。
5.7.7.2 按集菌使内用规程安装好集菌仪。
5.7.7.3 取供试品擦拭消容毒后,除去塑料盖,插好导管,进行抽滤,滤液从排液管排出。
5.7.7.4 同法操作将培养基抽到全封闭式集菌培养器中。
5.7.7.5 取需气菌、厌气菌培养基和真菌培养基各1管,同法操作加入相应的溶剂作阴性对照。
5.7.7.6 阳性对照管应根据供试品特性在接种橱内加入相应对照菌液1ml。(抗细菌药物以金黄色葡萄球菌为对照菌,抗厌氧菌药物以生孢梭菌为对照菌,抗真菌药物以白色念珠菌为对照菌)。
5.7.7.7 需气菌、厌气菌培养基管置30-35℃培养箱中,真菌培养基管置20-25℃培养箱中各培养7日;阳性对照管细菌应在培养24-48小时,真菌应在培养24-72小时有菌生长。
B. 纯化水的微生物限度里的薄膜过滤法如何计数啊
采用薄膜过滤法进行细菌试验,误判风险要小些,所以发现问题的概率比直接接种法要大些。内所以,药典要求细菌试容验采用薄膜过滤法是有道理的。 tIet^:Ug
纯化水微生物限度检测薄膜过滤法是药典方法,已经是做了验证的,所以企业没有必要再做方法评价。
C. 纯化水中的微生物检测怎么做 要详细
采用滤膜法进行微生物检测是一种国际公认的微生物标准检验方法回,其得到AOAC、美国、欧答洲和日本等国家的药典、FDA和EPA等组织的承认,广泛应用于环境监测、食品及饮料工业、化妆品、制药工业品质控制和电子工业等领域.赛多利斯公司的滤膜法微生物检测产品成功地应用于滤膜法已有20多年的历史,实用而且方便实用,它简化了微生物检测程序.
滤膜法微生物检测:
将适当孔径的滤膜放入滤器,过滤样品,由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上.样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去.然后,将滤膜放在培养基上培养,营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换,在滤膜表面上培养出的菌落可以计数,并和样品量相关.
滤膜法的优点:
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与直接法比较,可以检测大量的样品
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浓缩效应使微生物检测的准确度提高
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带有菌落的滤膜,可作为检测的永久记录存档
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可见的菌落和样品量直接对应,得出定量结果
操作具体一点就是:薄膜过滤法检测,一个样过滤一份,就是200ml的纯化水通过滤膜,将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中,再接种到平皿中,制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿,即可
D. 薄膜过滤法,纯化水的微生物限度检验,都需要什么设备
准备工作:
用纯化水浸泡滤膜,浸泡完全后放入滤杯中,包好滤杯,连同回量筒、培养基、平皿答、取膜器、三角烧瓶等一起121℃灭菌30min。
灭菌后的物品一并传入洁净室中,微生物限度过滤器上连好已经灭好的滤杯,用缓冲液先润湿滤膜,抽掉缓冲液,然后倒入供试液(10倍稀释),滤过,再用缓冲液冲洗滤膜。
过滤结束后取下滤膜平贴于R2A琼脂培养基平板上,32℃倒置培养5天。
菌落计数(平皿上长几个菌结果就报几个菌)
E. 微生物薄膜过滤法,夹膜技巧
(1)验证试验方法:试验原理同前述薄膜过滤法。验证供试品对薄膜过滤法有抑细菌和抑真菌特性时,与实际的无菌检查相同,在同一型号的每个过滤器或过滤筒内过滤规定定量的供试品(容器数及每容器的过滤体积),用淋洗液淋洗滤膜至少3次,每次淋洗液体积为100ml,在最后一次淋洗液中,接入验证用菌种(接种量为10—100CFU);另取一过滤器或滤筒,不过滤供试品,重复以上淋洗操作,作为阳性对照。根据具体情况,可将整张滤膜或半张滤膜转移至100ml的指定验证用培养基内,或将培养基加入到装有滤膜的滤筒内。分别对表中所列菌种及相应的培养基逐一进行验证,并将容器置于适当的温度下培养,培养时间不超过14d。如果使用新的滤膜或滤过器(包括不同厂家或批号、型号),则要按上述薄膜过滤法的要求做 , 组试验,即样品试验组、蛋白胨对照组和阳性对照组重新进行验证确认。
(2)验证结果评价:如果供试品培养基容器内的培养基内明显可见微生物生长(混浊),并且与阳性对照容器内的培养结果相似,则在无菌检查试验中必须要过滤与验证试验相等量的供试品、淋洗液,淋洗相同次数及使用同量的培养基。如果与阳性对照容器内的培养结果相比,供试品容器内微生物生长现象不明显,则说明该检验量在此检验条件下有抑菌作用。应增加淋洗次数,重复以上实验。也可通过更换过滤膜并使用中和剂来消除产品的抑菌作用。USP规定,如果已淋洗了5次,并且每次淋洗液体积达到500ml,仍无法中和膜上的残余抑菌性物质,那么在无菌检查试验中就采用此淋洗次数与淋洗量作为最终淋洗方法。
F. 水质检测时,我们用薄膜过滤法。但是我有几个问题向老师请教.
1 生物酶并没来有你想像的多 不会影响细自菌生长 而且薄膜过滤后会被滤掉只剩下微生物
2 营养琼脂和玫瑰红钠都不是选择培养基 有时候会有都长的情况 营养琼脂培养基建议加TTC让细菌更容易观察 也可以通过其他方式来判断~比如细菌菌落大小不一 一般比较小 边缘光滑 味道臭 真菌酵母菌菌落大 有的会长毛 有酒香或霉味。更准确的方法是用选择培养基进一步培养 或显微镜观察 最好是增加阳性对照试验
G. 纯化水进行微生物限度检测,使用薄膜过滤法应该取多少
准备工作:用纯化水浸泡滤膜,浸泡完全后放入滤杯中,包好滤杯,连同量筒、培养基、专平皿、取膜器、三角属烧瓶等一起121℃灭菌30min。灭菌后的物品一并传入洁净室中,微生物限度过滤器上连好已经灭好的滤杯,用缓冲液先润湿滤膜,抽掉缓冲液,然后倒入供试液(10倍稀释),滤过,再用缓冲液冲洗滤膜。过滤结束后取下滤膜平贴于R2A琼脂培养基平板上,32℃倒置培养5天。菌落计数(平皿上长几个菌结果就报几个菌)
H. 薄膜过滤法做纯化水检验,只取1ml,没有将过滤膜完全湿润可以吗
准备工作:用纯化水浸泡滤膜,浸泡完全后放入滤杯中,包好滤杯,连同量筒、培养基、专平皿、取膜器、属三角烧瓶等一起121℃灭菌30min。灭菌后的物品一并传入洁净室中,微生物限度过滤器上连好已经灭好的滤杯,用缓冲液先润湿滤膜,抽掉缓冲液,然后
I. 纯化水薄膜过滤法操作过程,薄膜使用前是不是要用无菌的纯化水浸过啊
我用的时候是把薄膜放在有纯化水的三角瓶里,塞好橡胶塞,用牛皮纸包住,然后进行湿热灭菌。这样使用的时候好用镊子把薄膜夹出。