⑴ 请问羧甲基纤维素和DEAE纤维素分离蛋白有什么区别
羧甲基纤维素是弱阳离子交换填料，要求使用时的pH值要低于目的蛋白质等电点起码0.5个pH值单位，为了达到较好的分离效果，实际使用时最好是低于1个以上pH值单位。在低pH值下，有的不耐酸的杂质蛋白质会变性，届时离心除去，可首先去除一部分杂质蛋白质。
DEAE纤维素是弱阴离子交换层析填料，要求使用时的pH值要高于目的蛋白质等电点起码0.5个pH值单位，为了达到较好的分离效果，实际使用时最好是高于1个以上pH值单位。大多数蛋白质的等电点在6.0左右，可以耐受8.0，所以依据pH提高使得某些杂质蛋白质变性的做法多数情况下不可行。
这两种填料的工作pH值不同，但都可以用氯化钠来洗脱。交换基团不同，分离效果也不同，可以先用一种来纯化，得到初步纯化的产物之后再用另一种来纯化。因为有些蛋白质不能耐受酸，所以我建议先用羧甲基纤维素弱阴离子交换层析，再用DEAE纤维素弱阳离子交换层析，产物的纯度比单用一种时更高。
在对蛋白质的破坏方面，弱交换填料比强交换填料好，有的蛋白质用强离子交换来纯化，蛋白质结合再交换之后会损失很多活力，但是弱离子交换则损失的活力较少。但是弱离子交换的分辨率比强离子交换差一些。如果纯化得不好，又有强离子交换的，就试一下吧。lxj341401(站内联系TA)一个是阳离子交换填料，一个是阴离子交换填料，用哪个跟蛋白值的等电点pI还有所用缓冲液的pH有关，pH>pI时带负电荷，蛋白质能吸附到阴离子交换填料，相反的用阳离子交换。所以能不能代替看具体情况了。悦迷008(站内联系TA)Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-15 06:00:21:
这两个填料虽然都是离子交换用的，但一个是弱阴一个是弱阳，效果不同，没有一个能代替另一个的说法。
⑵ 请问一下什么叫做反相色谱常有的高效液相色谱是属于哪个类型的
反相色谱中，固定相非极性，流动相极性。
典型的流动相一般是水或水系缓冲液与甲醇、乙腈或四氢呋喃的混合物。典型的固定相是用脂肪烃硅完化的硅胶键合相，其它用于反相色谱的基质有石墨化碳和苯乙烯-二乙烯苯基质。反相色谱的性能还受残留的硅醇基的活性的影响。硅醇基与洗脱物的极性基团作用。因此，根据硅醇基的活性不同，填料显示出不同的选择性。而且，常能观察到碱性物质在硅醇基活性高的填料上产生拖尾峰。修饰硅醇基活性的一个办法是封端，即用硅烷化试剂把硅醇基转变成三甲基甲硅烷基基团。不过，即使是作了封端，基质表面的硅醇基密度还是比键合配基的密度大。硅醇基的活性也和硅胶的预处理（基质灭活）、硅胶纯度有关。碱性分析物的色谱分析推荐使用高纯度硅胶基质、充分封端的键合相。未封端的填料在许多应用中有可以获得不同选择性的优点。
使用带有离子电荷的固定相，使根据洗脱物电荷进行分离成为可能。对于硅胶基质的离子交换填料，离子基团通过标准的硅烷化技术键合到硅胶表面。对于聚合物基质的离子交换填料，离子交换基团分布于交联聚合物的整体（through the matrix）。有四种离子交换填料：强/弱阳离子交换填料和强/弱离子交换填料。弱离子交换填料的特征是电量与pH值有函数关系。以羧酸基为功能基的离子交换剂是弱阳离子交换剂的代表。弱阴离子交换剂由一级、二级、三级铵为功能基。大部分强离子交换剂的电荷与pH值无关。四级铵形成强阴离子交换剂，而磺酸基构成了强阳离子交换剂。所有这些离子交换基团都可以在聚合物基质上见到，主要用于分离生物大分子。除了弱阳离子基团外，其它功能基都可以键合到硅胶上。
反相色谱柱 C18、C8柱
⑶ 我要分离纯化一种未知酶，一切未知，想用凝胶层析和离子交换层析分离，不知选用什么填料合适有好的建议
建议用离子交换层析。凝胶过滤层析流速慢，上样量低，而且分离效果一般，凝胶回过滤答一般用于层析的后期包括除盐，去除降解片段之类的。
离子交换一般就用到DEAE，因为大部分蛋白都偏酸。要是你的酶是碱性蛋白，那就更好办，上个CM柱，其他杂蛋白就留不下多少了。
所以先拿DEAE试试吧。
⑷ 采用离子交换和反渗透工艺制备去离子水，一次填料多少大约多长时间更换一次填料
单位时间内的制水量和原水水质指标不知道，无法计算出填料的内数量。
需要清楚以下内容：容
1、原水水质指标；
2、处理工艺（反渗透还是阳床+阴床），填料是指阳树脂、阴树脂还是反渗透膜元件呢？
3、设备每天运行几个小时？比如说设备每天运行4小时，3年更换一次阳树脂，那么设备每天运行8小时，则寿命就会远远小于3年。
⑸ 既有分子排阻作用，又有离子交换功能的填料
色谱分析法基本原理
色谱法，又称层析法。根据其分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。
⑹ 关于离子交换色谱中弱阳离子交换的填料，只要是羧甲基（CM）的填料都行
这个我知道的也不多，我们公司代理的就有，TOSOH的，他的Toyopearl弱阳离子交换树脂，这个不错，资料有些，你要的话可以发给你，留个邮箱啥的
⑺ 我要纯化一种从细菌提取出来的未知粗酶，盐析后上离子交换，等电点未知，我准备选用DEAE-sephroseFF 填料
盐析后直接离子交换可能不太合适，最好先脱下盐，再栗子交换。
DEAE是阴栗子交换，PH调到PI以上， 填料可以重复利用
⑻ 为什么说弱离子交换填料分辨率高
强、弱酸(碱)交换器没什么区别,区别的是交换器体内的载体(离子交换树脂),当然弱酸(碱)型离子交换树脂的使用主要特点是周期制水量大,减少了排废量,自然节约了再生剂用量…。一杰水质
⑼ 色谱柱的填料有哪些阳离子交换柱
阳离子是指功能基团，有很多选择，强阳弱阳；基质又有多种，主要可分为硅胶和聚合物，聚合物种类比较多，如PSDVB，聚甲基丙烯酸酯等。