1. sumo融合蛋白的纯化时挂在Ni亲和柱上时是不是就还可以加sumo蛋白酶酶切，还是必须洗下来以后才能酶切
不是绝对的，两种方法其实都差不多。
但是柱切和洗脱后酶切还是有不同的。
柱切内比较方便，酶切容之后直接收流穿的部分就是目的蛋白。缺点是在洗脱之前不知道蛋白产量，可能努力了半天什么都没有，而且有些蛋白不稳定，可能在柱切过程中沉淀在柱子上了。
洗脱后再切，比较直观的检测初步富集的蛋白量，再决定加多少酶，而且能直观的检测酶切效率，确定是酶切之后要多一个去标签的过程。
2. 疏水柱为何挂不上蛋白，求解！
如果挂不上柱，表明不适合，更换其他柱子。 我的概念中不是所有蛋白都适合专使用属疏水层析！ 如果你尝试的过程中表现的非常不错，恭喜你，疏水层析后一般都会获得纯度非常高的蛋白。如果挂不上柱，表明不适合，更换其他柱子。 我做的几个蛋白除了钙调素能 ... 主要纠结在一点蛋白都没挂上，连咋的都没tianliut(站内联系TA)请问你用的柱子体积是多大的？你的样品的体积和浓度？我觉得最有可能是样品被稀释过多倍数造成的。建议换小体积的柱子或增大样品量。mssj300130(站内联系TA)其实pH对疏水柱还是有一定影响的，只是大部分情况下我们倾向于在中性环境下去挂柱，如果你的pH低于5的话，疏水性是会变强的，另外可以尝试一个硫酸钠，一般来讲硫酸纳，1M左右吧，再高可能溶解不到了，还有就是你在上柱前尝试过加一步硫胺沉淀吗，例如说25%左右的
3. 带gst标签的蛋白以包涵体形式表达，复性后仍不能挂柱，为什么
因为是融合蛋白，GST标签蛋白和目的基因蛋白融合在一起形成了一个更大的蛋白。
4. 货车不好挂柱和空档怎么办
手动挡汽车等红灯时间较短就可以踩住刹车挂一档就行。假如时间较长可以提上手刹,挂空挡。开自动挡汽车等红灯时,如果红灯时间短
5. 过年不挂柱子了。怎么处理
过年不挂柱子了。嗯，也可以去做一切其他的事。比如挂个红灯笼。挂一个彩带。这也是非常好的。
6. 商铺空调外机能不能挂在墙柱头上
空调外机只要挂的地方牢固都可以挂，你说的墙柱子上只要房屋主人允许也不影响通行是可以挂的。
7. HIS蛋白纯化后，没有蛋白，是蛋白没有挂柱，还是蛋白挂在柱子上没有下来，有什么好的解决方法吗。。。
在亲来和纯化中，his标签常常源会遇到这种问题， 没有收集到蛋白可能是蛋白溜走了，没有收集到，可能使样品的缓冲液不正确，尤其针对pH值，或者是his标签没有暴露出来，因此没有挂住，或者可以用WB检测一下HIS是否还在，更多his亲和纯化的相关问题，可见文章，总结的比较实际有用，希望对你有所帮助，http://wenku..com/view/521ff9cec281e53a5902ff27
8. His-taq纯化蛋白不挂柱子，可能的问题是什么求高人指点。
有这么几个来可能
1、你western检测的到目标蛋源白的标签吗？如果你的目标蛋白折叠的时候将你的HIS标签包裹进了蛋白内，HIS抗体是检测不到的。因此，即使你表达出来目标蛋白，没有标签怎样能挂上呢？
2、你的WASHBUFFER即洗杂蛋白的缓冲液的咪唑浓度过高，将目的蛋白冲洗了下去，待你洗脱的时候发现什么都没有挂上了。
9. PI9.8的重组蛋白怎么挂不柱子啊TRIS-HCL PB 缓冲体系下SP CM Q DEAE都不柱啊问题出在哪里 请哪位指教
您好！PI9.8建议用CM柱就行，使用pH6-7的PBS，挂不上直接穿透的话你测一下样品的电导，看专是否里属面有盐没除干净。如果实在不行，你换颗粒大一点的填料，羟基磷灰石也行。
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10. 镍柱纯化蛋白没有挂柱是什么原因
可能有多种原因导致 蛋白不挂柱子。
例如：
因为His标签被包到了蛋白三维结构里面。镍介质无法接触His 标签；
纯化工艺不利于结合作用发挥，例如咪唑；
蛋白不稳定，标签掉落。
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