电动移液器过滤膜

❶ 移液枪计算

移液器操作规范和使用注意事项：
1．设定移液体积
从大量程调节至小量程为正常调节方法，逆时针旋转刻度即可
从小量程调节至大量程时，应先调至超过设定体积刻度，再回调至设定体积，这样可以保证移液器的精确度
2．装配移液枪头
将移液枪垂直插入吸头，左右旋转半圈，上紧即可。
用移液器撞击吸头的方法是非常不可取的，长期这样操作回导致移液器的零件因撞击而松散，严重会导致调节刻度的旋钮卡住
3．吸液及放液
垂直吸液
吸头尖端浸入液面3mm以下，吸液前枪头先在液体中预润洗
慢吸慢放
放液时如果量很小则应吸头尖端可靠容器内壁
4．吸有液体的移液枪不应平放，枪头内的液体很容易污染枪内部而可能导致枪的弹簧生锈
5．移液枪在每次实验后应将刻度调至最大，让弹簧回复原型以延长移液枪的使用寿命
6.吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
7.为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层”液膜”，造成排液量偏小而产生误差。
8.浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
9.可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g.
10在设置量程时，请注意 旋转到所需量程 数字清清楚楚在显示窗中， 所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程，否则会卡住机械装置，损坏了移液器。
11.移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体（如浓酸、浓碱、有机物等）。
12.严禁使用移液器吹打混匀液体。
13.不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度。同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作

移液器的校准方法：
1、准备超纯水、万分之一天平（如果校正0.5~2.5ul量程的，至少要十万分之一的天平）、温湿度计、恒温室，还需准备一个小口容器，防止水分挥发。
2、按移液器总量程的100%、50%、10%分别进行第三和第四步。
3、吸头要反复吸取超纯水三次后，吸取固定容积的超纯水，推入放置在天平上的小口容器中，待数据稳定读取天平数值，同时记录温度。重复10次。
4、将测量的数据用iso8655中的计算公式计算获得对应温度下的体积，取平均值。
5、根据三个测量点的偏差，用移液器专用的校正扳手通过移液器的校正窗进行调整。
6、重复3、4步，直至偏差在ISO8655的要求内为止。
另外，不同的移液器的校正窗和扳手的形式是不同的：
1、Gilson的是在顶端的那个带有小孔的旋钮，标配是不带扳手的，因为Gilson是定期免费校正的。
2、Eppendorf的是在把手的侧边，有的型号是用一个铝箔覆盖，有的是用校正纸片贴住的，标配带有扳手，与拆卸套筒的工具公用。
3、BioHit的与Gilson类似。
如果是电动移液器，那校正就简单多了，一般测量完三个校正点的数据后，直接进入校正界面，将误差数据输入就可以自动校正了。
一般还是交给厂家或者代理商进行校正比较放心，一般地区总代都是购买了自动校正平台的，将移液器放在上面，机器自动进行测量和校正工作的。

❷ 人胚肾细胞衍生株293t细胞有什么特点

1. 养293细胞和293T一样。以293T为例，预先准备3个T150瓶的293T细胞，培养基为DMEM + 10% FBS，1% Glutamax ，1% 青霉素-链霉素。

2. 将细胞分到12分到12个T150瓶中，每瓶的细胞密度是8×106个。

3. 第二天，镜下检查细胞。细胞融合度应大致为30-40%，分布均匀。

4. 转染前1小时，取出细胞板，去除原有细胞培养基，加入20ml的Opti-MEM培养基，将细胞送回培养箱。

5. 取两支无菌的50ml离心管，其中一支中加入252 μg pNL-EGFP/CMV/WPREDU3 载体质粒，168 μg pCD/NL-BH*DDD
包装质粒和84 μg pLTR-G质粒，用Opti-MEM培养基补齐到18ml。另一支中加入500 μl Trans-EZ溶液和17.5 ml
Opti-MEM培养基，用电动移液器轻轻混匀。将Trans-EZ稀释液滴加到质粒管中，边加边轻轻晃匀。

关键步骤：推荐使用Qiagen质粒大抽试剂盒或相当的试剂盒所制备的质粒。

6. 室温孵育20分钟，使DNA和Trans-EZ充分结合形成转染复合体。

7.
取1支5ml的移液管，将得到的DNA-Trans-EZ复合体均匀滴加入到细胞培养板中，每板3ml。来回晃动培养板，混匀后放回到5%二氧化碳培养箱。每一皿细胞培养盘不要超过6盘。

8. 6小时后，移去细胞上清，更换为17ml的DMEM完全培养基。

9.
转染后一天观察细胞，所有的细胞应当都是健康的并且密度接近60-80%。如果所转染质粒带有GFP荧光，那么这时候可以看到大于95%的细胞都是带有荧光的。

10. 将细胞送回培养箱继续培养2天（36-48小时）。在这个过程中，细胞会逐渐融合形成多核体，大多数的细胞依然贴壁。

11. 收集所有的上清，分装到50ml离心管中。

12 4℃，500g离心10分钟，除去脱落的细胞和大的细胞碎片。

13 总的上清约为204 ml，用250-ml 0.45 μm PVDF过滤装置过滤。如果发现滤膜被堵住，表现为过滤速度变慢，更换新的滤器。

❸ 我的移液器按钮压下去弹不起来了，怎么办

第一步：移液器枪头的安装

移液器枪头的安装比较简单，常用的方法是旋转安装，把移液器顶端插入枪头，在轻轻用力下压的同时，左右微微转动，旋转上紧即可。

第二步：设定移液器的移液容积

为了实验结果的严谨性，一般移液容积设定要结合粗调和细调，首先通过旋转按钮将体积值迅速调整至接近自己的预想值；然后当体积值接近自己的预想值之后，应将移液器横置，水平放至自己的眼前，通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值，从而避免视觉误差所造成的影响。

第三步：预洗移液器枪头

为了确保实验的精度和准度，我们在安装了新的枪头或增加了容量值以后，应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次，这样做的目的是为了让枪头内壁形成一道同质液膜，使整个移液过程具有更高的重现性。

第四步：移液

先将移液器排放按钮按至第一停点，再将枪头垂直浸入液面，浸入的深度为：

P2、P10 ≦ 1 mm；
P20、P100、P200 ≦ 2 mm；
P1000 ≦ 3 mm；
P5mL、P10mL ≦ 4 mm；

浸入过深的话，液压会对吸液的精确度产生一定的影响，当然，具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握。

第五步：放液

放液时，枪头紧贴容器壁，先将排放按钮按至第一停点，略停顿后，再按至第二停点，这样做可以保证枪头内无残留液体。如果这样操作后还有残留液体存在的话，就应该更换枪头了。

第六步：卸掉移液器枪头枪头

卸掉的枪头一定不能和新吸头混放，以免产生交叉污染。移液器用完后调回更大量程。

梅特勒-托利多有Pipet-Lite XLS+手动单道移液器、Pipet-Lite XLS+手动多通道移液器、Pipet-Lite XLS间距可调手动多道移液器、Pipet-Lite PL+ 移液器、Pipet-One 移液器，还有E4 XLS+ 单道电动移液器、E4 XLS+ 多道电动移液器、E4 XLS间距可调多道电动移液器，移液器设置、协议和服务警报可以通过密码进行保护，以符合GLP/ GMP认证的规定。 而且，GLP数据，如服务记录、循环和状态数据等，可完全防篡改。

❹ dragonlab移液器进水了怎么处理

【上海巴玖】提示您：移液器头部都是有过滤膜的，把机器拆开，过滤膜换了就行了。

❺ 如何养293、293T系列的细胞

将细胞培养瓶竖立放置，吸走培养基，如果培养基中的脱落细胞较多，说明细胞现在很容易脱落，只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%)，来回轻微晃动培养瓶直到细胞完全脱落，加入10mlMEM，混匀，不能吹打，分装2瓶。

如果细胞没长满就脱落，则只需加入5mlMEM，不分装。如果培养瓶中的细胞贴壁较牢固，培养基上清没有细胞脱落碎片，且细胞长满达到80％以上，吸走培养基，加入5ml的PBS+EDTA(0.02%)，迅速轻微晃动，竖立培养瓶，吸走，加入1ml0.05%胰酶，37度消化不超过3min。

(5)电动移液器过滤膜扩展阅读：

注意事项：

1、尽量用早期的细胞，传代太多状态不好，产毒也不好，贴壁困难。

2、塑料的瓶子，DMEM+10%的小牛血清即可，要求并不高，ATCC上有详细的培养方法。

3、主要是传代，胰酶消化点到即止，不能和其它成纤维细胞一样。

4、细胞代数越高生长越快，同时性状和原代差别也更大。一般2-3天传代一次比较合适。

5、传代时细胞密度在80%左右比较好，如果超过90%融合再传会影响细胞状态。

❻ bio-dl1-5ml移液器说明书

【上海巴玖】提示您：
一个完整的移液循环，包括吸头安装——容量设定——预洗吸头——吸液——放液——卸去吸头等六个步骤。每一个步骤都有需要遵循的操作规范。
1.吸头安装： 正确的安装方法叫旋转安装法，具体的做法是，把白套筒顶端插入吸头(无论是散装吸头还是盒装吸头都一样)，在轻轻用力下压的同时，把手中的移液器按逆时针方向旋转180度。切记用力不能过猛，更不能采取剁吸头的方法来进行安装，因为那样做会对您手中的移液器造成不必要的损伤。
2.容量设定： 正确的容量设定分为两个步骤，一是粗调，即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;二是细调，当容量值接近自己的预想值以后，应将移液器横置，水平放至自己的眼前，通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值，从而避免视觉误差所造成的影响。 在容量设定时，还有一个需要特别注意的地方。当我们从大值调整到小值时，刚好就行;但从小值调整到大值时，就需要调超三分之一圈后再返回，这是因为计数器里面有一定的空隙，需要弥补。
3.预洗吸头： 在我们安装了新的吸头或增大了容量值以后，应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次，这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜，确保移液工作的精度和准度，使整个移液过程具有极高的重现性。其次，在吸取有机溶剂或高挥发液体时，挥发性气体会在白套筒室内形成负压，从而产生漏液的情况，这时就需要我们预洗四到六次，让白套筒室内的气体达到饱和，负压就会自动消失。
4.吸液： 先将移液器排放按钮按至第一停点，再将吸头垂直浸入液面，浸入的深度为：P2、P10小于或等于1毫米，P20、P100、P200小于或等于2毫米，P1000小于或等于3毫米，P5ML、P10ML小于或等于4毫米(浸入过深的话，液压会对吸液的精确度产生一定的影响，当然，具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握)，平稳松开按钮，切记不能过快。 5. 放液： 放液时，吸头紧贴容器壁，先将排放按钮按至第一停点，略作停顿以后，再按至第二停点，这样做可以确保吸头内无残留液体。如果这样操作还有残留液体存在的话，您就应该考虑更换吸头了。
6. 卸掉吸头： 卸掉的吸头一定不能和新吸头混放，以免产生交叉污染。 两分钟检查法： 这是可以对手中移液器进行快速检查的一种简单方法，通过检查，来判断我们手中的移液器是否处于一种正常的工作状态。

❼ 如何正确使用移液器

第一步：移液器枪头的安装

移液器枪头的安装比较简单，常用的方法是旋转安装，把移液器顶端插入枪头，在轻轻用力下压的同时，左右微微转动，旋转上紧即可。

第二步：设定移液器的移液容积

为了实验结果的严谨性，一般移液容积设定要结合粗调和细调，首先通过旋转按钮将体积值迅速调整至接近自己的预想值；然后当体积值接近自己的预想值之后，应将移液器横置，水平放至自己的眼前，通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值，从而避免视觉误差所造成的影响。

第三步：预洗移液器枪头

为了确保实验的精度和准度，我们在安装了新的枪头或增加了容量值以后，应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次，这样做的目的是为了让枪头内壁形成一道同质液膜，使整个移液过程具有更高的重现性。

第四步：移液

先将移液器排放按钮按至第一停点，再将枪头垂直浸入液面，浸入的深度为：

P2、P10 ≦ 1 mm；
P20、P100、P200 ≦ 2 mm；
P1000 ≦ 3 mm；
P5mL、P10mL ≦ 4 mm；

浸入过深的话，液压会对吸液的精确度产生一定的影响，当然，具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握。

第五步：放液

放液时，枪头紧贴容器壁，先将排放按钮按至第一停点，略停顿后，再按至第二停点，这样做可以保证枪头内无残留液体。如果这样操作后还有残留液体存在的话，就应该更换枪头了。


第六步：卸掉移液器枪头枪头

卸掉的枪头一定不能和新吸头混放，以免产生交叉污染。移液器用完后调回更大量程。

梅特勒-托利多有Pipet-Lite XLS+手动单道移液器、Pipet-Lite XLS+手动多通道移液器、Pipet-Lite XLS间距可调手动多道移液器、Pipet-Lite PL+ 移液器、Pipet-One 移液器，还有E4 XLS+ 单道电动移液器、E4 XLS+ 多道电动移液器、E4 XLS间距可调多道电动移液器，移液器设置、协议和服务警报可以通过密码进行保护，以符合GLP/ GMP认证的规定。 而且，GLP数据，如服务记录、循环和状态数据等，可完全防篡改。

❽ 移液器取液时用力按下按钮有什么影响

手动移液器使用的时候按压速度和节奏对操作结果都会有影响。排液的时候按压太快，可能会导致一些液体残留，尤其是液体比较粘稠的时候。另外移液操作的重复性好坏很大程度上是由操作人本身的操作习惯决定的。如果要保持精确的操作结果，节奏和速度应保持均匀一致。如果经费允许可以考虑买电动的移液器，我们实验室用的赛多利斯电动移液器，不用担心按压用力的问题，设置好操作速度后按按钮，移液器会自动按照设置的节奏和速度来吸排液，特别好用。

❾ 培养基过滤

WC型微孔滤膜使用说明书

本厂用二醋酸——三醋酸纤维素为基材，以流涎法制成微孔滤膜（简称MC滤膜），是现在国内新型的一个品种，它克服了目前常用的硝酸—酸酸混合纤维素微孔滤膜（简称混合滤膜）的质脆、易断裂、有静电吸引、易燃，遇75%以上酒精易膨胀与溶解及在偏碱性溶液中易产生有毒的硝酸根和亚硝酸根等的不足之处。本厂MC滤膜在国内上百家药厂、医院、科研所等广泛用于大输液、针剂及各种溶液精滤，使用效果极佳，澄明度合格率普遍提高。目前该产品畅销全国，深受用户欢迎。同时微孔滤膜不但用于制药业，而且在生物制品、医学微生物学、化工、电子工业、冶金工业、临床化验、酿造、钟表、航空等工业方面超纯水的制备、空气净化、医药用油、润滑、燃料用油及科研实验化验室滤除细菌和微粒方面等将有越来越广泛的推广和应用。
一、 要用途
（1） 医药工业：用于水针剂，大输液及结晶前溶液的微粒和细菌过滤，抗菌素、球蛋白，疫苗血清及组织培养等过滤。
（2） 电子工业：用于半导体器件和集成电路车间的空气净化，制备洗涤用的高纯水质，对溶剂、显影剂、光刻胶等进行净化处理。
（3） 日化工业：用于日用化妆品中含乙醇和油脂类溶液的微粒过滤。
（4） 公共卫生：用于饮水过滤,河塘水质细菌过滤检查、工作地区粉尘微粒过滤检验。
（5） 食品工业：饮料果汁、酒类、油类等的灭菌和悬浮杂质的过滤。
（6） 亦可用于无菌检查——滤膜过滤法及其它科学研究中的分析测定等。
二、 MC型滤膜性能介绍
（1） 孔径均匀：用汞压法测定额定孔径分布均匀，并用放大电镜扫描图象分析，额定孔径基本一致。
（2） 孔隙率高：每平厘米滤膜中可包含一千万至一亿个额定微孔，以孔隙率测定法测得孔隙率在80%以上。
（3） 滤膜透水率高、滤速快：用透水率测定法测得0.8UM微孔滤膜透水率可达215亳升/平方厘米。分，1.2UM透水率可达311亳升/平方厘米。分。
（4） 强度高有韧性，因MC型滤膜生产过程中的三醋酸纤维素分子乙酰化完全、张力强度高，爆破强度法测定厚度0.10~0.15毫米膜，爆破强度≥3公斤/平方厘米，膜有韧性，即使对折数次也不易断裂，所以使用寿命长。
（5） 滤膜的各向同性：MC型滤膜为各向同性，不分正反面，对额定孔径以上的固体微粒能起到绝对截留作用。
（6） 热稳定性：在120度热压灭茵30分钟，热稳定性良好。
（7） 化学稳定性：可过滤PH2~11各种药液，还可过滤仪表油、5%醋酸、6N硫酸、6N氢氧化钾、无水乙醇、丙三醇、甲醇、正丙醇、导丙醇、偏笨三酸三辛酯、聚乙二醇、各种酒类、饮料、醋等。
（8） MC型滤膜还具有无毒、无媒质迁移等优点。
三、 可供规格
孔径（微米）：0.22 0.3 0.45 0.65 0.8 1.0 1.2 3~5
直径（毫米）：Ф25 Ф35 Ф50 Ф100 Ф150 Ф200 Ф300 Ф400 （如需特殊规格可定制）
各种孔径适用范围
（1）滤除微粒：应选用0.65um 0.8um 1.2um的滤膜.
（2）滤除细菌：应选用0.45um 0.3um 0.22um的滤膜.
四、 使用方法
（1） 将滤膜于70度左右的蒸馏水中浸泡4小时以上，使用前再用适量新鲜蒸馏水冲洗一二次，然后装入已洗过的滤器中备用。
（2） 过滤方法：可采用加压法、真空法或位差液压法、加压法的滤速随着压力提高而加快，一般不超过3~4公斤/平方厘米，采用抽气过滤时应防止外界空气的细菌、微粒污染。利用位差过滤，一般位差应考虑在3~5米以上（约相当于0.5个大气压），否则影响滤速。
五、 注意事项
（1） MC型滤膜适宜于PH2~11，对强酸强咸或某些有机溶剂不宜使用。
（2） 本品一般耐温120度，热压30分钟，耐2~4公斤/平方厘米。
（3） 微孔滤膜只能作为最后过滤阶段，滤液必须经过沙滤棒、滤纸、滤球等粗过滤材料，可避免滤膜堵塞。
（4） 操作MC型滤膜时不可触及尖硬物品，以免引起穿孔现象。在装滤膜前要严格检查微孔滤膜是否有漏孔，不合格不得使用。

混合纤维素酯微孔滤膜使用说明书

混合纤维素制成的薄膜滤材，经有关单位多次广泛使用，质量符合标准，其产品表面平滑、质地轻薄、孔隙率高、且微孔结构均匀，因此且有流速快，不易吸附的特点。

一． 用途
本品用于制药业、生物制品、矿泉饮料、酿造、电子等工业方面的水质、医药用油、润滑用油、燃料用油及科研实验化验室等滤除细菌和微粒，一般0。65微米以上可除微粒，0。45以下可滤除细菌。

二． 规格
混合纤维素酯微孔滤膜各种规格如下：
公称孔径（直径微米）0.2 0.3 0.45 0.65 0.8 1.0 1.2
膜片直径（毫米）25 35 50 60 100 150 200 300 400
（如需特殊规格另行定制）

三． 使用方法
1． 将滤膜平放于清洁盛器内，用70度左右的蒸馏水浸泡，使全部润湿，数小时后（约4小时以上）倾去水，再用上法浸泡过夜，使用前再用适量温蒸馏水清洗一次。
2． 将洗清的滤膜（湿）装入适宜的滤器中，防止周围漏液，自进液口放进滤液，并在:排气口排出空气，即可进行过滤。

四． 注意事项
1． 水膜片适宜于PH2-9的药液，对强酸碱或有机溶剂包括酒精等不宜使用。
2． 本品一般能耐温120度，耐压3~4公斤/平方厘米。
3． 微孔滤膜只能作为最后阶段过滤，滤液必须先经过沙棒或其它滤材预过滤，以免滤膜堵塞。
上述使用方法，仅适用于水剂药液或其它水溶剂的过滤。