超滤上样量脂质体浓度

① 请教关于脂质体纯化的问题

脂质体阿霉素的正常用量就是每平方米体表面积20mg的，真是因为它能在这浓度下就能达到局部有效浓度，也就是这样它的副作用才更小。有关物的剩余问题那是没办法的。因为没生产10mg 的规格的。

② 做脂质体时磷脂浓度是用水相的量来算的吗

做脂质体时磷脂浓度是用水相的量来算的
适当化学结构的亲脂性药物是镶嵌在双层膜内而被包裹在脂质体中，其包封率取决于所用脂质的浓度。在这种情况下，包封率可达到90％，就不一定要除去未包裹药物。但是对水溶性药物而言，被包裹的药物仅是总量中的一部分，就必须从脂质体悬液中除去未包裹药物。由于脂质体比被包裹的药物分子要大得多，因此可利用它们的不同大小来分离除去未包裹的药物，这些方法有凝胶过滤柱层析法，渗析法等；若被包裹的物质是蛋白质或DNA，或者未被包裹的药物可能形成较大的聚结物，则可利用它们与脂质体浮力、密度的不同而采用诸如离心等方法进行分离。

③ 制备出的物质怎么确定是脂质体而不是脂肪乳

适当化学结构的亲脂性药物是镶嵌在双层膜内而被包裹在脂质体中，其包封率取决于所用脂质的浓度。

④ “盐酸多柔比星注射液”和“盐酸多柔比星脂质体”到底有什么区别

一、作用不同

1、盐酸多柔比星注射液：急性白血病（淋巴细胞性和粒细胞性）、恶性淋巴瘤、乳腺癌、肺癌（小细胞和非小细胞肺癌）、卵巢癌、骨及软组织肉瘤、肾母细胞瘤、膀胱癌、甲状腺癌、前列腺癌、头颈部鳞癌、睾丸癌、胃癌、肝癌等。

2、盐酸多柔比星脂质体：可用作一线全身化疗药物，或者用作治疗病情有进展的AIDS-KS病人的二线化疗药物，也可用于不能耐受下列两种以上药物联合化疗的病人：长春新碱、博莱霉素和多柔比星（或其他蒽环类抗生素）。

二、性状不同

1、盐酸多柔比星注射液：为红色澄明溶液。

2、盐酸多柔比星脂质体：为无菌、半透明红色混悬液。

三、规格不同

1、盐酸多柔比星注射液：5ml，10mg。

2、盐酸多柔比星脂质体：20mg/10ml/瓶。

⑤ 如何提高纯化蛋白浓度

蛋白纯化后浓度太低怎么办
提高sds-page的上样量
将蛋白样品超滤浓缩几倍提高浓度
wb压片时间稍微延长一点

⑥ 为什么1mg/ml的脂质体能把细胞杀死浓度降低4倍就比较正常，但浓度太低的包封率又降低。如何是好

脂质体是一种载休，它是由脂肪或类脂与细胞体合成的物质。油酸多相脂质体主要由大豆磷脂、胆固醇、非离子表面活性剂等物质构成的双分子层圆形脂质体及包封在中心的油所构成。由于脂质体具有和细胞膜十分相似的组成和结构，有不同于其他载体的吸收和分布特点，化疗药物包封成脂质体后可以减少药物剂量，降低毒性，减轻变态和免疫反应，延缓释放，降低体内消除速度，改变药物在体内的分布，提高药物选择性，改变给药途径。本品对多种动物肿瘤具有明显抑制作用，它对肿瘤周期的影响为非特异性，但对S期细胞具有显著杀伤作用。本品能抑制肿瘤细胞DNA及合成，当药物浓度增至1mg/ml时，DNA合成呈现轻度抑制，故多相脂质体可能属于干扰癌细胞代谢膜抗原，通过电镜观察发现，脂质体具有有细胞膜表面活性作用，通过此作用来强化肿瘤细胞膜抗原，且在一定浓度下，直接改变细胞膜通盘性，即易影响呼吸膜的有效面积，致使肿瘤细胞在能量缺乏情况下死亡。

⑦ 【求助】超滤能否脱盐和浓缩一步完成啊

昨天有个millipore的技术人员就是这样说的~HarveyWang(站内联系TA)本人主要是从发酵液中提取酶,文献上一般的步骤是先用硫酸铵沉淀,然后透析,再用超滤浓缩,最后冷冻干燥, 这要看你需要做多大的体积了。:) (1)硫酸铵沉淀法：我的观点是，如果你1000 mL的发酵液的话，硫酸铵沉淀可以用，但是这浪费多少硫酸铵啊？！做学术研究可以，如果你的课题是计划做提取酶的工艺和中试的话，这种硫酸铵沉淀并不有太大的实用性。 （2）超滤步骤的选用要看你的酶溶液有多大的体积。 如果发酵液的酶的量并不是很浓的话，例如50 mL 10 mg/L的酶量，用这种超滤膜会损失掉大部分你的目地酶，都粘到膜上去了，很难洗下来（稀的NaOH可以）。不能轻信某品牌销售说的话，用用就知道了。如果你的浓缩液体积比较大，例如100-500 mL，酶的浓度也很高，这是可以用超滤膜的。 （3）对于小体积的脱盐透析，透析袋很好用的。这里是指10 mL-100 mL。从操作方便性上看，这个在小型试验中我最喜欢用。好简单啊。。。。 自己顶一个,解答的详细的有重奖!(金币可以再加) （1）发酵液的酶蛋白浓度大约是多少，纯度是多少？发个SDS-PAGE看看，注明上样量。 （2）硫酸铵沉淀后和透析后可上离子交换，这可以浓缩10-1000倍，还可以有纯化效果，然后再冷冻浓缩啊。HarveyWang(站内联系TA)哈哈哈哈，回帖就有金币拿:Ddaidai0124(站内联系TA)本人现在只是小规模的提取酶,马上要上发酵罐,需要大规模的提取酶液,不是做酶学性质,所以酶的纯度要求不高,和工业用酶的纯度差不多就可以了!希望大家推荐个适合工业化提取酶液的工艺,主要考虑成本问题.请版主帮忙在增加悬赏金币20个lvgl158(站内联系TA)起码知道 它的分子量 才能知道是否可以用同一个膜 如果小于一万可能就有点难度 可以先用少量的硫酸铵澄清 离心后 进行超滤 在超滤前 必须的保证液体 清澈hezhao999(站内联系TA)体积的在200ml以上用超滤仪，200ml以下可以用超滤离心管，如果不知分子量选用1000的膜完全可以了，如果知道分子量，则选择酶分子量1/5的超滤膜。zhaocy8903(站内联系TA)多大规模的发酵 多大规模的发酵

⑧ 脂质体阿霉素 在人体哪些组织中的浓度较高

自从1965年Bangham发现脂质体后，1971年Gregoriadis和Rymen首次报道将脂质体作为药物载体，上世纪70年代末脂质体开始作为蒽环类抗肿瘤药物的有效载体。脂质体是类似生物膜结构的双分子小囊，是具有单个或多个双层磷脂膜的囊泡，其主要成分是磷脂，磷脂分子中含磷酸基团的部分具有强烈极性(亲水性)，碳氢链具有非极性(疏水性)[21。具有下述优点:①体内可被生物降解，免疫原性小。②水溶和脂溶性药物都可包埋运载，药物缓释，药效持续时间长。③通过细胞内吞融合作用，脂质体可直接将药物送人细胞内，避免使用高浓度游离药物从而降低不良反应。④正常组织毛细血管壁完整，大部分的脂质体不能渗透，而肿瘤生长部位毛细血管的通透性增加，使脂质体阿霉素聚集量增加，并由于阿霉素的缓释，直接用于肿瘤部位，增加了治疗效果。脂 质体 阿霉素进人体循环后主要被网状内皮系统(reticuloendothelial system, RES)中的白细胞、单核细胞及巨噬细胞吞噬[31，这对于RES肿瘤的治疗有特殊的意义。早期脂质体阿霉素的应用因稳定性差、药物易渗漏、储存期限短、组织靶向性差和易被RES迅速清除等受到限制。现在在其表面包裹了高分子物质聚乙二醇的脂质体(peated liposomaldoxorubicin, PLD，即“隐形”脂质体，stealth liposome,其商品名为Caelyx )因其组成中含有亲水性聚合物，可提高其表面的亲水性。而且Caelyx的衍生物可以阻止血浆蛋白吸附，调理于脂质体表面[41，减少RES的吞噬吸收，逃避免疫统的拦截，延长了药物在体内的循环时间

⑨ 盐酸多柔比星脂质体注射液的药代动力学

国外上市盐酸多柔比星脂质体人体药代动力学研究文献盐酸多柔比星脂质体在卡泊氏肉瘤患者进行的药代动力学研究结果见下表。在相同剂量下，盐酸多柔比星脂质体中绝大多数是以脂质体包裹形式存在的盐酸多柔比星（约占测得量的90%～95%），参比药物血药浓度和AUC值显著高于常规盐酸多柔比星制剂。在滴注给药后48～96小时，对卡波氏肉瘤和正常皮肤进行活组织检査：在接受20mg/m[sup]2[/sup]盐酸多柔比星脂质体的治疗病人中，给药48小时后卡波氏肉瘤中多柔比星总浓度（脂质体包裹和未包裹的）比正常皮肤均髙19倍（范围3～53）。 国内本品在人体的比较药代动力学试验本品进行了与进口同类产品（以下简称参比药物）人体比较药代动力学试验，采用两制剂两周期双交叉试验设计，给22例乳腺癌患者分别前后各一次滴注50mg/m[sup]2[/sup]，用药间隔1月。比较本品与参比药物的药动学参数，以及单次临床用药的安全性。 对本品和参比药物主要药代参数经对数转换后进行方差分析，统计结果表明，本品与参比药物各药代参数无统计学差异。两药单次给药在不良反应发生程度和发生率上，与文献报道一致。本品动物试验给Beagle犬以1mg/kg剂量分别注射本品和参比药物，检测血清中药物浓度，绘制药一时曲线。两药物均符合二室模型的特征。按二室模型计算本品和参比药物的各项药动参数，结果如下表。对药动学参数以SPSS进行AN0VA检测，在P=0.05水平未发现两种样品各参数之间有显著性差异，提示本品和参比药物静脉注射后体内药动学特征基本相似。 用荷瘤大鼠尾静脉注射5mg/kg的本品和参比药物，在给药后1小时，18小时和48小时检测组织中药物浓度，结果见下表。两种药物7个组织脏器盐酸多柔比星的含量用SPSS进行AN0VA分析，在P=0.05水平，差异不显著。

⑩ 用超滤离心法测包封率脂质体需不需要稀释

超滤离心前应该可以根据需要进行稀释，也可以不稀释。
超滤离心后，内如果是取收集的离容心液进行检测的话，建议取离心液进行定量稀释，比如到固定体积的量瓶中，以便根据稀释倍数确定离心液中的药物浓度从而计算包封率。