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阳离子交换柱的洗脱顺序

发布时间:2022-02-07 18:57:54

① 阳离子交换层析怎样判断中性氨基酸的洗脱顺序。详细一点,谢谢了。比如亮氨酸,色氨酸,甘氨酸。

首先得知道待分离氨基酸的等电点,洗脱液也分为几种,一种洗脱液的pH对应一种氨基酸的pI,用某一洗脱液洗脱时,对应的氨基酸不带电,然后就被洗脱下来了

② 离子交换柱的阳,阴离子交换树脂顺序,哪个前哪个后

阳离子交换树脂在前面 主要原因是因为水中的弱碱性阴离子在和阴离子树脂交换时专置换出氢氧根离子,属阻止交换继续进行,而先经过阳离子交换树脂后能置换出氢离子, 再经过阴离子交换树脂时置换出来的氢氧根离子会和氢离子结合成水,不会影响继续交换。 还有就是因为阴离子交换树脂容易被污染,阳离子抗污染能力要好一点。

③ 氨基酸洗脱顺序的问题

洗脱顺序就是亲和力从小到大的排序。氨基酸与树脂间的亲和力,主要取决于他们之间的静电吸引,其次是氨基酸侧链和树脂基质聚苯乙烯之间的疏水相互作用。在PH为3.0是,洗脱顺序为酸性氨基酸,中性氨基酸,碱性氨基酸。Asp为酸性氨基酸,Gly也为酸性氨基酸,Leu为中性氨基酸,Thr也是中性氨基酸但是含羟基能与基质形成氢键,Lys为碱性氨基酸,所以洗脱顺序为Asp Gly Leu Thr Lys。王镜岩生化上153页

④ 离子交换层析中流出物质顺序是什么

若用离子交换层析分离物质,以蛋白质为例,离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。

由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。

反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。

(4)阳离子交换柱的洗脱顺序扩展阅读:

对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。

溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,使最终转为-OH-型或盐型交换剂;对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,使最终转为-H-型交换剂。

梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。

⑤ 能否交换阴阳离子交换柱顺序

2:1
的比例倍数,底部
为阳离子交换树脂,上面为阴离子交换树脂。据我的经验:装填的时候,容器罐不要加水。

⑥ 利用阳离子交换层析分离下列每一对氨基酸,哪一种氨基酸首先被PH7缓冲液从离子交换柱上洗脱出来。

氨基酸与粒子抄交换树脂的吸附力袭大小取决于它们之间的电荷引力和疏水作用。第一组中甘氨酸和亮氨酸均为非极性氨基酸,但是相比之下甘氨酸的极性要更强,也就是疏水性更弱,它会先被洗脱。第二组中,丝氨酸是中性条件下不带电荷的极性氨基酸,丙氨酸是非极性氨基酸,所以丝氨酸疏水性差,先被洗脱。

⑦ 在强酸性阳离子交换柱上asp,his及leu等几种氨基酸的洗脱顺序如何为什么

依次是:精氨酸Asp,赖氨酸Leu,组氨酸His
因为他们的碱性,也就是携带正电荷的能力,或者说电离成阳离子的能力,由强到弱是这个顺序。

⑧ 离子交换树脂的洗脱顺序和什么有关

和树脂的亲和力有关,主要是静电吸引,其次是疏水作用。

树脂的交联度,即树脂基体版聚合时所用二权乙烯苯的百分数,对树脂的性质有很大影响。通常,交联度高的树脂聚合得比较紧密,坚牢而耐用,密度较高,内部空隙较少,对离子的选择性较强。

而交联度低的树脂孔隙较大,脱色能力较强,反应速度较快,但在工作时的膨胀性较大,机械强度稍低,比较脆而易碎。



(8)阳离子交换柱的洗脱顺序扩展阅读:

大孔树脂内部的孔隙又多又大,表面积很大,活性中心多,离子扩散速度快,离子交换速度也快很多,约比凝胶型树脂快约十倍。使用时的作用快、效率高,所需处理时间缩短。

大孔树脂还有多种优点耐溶胀,不易碎裂,耐氧化,耐磨损,耐热及耐温度变化,以及对有机大分子物质较易吸附和交换,因而抗污染力强,并较容易再生。

交联度高的树脂对离子的选择性较强,大孔结构树脂的选择性小于凝胶型树脂。这种选择性在稀溶液中较大,在浓溶液中较小。

⑨ 在PH3左右,氨基酸混合液(酸性,碱性,中性三类),经阳离子交换树脂被洗脱分离,这三类氨基酸的洗脱顺序

原因:氨基酸与阳离子交换树脂的静电引力大小依次是 碱性氨基酸>中性氨回基酸>酸性氨基酸,所以答洗脱的顺序就
先是酸性氨基酸(负电荷最多),然后是中性氨基酸,最后是碱性氨基酸(带正电荷最多)。
详见《生物化学》王镜岩 第三版 上册 153页

⑩ 蛋白质水解产物阳离子交换柱层析时的洗脱顺序

pI 10.76的那个应该带正电荷。阳离子交换柱本身带负电荷。

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