1. HPLC系统由哪些部分组成简述各部分的功能
HPLC仪一般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统和数据处理与记录系统组成。
1、溶剂输送系统
储液器:用来贮存数量足够、符合要求的流动相。配有溶剂过滤器,以防止流动相中的颗粒进入泵内。
脱气器:脱气的目的是为了防止流动相从色谱柱内流出时释放出气泡进入检测器,从而引起噪声,不能正常检测。
输液泵:将储液器中的流动相连续不断地以高压形式进入液路系统,使样品在色谱柱中完成分离过程。
梯度洗脱装置:是在分离过程中通过逐渐改变流动相的组成增加洗脱能力的一种装置。
2、进样系统
进样器:是将样品送入色谱柱的装置,进样方式可以分为两种:阀进样或自动进样。比较常用的是采用自动进样器装样。
3、分离系统
色谱柱:对样品进行分离,是整个色谱系统的心脏,它的质量优劣直接影响到分离的效果。
4、检测系统
检测器:将色谱柱连续流出的样品组分转变成易于测量的电信号,被数据系统接收,得到样品分离的色谱图。
5、数据处理和记录系统
对色谱数据进行处理,并参与HPLC仪器的自动控制。
(1)液相色谱溶剂过滤器扩展阅读
应用
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。
与试样预处理技术相配合,HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。
2. 液相色谱的新过滤头怎么上,管子太小
是溶剂瓶里那个过滤器吗?你可以去贝克曼的网站去查看规格,如果你怀疑过滤版器堵了可以按照以下操作来清洗过滤权器:1.先检查溶剂过滤器是不是堵了-拧开脱气机出口或比例阀入口管线,并使液面高于出口30cm此时溶剂会因为重力流出,脱气机或溶剂过滤头堵塞时,溶剂会流出不畅或不流出。-查看过滤器是否变色.-临时取下过滤器,检查柱前压力是否正常.2.清洁溶剂过滤器-将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂然后将过滤器放在装有浓硝酸(35%)的烧杯里浸一小时。-用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不使用超声波清洗机清洗。-将过滤器重新装好。-建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶,每三个月至少清洗一次。还有就是最好使用灭过菌的溶剂瓶,这样可以减少瓶里藻类的生长防止其堵塞过滤器
3. 高效液相色谱仪器的结构及其各部分作用
1、溶剂输送系统;储液器,用来贮存数量足够、符合要求的流动相。配有溶剂过滤器,以防止流动相中的颗粒进入泵内。脱气器,脱气的目的是为了防止流动相从色谱柱内流出时释放出气泡进入检测器,从而引起噪声,不能正常检测。
输液泵,将储液器中的流动相连续不断地以高压形式进入液路系统,使样品在色谱柱中完成分离过程。梯度洗脱装置,是在分离过程中通过逐渐改变流动相的组成增加洗脱能力的一种装置。
2、进样系统;进样器:是将样品送入色谱柱的装置,进样方式可以分为两种:阀进样或自动进样。比较常用的是采用自动进样器装样。
3、分离系统;色谱柱:对样品进行分离,是整个色谱系统的心脏,它的质量优劣直接影响到分离的效果。
4、检测系统;检测器:将色谱柱连续流出的样品组分转变成易于测量的电信号,被数据系统接收,得到样品分离的色谱图。
5、数据处理和记录系统;对色谱数据进行处理,并参与HPLC仪器的自动控制。
(3)液相色谱溶剂过滤器扩展阅读
与试样预处理技术相配合,HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展,有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。
HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用,流出组分易收集等优点,因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。
4. 高效液相色谱仪出现基线稳,但压力线呈锯齿型波动,变化范围在2MPa,是什么原因
先检查一下输送来管路是否有问题源,看其是否漏气或有弯折的地方,再有就是泵的问题了,看泵所接的电压是否稳定,如果是蠕动泵看蠕动齿轮是否有缺损
把流速调高试试 ,在流速升高的情况下,如果锯齿还有就可能是溶剂过滤器堵了 看过滤器是否变色来判断是不是堵了
5. 中国市面上最好的液相色谱仪是哪个
液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式回,如纸、薄板和填充床等。答在色谱技术发展的过程中.为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。
经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分离后的样品是被分级收集后再进行分析的,使得经典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢,而且操作也比较复杂。直到20世纪60年代.发展出粒度小于10μm的高效固定相,并使用了高压输液泵和自动记录的检测器,克服了经典液相色谱的缺点,发展成高效液相色谱,也称为高压液相色谱。
6. 高效液相色谱法,进对照品之前,需要用0.45 μm针筒式过滤器过滤吗
对照品溶液可不用经微孔滤膜过滤,因为对照品溶液都是用标准对照品经色谱纯溶剂或流动相稀释进行配制的。因此对照品溶液中没有不溶性的杂质,可省去过滤,直接进样。
7. 求急:高效液相色谱溶剂过滤器因过滤甲醇时放了水相滤膜被堵塞了,怎么解决
高效液相色谱仪如图1所示,是由溶液贮器、高压泵、进样系统、色谱分离柱、真空抽滤既过滤颗粒也脱了气泡,非常②应逐渐改变溶剂的组成,特别是
8. 液相色谱仪的使用方法以及注意事项有哪些!
液相色谱仪的品牌、种类很多,各家的使用方法也不尽一样,主要看你是那一款的液相色谱仪,当初购买设备时,厂家的工程师会培训使用方法。建议你还是多跟你的设备厂家的工程师联系,发一份岛津LC-10ATvp的液相色谱仪作业指导书你参考一下,内容也包含使用中的注意事项。
LC-10ATvp的液相色谱仪作业指导书
1.目的
规范LC-10ATvp液相色谱仪使用及维护保养操作规程,使其能在正常条件下工作。
2.范围
适用于岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪的使用和维护。
3.责任人
检测员、设备管理员
4.内容
4.1系统组成
SPD-10Avp 检测器,LC-10ATvp泵,N-2000工作站。
4.2 操作方法
4.2.1开机前检查
储液瓶倒净,换上实验需要的流动相(抽滤并超声过的)。
4.2.2开机
按溶剂输液泵上的power键,待自检完毕后开始进行操作。
4.2.3排气
逆时针旋转排气阀(不可超过180°),打开排气阀,按purge键排气泡,在此期间流动相连续流出并且无气泡;按purge键,泵停止,将排液阀旋钮顺时针方向旋转到底,关闭排液阀
4.2.4冲流动相
按Pump键,泵启动,观察屏幕上压力显示,压力上升平稳后,继续按上述方法升高流速,使流速上升到实验需要的流速。
4.2.5进样
打开检测器,调节波长为实验需要的波长;打开工作站,查看基线,待基线走平后,进样。
4.3 使用后维护
4.3.1 水或含水甲醇溶液冲洗
使用结束后,将流速降到0.1 ml/min,按Pump键,泵停止。换下流动相,换上已抽滤并超声过的纯净水或含水甲醇溶液。按Pump键,泵启动,观察屏幕上压力显示,压力上升平稳后,继续按上述方法升高流速。如流动相含有无机盐,必须保证足够的冲洗时间。
4.3.2甲醇溶液冲洗
换上已抽滤并超声过的甲醇溶液,按3.1的操作进行封柱处理。
4.4 关机
按Pump键,关闭泵;关闭桌面在线工作站;按Power键关闭LC-10ATvp。
5.注意事项
5.1 不能使用浓硫酸、浓硝酸、二氯乙酸、丙酮、二氯甲烷、氯仿、二甲基亚砜等作为流动相。
5.2 流动相溶剂选择HPLC为准的溶剂,使用前必须用过滤器(0.45μm以下)
除去微粒或尘埃。
5.3 流动相溶剂必须进行脱气。若不脱气则在溶剂混合时或压力、温度变化时容易产生气泡,会引起泵的误动作和生产检测器信号噪音。
5.4 以硅胶作载体的化学键合填充剂的稳定性受流动相pH值的影响,使用时应详细阅读该柱的说明书,在规定的pH值范围内使用。使用时,可在泵与进样器之间连接一硅胶柱,以保护分析柱。当使用高PH或含盐的流动相时,尽可能缩短使用时间,用后立即冲洗。
5.5 分析结束后,从色谱流路系统,泵、进样器、色谱柱至检测器流通池,均应充分冲洗,特别是含盐的流动相,更应注意先用水、再用含水甲醇溶液充分冲洗。如发现严重故障,应与厂家联系维修。
5.6 请在使用前充分阅读作业指导书,不得擅自拆卸仪器的零部件。
6.日常维护
6.1 维护周期
15-30天为一个周期。
6.2 维护前准备
6.2.1 擦去前面板和主箱盖上的灰尘。
6.2.2 使用纸或软布沾少许水擦去键板上的灰尘。
6.3 检查控制面板
6.4 管路彻底清洗
6.4.1将储液瓶中的流动相更换为异丙醇或30%异丙醇或10%异丙醇,放入吸滤器。
6.4.2松开柱两端的螺帽,从管路中卸下色谱柱,在原来界色谱柱的位置接一阻力管(0.1mmI.D.×2m长)或接一空的预柱管。
6.4.3按“pump”键,设定流速为1-2ml/min,输液2小时。
6.4.4更换甲醇,设定流速为1-2ml/min,输液1小时。
6.4.5更换水,设定流速为1-2ml/min,输液1小时。
6.4.6更换甲醇,设定流速为1-2ml/min,输液1小时。
6.5维护后的漏夜检查
维护后,启动泵输液,检查管路中是否有漏液,如果存在漏液,采取适当措施。
9. Agilent1100高压液相色谱仪使用问题,如何防止溶剂瓶内溶剂过滤器的堵塞,以及堵塞后的处理
溶剂的质量或污染以及藻类的生长会堵塞溶剂过滤器,从而影响泵的运行,尤其水溶液或磷酸盐缓冲液(PH=47)。以下几种方法可以有效防止溶剂瓶内溶剂 过滤器的堵塞。
10. 我想知道有关实验室使用的过滤器的一些事情,能帮个忙吗,用于液相色谱使用的
流动相过滤:采用砂芯漏斗+滤膜+真空泵的组合模式。有的是有机相和水相分开过滤,回然后混合,超声波答脱气。这样就需要两套砂芯漏斗和滤膜(有机膜、水膜);有的是有机相和水相混合后,一起过滤,此种方式只需一套砂芯漏斗和有机膜。
溶剂过滤:你可以直接使用过滤流动相的砂芯漏斗。
样品过滤:相信经过上面两道程序的过滤,配置样品的溶剂应该很干净了,也就不需要针式过滤器了,那是一次性的,实际操作起来太繁琐;除非,你要检测的样品实在太脏,含有肉眼可见的不溶物,那就只能用针式过滤器进行处理了。
按道理,正常是不会出现什么大问题的。因为,除去以上三种过滤,HPLC自身也存在三层过滤机制:1、流动相的入口 2、泵中砂芯 3、预柱
所以 正常是不会出现堵塞的。
同时,仪器使用完,注意清洗保养也是必要的。水相,盐分,都是细菌生长的优良环境,是导致堵塞的主要原因。