A. 请教.流动相是甲醇水，进甲醇为什么会出峰
请教.流动相是甲醇水，进甲醇为什么会出峰
不会出峰，要不然干吗用它做流动相。 即使出峰，也是一些溶剂小峰，在样品中也会予以扣除，不会计入杂质含量。 用甲醇做溶剂的进样液，也可能出现杂峰。 可能干扰因素有如下： 1，甲醇不干净。 2，柱子是旧柱子，可能会有一些杂质的干扰。
B. 甲醇,水,冰醋酸为流动相,这属于哪种高相液相色普
反相化学键合相色谱
固定相极性比流动相极性小，通常用ODS柱
C. 用甲醇做流动相和用乙腈做流动相有什么区别
乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色谱柱方法开发中广泛使用的两种常见溶剂。所以，除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脱能力这一事实外，色谱分析人员还应该知道其他的特性吗?让我们来讨论一些所有色谱专家都应该知道的问题。
首先，对流动相溶液的准备提出几点意见。
只有纯水溶液部分才能正确调整pH值。不要尝试测量或调整有机或有机混合物的pH值。
制备二元混合物的方法有两种，即V/V流动相溶液。
方法#1是用特定体积的“A”溶液填充一个量瓶，然后用“B”溶液将量瓶填满。
方法#2是用指定数量的“A”溶液填充量筒(或容量瓶)；用指定数量的“B”溶液填充第二个量筒(或容量瓶)，然后将两者的内容混合在一起。
无论您使用哪种方法，请在您的高效液相色谱法中完整地记录它，以便任何阅读它的人都能准确地复制它。上面描述的两种方法在设计上都是正确的，但是会产生不同性质的结果。
紫外线吸光度
对于HPLC级溶剂(我们在HPLC分析中应始终使用HPLC级溶液)，乙腈的吸光度在这两种溶剂中最低，非常适合低紫外光分析。甲醇在205-210nm左右有较高的紫外光吸收值，在非常低的紫外光范围内略有限制。
溶剂溶解性
乙腈和甲醇在溶解多种缓冲盐和样品的能力上存在显著差异。这些差异在方法开发中至关重要。
1.流动相溶解度
梯度运行显示低重现性或失败的一个常见原因可能与运行高浓度缓冲液和高浓度有机溶液有关。而含有浓度小于10mM盐溶液的水溶液/有机溶液在大多数梯度条件下不太可能沉淀（最多98%是有机溶剂，而不是100%)，大多数与高效液相色谱应用一起使用的缓冲溶液会有更高的盐浓度，当分析条件中有机溶剂含量较高时可能会从溶液中析出（导致堵塞，泄漏，插头和不准确的结果）。在反向色谱法中选择有机组成时要谨慎。确保使用的溶液在所有浓度下都是稳定的。还要验证缓冲能力是否仍然存在，当使用高有机浓度时(当缓冲液被稀释时)。
不确定盐是否会溶解?只要把同样浓度的溶剂混合起来做测试就行了。观察它，有任何浑浊或可见颗粒吗?你就可以得到你需要的答案。
甲醇总体上具有更好的溶解度特性(优于乙腈)，这意味着它在较高浓度下能更好地溶解大多数盐，从而获得更好的性能和更少的沉淀。
2.样品的溶解度(对峰形和保留的影响)
液相色谱的一个基本要求是样品完全溶解在流动相(初始流动相)中。在分析前，将样品溶解在流动相或强度稍弱的溶液（不是更强的溶液）。这确保它将作为一个集中的段塞加载到柱的顶部，以改善峰形和RSD。如果样品没有完全溶解在流动相，那么你实际上并没有分析整个样品。甲醇优于乙腈的另一个方面是它能完全溶解更多类型的样品。这一改进的溶解度可能导致更好的整体峰形。甲醇的选择性也不同于乙腈(不仅仅是洗脱强度)，这可能导致峰洗脱时间与预期的保留时间不同。这也是为什么在开发反向方法时，我们总是尝试使用含有乙腈或甲醇的不同流动相混合物的另一个原因。
永远不要假设一种溶剂会比另一种溶剂更好。太多的色谱新手只使用乙腈作为他们方法开发的主要有机溶剂。请不要犯他们的错误，这样的策略表明缺乏实践经验和知识。您必须首先分别尝试它们（乙腈&甲醇）用你的样品来评估结果（在适用的情况下最好从不同pH值的全面梯度开始）。如果您在最初的时间内测试了这两种类型的溶剂，那么将获得回报，因为还没有开发出能够使用您自己的样品来预测真正准确的结果的模拟器。可能会惊讶地发现，有多少样品使用甲醇溶液显示出更好的峰形和性能。如果没有看到任何改善，至少你现在知道了，因为你已经尝试过了，并且可以满怀信心地前进。
背压
乙腈的粘性比甲醇小，因此通常会导致整体柱压和系统背压降低。乙腈和水的混合物也会发生吸热反应(冷却溶液)，从而在溶液中捕获气体。如果你预先混合你的流动相，让它静置几分钟后在制备。
甲醇比乙腈更粘稠。它还有一个不寻常的特性，就是甲醇和水的50/50混合物会产生一个比甲醇或水更高的系统和柱背压。它的峰值压力是由50/50的混合物所观察到的。两种溶液在开始混合释放出一些气体也会产生放热反应。在制备溶液时，最好是让溶液静置几分钟，然后在高压液相色谱系统中使用。
D. 以甲醇-水-1%醋酸体系为流动相,应该选择哪种滤膜有机相还是水相
一般采用有机膜
E. 液质流动相为什么选甲醇和水体系
液质流动相选甲醇和水体系是因为对于液相色谱而言，物质的分离是基于被测物在流动相和固定相间的分配比不同而获得的，不管是不是中性物质，只要它们在两相间的分配比不同就可以分离。而流动相的改变也不过是为了获取这个分配比的差异而已。
液质流动相的选择方法：
1、流动性主要看结构，极性大小，溶解性，对酸碱的敏感性等等。
大体上有机相是乙腈，甲醇，水相是甲酸水，乙酸水，甲醇水或者加点乙酸铵等。
2、再看化合物质谱条件是（+），则水相可加甲酸，乙酸，一般0.1%，也可以0.2%，可以是条件，原则是能浓度低就不要浓度高，（-），不要用酸，会有抑制。
3、液相分离效果，可以用不同的有机相：水相比例，是分离效果好就可以。
4、观察uv最佳吸收是多少？若离200nm很近，建议有机相用乙腈。
5、重要的是，水相不加任何物质就可楚风很好，建议不要加其他的。
6、液质联用所用的流动相，不能用不挥发性的物质，如：磷酸盐缓冲液等，常用甲酸盐，乙酸盐等易挥发的物质用作缓冲盐的首选。
在做液质联用测定生物样品时，若选择M
H峰可在流动相中加入一些添加剂提供H离子，如甲酸等，一般准分子离子峰较稳定。
7、液质联用的流动相要求使用挥发性的酸碱盐，常用的如下：
酸---甲酸、乙酸（＜2.0%），三氟醋酸（≤0.5%）
碱---甲胺、乙胺、三乙胺（＜1.0%）
盐---醋酸铵（10-5mmol/L）。
F. 甲醇和水混合作为流动相用过滤吗
首先，作为流动相的试剂首先应该是色谱纯或者质谱纯级别的。
其次，①如果是要经过液相色谱，一般情况下是要进行过滤的，有机相用0.22um滤膜过滤，水相用0.45um滤膜过滤。因为无论是水相还是有机相，尤其是水相，会长细菌。②同时也会存在制备时的一些杂质。如果不小心进入到色谱柱当中，不但影响分析结果，甚至可能会损坏色谱柱。
所以，一定要过滤，最好是抽滤，超声排气后，静置15min之后使用
G. 气相色谱法用得流动相是什么液相色谱法用得流动相是什么
气相色谱法用得流动相是气体，一般有氮气，氦气，氢气等，而液相色谱法流动相是液体，一般有乙腈，甲醇，水（反相），正乙烷，乙醇，异丙醇（正相）等。
H. HPLC中甲醇水用什么膜过滤
HPLC 的流动相选用的膜是根据的你的流动相甲醇水比例的,一般有机系占得比例大,都是有机系膜,就是“油膜”.当然,有的比例也有用水膜的,具体要看你的具体比例的
个人滚点 仅供参考
I. 高效液相流动相中甲醇乙腈与水的配比的多少有什么区别
一般对于C18柱，有机相比例越大，分离效果越好，但是不是所有比例都允许用的，有些比例会导致流动相极易产生气泡而不能使用，所以一般不采用有机相和水相比例相近的配比。而且对于一些不溶于水的有机物，只能用高比例有机相流动相。