⑴ 请问Abbkine的蛋白质纯化的填料有具体的信息资料吗
PurKine His-Tag Ni-Super Packed Column 6FF PurKine 组氨酸标签 Ni(镍)-超级预装柱(6%交联) Abbkine BMC20026 1ml×5/3ml×5 预装柱 固定化金属离子亲合层析(IMAC)是纯化组氨酸标签融合蛋白最常用的方法。选择性地负载共价金属离子(比如镍或钴)的IMAC层析介质能够截留组氨酸标签蛋白,并在变性条件下,能从包涵体中纯化出不溶性的组氨酸标签蛋白。Ni是最常用的螯合金属离子,与之配套的Resin配体主要为亚氨基二乙酸(IDA)和氮川三乙酸(NTA)。
PurKine His-Tag IMAC-NTA Resin 6FF PurKine 组氨酸标签 固定化金属亲和层析-NTA树脂(6%交联) Abbkine BMR20036 5ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine His-Tag Cu-IDA Resin PurKine 组氨酸标签 Cu(铜)-IDA树脂 Abbkine BMR20040 5ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine His-Tag Co-NTA Resin PurKine 组氨酸标签 Co(钴)-NTA树脂 Abbkine BMR20050 5ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine His-Tag Co-NTA Resin 6FF PurKine 组氨酸标签 Co(钴)-NTA树脂(6%交联) Abbkine BMR20056 5ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine GST-Tag Glutathione Resin PurKine 谷胱甘肽S转移酶标签 谷胱甘肽树脂 Abbkine BMR20100 5ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料 谷胱甘肽s-转移酶(GST) 基因融合系统是用于从大肠杆菌中生产的GST-标签蛋白的表达、纯化和检测的通用系统。可在非常温和的条件下对GST-标签蛋白进行纯化,从而保留目的蛋白的功能和抗原性。GST标签可能增加目的蛋白的溶解性和稳定性。GST标签很大,其相对分子量(Mr)为26000。一段特殊的切割序列允许在纯化后用不同的蛋白酶简单地去除GST标签。
PurKine GST-Tag Glutathione Packed Column PurKine 谷胱甘肽S转移酶标签 谷胱甘肽预装柱 Abbkine BMC20100 1ml×5/3ml×5 预装柱
PurKine GST-Tag Glutathione Resin 4FF PurKine 谷胱甘肽S转移酶标签 谷胱甘肽树脂(4%交联) Abbkine BMR20104 5ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine GST-Tag Glutathione Packed Column 4FF PurKine 谷胱甘肽S转移酶标签 谷胱甘肽预装柱(4%交联) Abbkine BMC20104 1ml×5/3ml×5 预装柱
PurKine MBP-Tag Dextrin Resin 6FF PurKine 麦芽糖结合蛋白标签 糊精树脂(6%交联) Abbkine BMR20206 5ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料 麦芽糖结合蛋白(MBP)是一种有用的亲和标签,它们能增加生成目的蛋白的表达水平和溶解性。MBP标签也促进依附蛋白合适的折叠。因为MBP能增加溶解性,这个标签对以不溶形式(包涵体)聚集的重组蛋白特别有用。亲和纯化在生理条件下发生,并且使用麦芽糖进行温和地洗脱。温和的洗脱能保留住MBP标签蛋白的活性。
PurKine MBP-Tag Dextrin Packed Column 6FF PurKine 麦芽糖结合蛋白标签 糊精预装柱(6%交联) Abbkine BMC20206 1ml×5/3ml×5 预装柱
PurKine Biotin-Tag Streptavidin Resin 6FF PurKine 生物素标签 链霉亲和素树脂(6%交联) Abbkine BMR20306 2ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料 生物素-链霉亲和素(streptavidin)是最常见的生物学结合系统,常被用于结合、分离/纯化生物素化的抗体、蛋白质、多肽、核酸以及其它分子或者相互作用复合体。
PurKine Biotin-Tag Streptavidin Packed Column 6FF PurKine 生物素标签 链霉亲和素预装柱(6%交联) Abbkine BMC20306 1ml×5/3ml×5 预装柱
PurKine Strep II-Tag Strep-Tactin Resin 4FF PurKine Strep II标签 Strep-Tactin树脂(4%交联) Abbkine BMR20400 2ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Protein A Resin PurKine 蛋白A树脂 Abbkine BMR20500 2ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料 用于不同来源单克隆和多克隆抗体纯化的工具。抗体亲和纯化的基础是protein G和protein A对不同物种IgG的Fc区域的高亲和力和特异性。我们提供带有固定在一些不同基质的protein G和protein A的层析介质,从而提供一种从腹水、细胞培养上清和血清中分离IgG和IgG亚类的卓越方法。我们也提供带有重组protein L配体的层析介质用于抗体和抗体片段的纯化。Protein L对kappa轻链的可变区有很强的亲和力,能够广泛用于捕获抗体片段比如Fab片段、单链可变区片段(scFv)和结合域抗体(Dabs)。
PurKine Protein A Packed Column PurKine 蛋白A预装柱 Abbkine BMC20500 1ml×5/3ml×5 预装柱
PurKine Protein A Resin 4FF PurKine 蛋白A树脂(4%交联) Abbkine BMR20504 2ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Protein G Resin PurKine 蛋白G树脂 Abbkine BMR20600 2ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Protein G Packed Column PurKine 蛋白G预装柱 Abbkine BMC20600 1ml×5/3ml×5 预装柱
PurKine Protein G Resin 4FF PurKine 蛋白G树脂(4%交联) Abbkine BMR20604 2ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Protein A/G Resin 4FF PurKine 蛋白A/G树脂(4%交联) Abbkine BMR20704 2ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Protein L Resin PurKine 蛋白L树脂 Abbkine BMR20800 2ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Protein L Packed Column PurKine 蛋白L预装柱 Abbkine BMC20800 1ml×5/3ml×5 预装柱
PurKine Protein L Resin 4FF PurKine 蛋白L树脂(4%交联) Abbkine BMR20804 2ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Protein L Packed Column 4FF PurKine 蛋白L预装柱(4%交联) Abbkine BMC20804 1ml×5/3ml×5 预装柱
PurKine Protein AT Resin 4FF PurKine 蛋白AT树脂(4%交联) Abbkine BMR20904 2ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Protein AT Packed Column 4FF PurKine 蛋白AT预装柱(4%交联) Abbkine BMC20904 1ml×5/3ml×5 预装柱
PurKine Antibody Purification SulfoLink Resin PurKine 抗体纯化SulfoLink树脂 Abbkine BMR21000 5ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Antibody Purification NHS-Activated Resin 4FF PurKine 抗体纯化NHS-激活树脂(4%交联) Abbkine BMR21100 5ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Heparin Resin 6FF PurKine 肝素树脂(6%交联) Abbkine BMR21206 2ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Benzamidine Resin 4FF PurKine 苯甲脒树脂(4%交联) Abbkine BMR21306 5ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Endotoxin Removal Resin PurKine 内毒素清除树脂 Abbkine BMR21400 5ml/10ml/50ml/100ml 树脂填料
PurKine Endotoxin Removal Packed Column PurKine 内毒素清除预装柱 Abbkine BMC21400 1ml×5/3ml×5 预装柱
PurKine Anti-Flag Resin 4FF PurKine Anti-Flag树脂(4%交联) Abbkine BMR21504 1ml/5ml/50ml 树脂填料
⑵ flag tag是什么
Flag标签蛋白
Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽(DYKDDDDK),同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。 FLAG作为标签蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点:
FLAG作为融合表达标签,其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
融合FLAG的目的蛋白,可以直接通过FLAG进行亲和层析,此层析为非变性纯化,可以纯化有活性的融合蛋白,并且纯化效率高。
FLAG作为标签蛋白,其可以被抗FLAG的抗体识别,这样就方便通过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。
融合在N端的FLAG,其可以被肠激酶切除(DDDK),从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。
一个什么公司的产品介绍里的 找不着链接了就不贴引用了
说白了就是做表达出来的蛋白的一个标签
⑶ 游泳池防水怎么做要用什么材料
游泳池的储水量可以说是我们日常所能接触的事物中最大的,因此其防水级别要求很高。而泳池表面装饰不仅影响整体外观,更关系使用者的安全,具有很高的专业性。
普通泳池一般采用普通的民用防水材料,即防水涂料和卷材。普通防水一般只需做1到2遍,而游泳池建造防水需要做3遍才能较长时间保持防水效果。在防水层外,需要用瓷砖作为装饰面,普通瓷砖在经过长时间的池水浸泡后,会出现脱落破损等现象,所以经常会出现在游泳时身体部位被划伤的情况,尤其是在瓷砖和混凝土选择不当的情况下,这种情况就会更为严重。
泳池防水装饰胶膜作为一种根据泳池的使用需求研发的高科技产品,既能高效解决泳池的防水问题,又能同时解决泳池的外观装饰问题,欧美国家的新建泳池几乎已经全部是使用这种材料。
泳池防水装饰胶膜的选择直接关系到泳池是否能正常运营和安全问题,所以需要选择质量可靠的品牌。六点泳池所有产品均选择来自意大利的专业泳池产品FLAGPOOL防水装饰胶膜,在极佳的防水性能基础上,其出色的质感非其他廉价产品可比。
泳池胶膜颜色的选择通常建议使用最经典的色系:白色、蓝色和马赛克。白色档次感高,视觉效果好,适用于会所、酒店等场所;蓝色经久耐看,更能衬托水色,适合各类游泳馆;马赛克装饰效果较好,适合于各种小型泳池,如家庭泳池、儿童泳池。
⑷ flag标签作用
可以通过基因工程技术手段将所要研究的目的基因和FLAG-tag基因序列连接起来,可以连接在目的蛋白的C端或N端, 然后将整合后的基因转入细胞中或胚胎干细胞抑或受精卵中。
后续检测主要通过FLAG-tag这段肽链形成的免疫决定簇与其单克隆抗体的特异性结合来实现。 检测手段有免疫荧光(immunofluorescence), 免疫印记(Western Blotting)等。
随着生物技术的发展,科研人员可以通过DNA重组技术,构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白,进而通过特异性标签抗体对其鉴定与纯化,以达到研究的需求。
(4)flag纯化树脂扩展阅读
FLAG-tag类别:
1、Flag抗体-抗Flag标签抗体
融合标签,如Flag、GST等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。
2、GST抗体-抗GST标签抗体
随着越来越多的新基因的发现,基因融合蛋白表达体系以其在新发现蛋白研究中的显著优势已得到广泛应用。其中GST标签体系具有蛋白表达产率高、表达产物纯化方便,以及利于GST抗体制备等特点。
3、HA抗体-抗HA标签抗体
融合标签,如HA、His等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。常用的标签包括myc、HA、Flag、His、GST等。
⑸ 如何快速了解新接触的质粒(六)
“ 会读质粒图谱才能用好质粒。 ”
前面介绍了质粒图谱中复制起点,启动子,抗性基因和蛋白纯化标签四个元件,在蛋白质检测过程中常会遇到不好买的目的蛋白抗体,这个时候蛋白检测标签的价值就体现了出来。
标签蛋白质序列DNA编码序列
GAGATTACAAGGATGACGACGATAAG
GATCGATTACAAGGATGACGACGATAAG
HSVQPELAPEDPED
XpressDLDDDDK/DLYDDDDK
S TagKETAAAKFERQHMDS
SB1PRPSNKRLQQ
ThrombinLVPRGS
Protein CEDQVDPRLIDGK
BADGLNDIFEAQKIEWHE
VSV-GYTDIEMNRLGK
FLAG-Tag
Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽(DYKDDDDK/Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys),同时载体中构建的Kozak序列(是位于真核生物mRNA 5‘端帽子结构后面的一段序列,通常是GCCACCAUGG,它可以与翻译起始因子结合而介导含有5‘端帽子结构的mRNA翻译起始)简单点来说,它使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG-Ta中连着的四个天冬氨酸让整个标签蛋白具有很好的亲水性,其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
FLAG-Tag它本身有免疫原性,可以被抗FLAG的抗体识别,这样就方便通过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。
FLAG-Tag可以进行亲和层析,但是实验表明FLAG的特异性结合能力没有His-Tag那么强,融合蛋白的纯度也只能达到90%,因此3xFLAG被设计出来。大多数情况下FLAG标签会构建到蛋白的N端或者C端,而且大多数情况下蛋白的N端或者C端是游离在蛋白表面的,那么在这种情况下FLAG和3xFLAG没有什么区别,抗体都能结合得到。但是也有时候蛋白末端会被折叠到蛋白内部,或者被其他结合蛋白所遮蔽,那么更长的FLAG更有利于抗体结合表位的暴露,从而被抗体所结合。
融合在N端的FLAG,其可以被肠激酶切除(DDDK),从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。
Myc-Tag
Myc标签相当于人的c-Myc 410-419位肽段(序列为:EQKLISEEDL),有的说是 408-437(),还有的说C端的(AEEQKLISEEDLL),总之就是410-419附近了。c-Myc基因参与细胞的增殖,多与肿瘤相关,人的c-Myc蛋白分子量在50-70kDa。Myc标签可放在C端或N端,但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化,现在比较常用在鉴定过程中如WB,流式细胞,免疫功沉淀等技术中。
FLAG和Myc双标签
HA-Tag
HA(hemagglutinin antigen)标签蛋白,标签序列YPYDVPDYA,源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇,9个氨基酸,对外源靶蛋白的空间结构影响小, 容易构建成标签蛋白融合到N端或者C端。易于用Anti-HA抗体检测和ELISA检测。
V5-Tag
V5多肽是从猿猴副流感病毒 5(SV5)的 P 蛋白和 V 蛋白中分离得到的第 95~108 位氨基酸残基组成的多肽。V5 标签常被融合表达于靶蛋白的 N 末端或者 C 末端,以便对靶蛋白进行分析和鉴定。
HSV-Tag(单纯疱疹病毒)
HSV 来源于糖蛋白 D 前体包膜蛋白并且短(QPELAPEDPED),所以它不太可能干扰蛋白质结构或功能。
VSV-Tag
VSV-G,来源于水泡性口炎病毒的融合性外壳G糖蛋白,常被用于逆转录病毒和慢病毒载体的生物医学研究。VSV-G标签通常融合于目的蛋白的N-或者C-端,以便使用免疫组化方法来进行观察和分析。
上面简单介绍了几种常见的蛋白标签,像FLAG-Tag既可以用来检测又可以用来亲和层析纯化,有的像V5-Tag常用来WB/FC检测鉴定。这么多蛋白标签怎么选择比较好呢?
1. 第一步肯定是要确定你融合标签的目的,蛋白纯化首选His-Tag,WB优先选Flag-Tag。
2. 其次蛋白标签对目的蛋白的影响:标签可能会干扰蛋白的正确折叠,因此需要考虑添加的标签是否对目的蛋白的表达有影响。
3. 确定蛋白标签位置是在N-端还是C-端:根据蛋白结构、定位的特性选择标签蛋白标记的具体位置。
上面只是简单介绍,更多细节还是要根据自己的需求来。
⑹ 带表位标签Flag的重组蛋白请问怎么纯化
一般用FLAG标签抗体偶联介质或者磁珠进行蛋白的纯化。
⑺ 几种常用的蛋白标签的功能和优点
重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。上周小知了给大家简单介绍了大肠杆菌原核表达的整体思路,这里给大家简要介绍几个常用的蛋白标签及其功能和优点。
GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是一个在解毒过程中起到重要作用的转移酶,它的天然大小为26KD。将它应用在原核表达的原因大致有两个,一是因为它是一个高度可溶的蛋白,希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性;另一个是它可以在大肠杆菌中大量表达,起到提高表达量的作用。
GST融合表达系统广泛应用于各种融合蛋白的表达,可以在大肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达。结合的融合蛋白在非变性条件下用10mM 还原型谷胱甘肽洗脱。
在大多数情况下,融合蛋白在水溶液中是可溶的,并形成二体。GST标签可用酶学分析或免疫分析很方便的检测。标签有助于保护重组蛋白免受胞外蛋白酶的降解并提高其稳定性。在大多数情况下GST融合蛋白是完全或部分可溶的。
纯化:该表达系统表达的GST标签蛋白可直接从细菌裂解液中利用含有还原型谷胱甘肽琼脂糖凝胶(Glutathionesepharose)亲和树脂进行纯化。GST标签蛋白可在温和、非变性条件下洗脱,因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。GST在变性条件下会失去对谷胱甘肽树脂的结合能力,因此不能在纯化缓冲液中加入强变性剂如:盐酸胍或尿素等。
如果要去除GST融合部分,可用位点特异性蛋白酶切除。
检测:可用GST抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测。
6×His是指六个组氨酸残基组成的融合标签,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。当某一个标签的使用,一是能构成表位利于纯化和检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组蛋白进行分离纯化。
使用His-tag有以下几个优点:
1.标签的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能;
2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白,使复性不受其它蛋白的干扰,或进行金属螯和亲和层析复性;
3.His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究;
4.His标签免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫制备抗体;
5.可应用于多种表达系统,纯化的条件温和;
6.可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
MBP(麦芽糖结合蛋白)标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。MBP标签可通过免疫分析很方便地检测。有必要用位点专一的蛋白酶切割标签。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。
纯化:融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化。结合的融合蛋白可用10mM麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。结合亲和力在微摩尔范围。一些融合蛋白在0.2% Triton X-100或0.25% Tween 20存在下不能有效结合,而其他融合蛋白则不受影响。 缓冲条件为pH7.0到8.5,盐浓度可高达1M,但不能使用变性剂。如果要去除MBP融合部分,可用位点特异性蛋白酶切除。
检测:可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测。
Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽(DYKDDDDK),同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
使用Flag标签的优点:
FLAG作为标签蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点:
1.FLAG作为融合表达标签,其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
2.融合FLAG的目的蛋白,可以直接通过FLAG进行亲和层析,此层析为非变性纯化,可以纯化有活性的融合蛋白,并且纯化效率高。
3.FLAG作为标签蛋白,其可以被抗FLAG的抗体识别,这样就方便通过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。
4.融合在N端的FLAG,其可以被肠激酶切除(DDDK),从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。
SUMO标签蛋白是一种小分子泛素样修饰蛋白(Small ubiquitin-likemodifier),是泛素(ubiquitin)类多肽链超家族的重要成员之一。
在一级结构上,SUMO与泛素只有18%的同源性,然而两者的三级结构及其生物学功能却十分相似。研究发现SUMO可以作为重组蛋白表达的融合标签和分子伴侣,不但可以进一步提高融合蛋白的表达量,且具有抗蛋白酶水解以及促进靶蛋白正确折叠,提高重组蛋白可溶性等功能。
此外SUMO还有一项重要的应用,就是可用于完整地切除标签蛋白,得到天然蛋白。因为SUMO蛋白水解酶能识别完整的SUMO标签蛋白序列,并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。切除SUMO后,经过亲和层析,去除标签蛋白部分,就得到和天然蛋白一样的重组蛋白。所以SUMO标签也常用于和其他标签一起应用,作为特异酶切水解位点。
C-Myc标签蛋白,是一个含11个氨基酸的小标签,标签序列Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu,这11个氨基酸作为抗原表位表达在不同的蛋白质框架中仍可识别其相应抗体。C-Myc tag已成功应用在 Western-blot杂交技术、免疫沉淀和流式细胞计量术中, 可用于检测重组蛋白质在靶细胞中的表达。
分别是增强型绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/增强型黄绿色荧光蛋白/单体红色荧光蛋白,具有不同的激发波长发射波长为,均由野生型荧光蛋白通过氨基酸突变和密码子优化而来。
就eGFP而言,相对于GFP,其荧光强度更强、荧光性质更稳定。同时载体中构建的Kozak序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
mCherry是从DsRed演化来的性能最好的一个单体红色荧光蛋白,可以和GFP系列荧光蛋白共用,实现多色标记体内、外实验表明,mCherry在N端和C端融合外源蛋白时,荧光蛋白活性和被融合的目标蛋白功能相互没有明显影响。
蛋白标签是指与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。随着技术的不断发展,研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。我们在选用不同标签时要搞清楚自己的需求,灵活运用各个标签。
⑻ Flag磁珠转3小时够用吗
够。
Flag磁珠,也称Anti-Flag免疫磁珠或Flag抗体磁珠,是由高品质的Flag小鼠单克隆抗体与纳米级氨基磁珠共价偶联而成,可特异性地与动植物或微生物裂解液、血清、腹水等中含有Flag标签的蛋白结合,从而用于带有Flag标签的融合蛋白或其蛋白复合物的免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)、免疫共沉淀(Co-IP)或纯化,效果非常好,所以转3个小时够用了。