『壹』 做超滤实验时,超滤膜上标的10KD、30KD单位如何对应分子的大小是否单位越大,超滤得到的物质分子越小
首先与超滤膜的材质有关,比如聚醚砜的和再生纤维的,同样是10KD的,截流能力专是不相同的属,一般要求在截流分析量的2倍-5倍以上方可实现良好的分离,同时不同公司的超滤膜本身应该有自己的说明的,参照说明要求即可。
『贰』 澄清过滤后超滤用多少KD的膜进行比较合适
100KD和300KD都可以,因为HCD, HCP和RNA的分子量一般会小于100KD而质粒的分子量较大,因此这两款膜包都可回以对质粒进行快速有答效的超滤浓缩以及洗滤换液。Sartorius赛多利斯拥有膜配方和生产专利,通过对树脂规格,配方和制膜工艺的专业引领着一次性行业的发展。
『叁』 过滤膜 的孔径大小,10kd 的蛋白选用多少的孔径过滤
第一超滤管达不来到100%的与孔径源完全一致。任何滤膜都达不到和标称孔径完全一致,只能是无限的接近孔径。 其二分子量是质量,而孔径是长度单位,原则上不具有匹配性。原因是,标的物的结构会直接影响过滤精度。球状的和链状的,分子量相同,但是用相同孔径可以截住球状的,而链状的就会透过去。 因此,两者之间没有绝对的联系。
早上好,这个看你要过滤的材料要求了。如果是低黏度的,通常选择小孔径的比如0.22,如果是高黏度的,一般选择0.8或者更高的,特别粘稠比如甘油那样超过300cps的就不要过滤了……含有大量固体颗粒的,请先选择二级过滤,比如先用0.8再用0.45,直接用0.45或者0.22将会导致过滤器压力急剧升高爆膜掉。你是要过滤水相,还是有机相的?
『肆』 蛋白分子量为45KD应选用截留分子量30kd的超滤管合适吗
3KD指的是截留分子量截留分子量(MWCO:molecularweightcutoff)是使用分子量大小表示的超滤膜的截留性能,专又称作切割分子量。由属于直接测定超滤膜的孔径相当困难,所以使用已知分子量的球状物质进行测定。如膜对被截留物质的截留率大于90%时,就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能,称为膜的截留分子量。实际上,所使用的物质并非绝对的球形,由于试验条件的限制,所测定的截留率也有一定的误差,所以截留分子量不能绝对表示膜的分离性能。也就是说3KD分子量的产品有可能透过膜也有可能被膜拦截,一般来说希望3KD的产品全部透过,需要选择截留分子量更大的膜,比如5KD
『伍』 分离22KD的蛋白质选择什么型号的超滤膜
如果是分离22kDa及分子量远小于它的小蛋白,推荐用millipore的超滤管,截留分子量10kDa,体积1-15ml都有。主要还是看你的目的蛋白是集中于浓缩液部分,还是滤液部分,从而选择合适的截留分子量
『陆』 我做western,蛋白180KD,请问用多大浓度的分离胶即浓缩胶
浓缩胶是固定的 分离胶配稀一点呗 10或者8%的 这么大得多跑跑
『柒』 超滤分子量在10-30KD的蛋白,用外压膜好还是内压膜好
都一样抄的,超滤水是把细菌等物袭质过滤在膜外,而水通过膜,而超滤蛋白你可以选择多少以上的被截留,以下的通过膜而被纯化,这取决于你的杂蛋白的分布范围,如果你的杂蛋白分布主要是小分子量的,目的蛋白较大,你也可以选择杂蛋白通过而目的蛋白被截留在膜上,然后洗涤膜后洗脱蛋白纯化
『捌』 我的蛋白分子量150-160kd的,我应该用多少的分离胶
根据一般的建议,蛋白分子量150-160kd的应该选择丙烯酰胺浓度5%左右的分离胶,此时胶浓度较稀易碎,需要小心操作。
『玖』 蛋白大小为27.8kd,应该用多大的超滤管截流
3KD指的是截留分子量
截留分子量(MWCO:molecular weight cutoff)是使用分子量大小表示的超滤膜的内截留性能,又称容作切割分子量。
由于直接测定超滤膜的孔径相当困难,所以使用已知分子量的球状物质进行测定。如膜对被截留物质的截留率大于90%时,就用被截留物质的分子量表示膜的截留性能,称为膜的截留分子量。实际上,所使用的物质并非绝对的球形,由于试验条件的限制,所测定的截留率也有一定的误差,所以截留分子量不能绝对表示膜的分离性能。也就是说3KD分子量的产品有可能透过膜也有可能被膜拦截,一般来说希望3KD的产品全部透过,需要选择截留分子量更大的膜,比如5KD
『拾』 我的蛋白分子量150-160kd的,我应该用多少的分离胶呀我查的最佳是6%,能用10%的么这二者有什么区别优
胶浓度与蛋白大小,是经过前人多次电泳的经验总结。在最佳的电泳条件下,能得到比较好的分离效果和比较好看的条带。
如果胶浓度够大,蛋白条带会比较细一些,但电泳速度比较慢,大的片段可能分不开。
10%能不能用得看你的情况了。如果只是一个条带,用10%是没有问题的。如果有些杂带,而且杂带与你的目标蛋白差得比较远,也是可以用的。如果差别小,那就得用浓度低一点的胶了,这样才能分开。