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怎样判断超滤膜穿了

发布时间:2021-03-24 00:03:07

超滤离心管怎么使用

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Buffer,直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作,用黄枪头(200ul)取,轻轻顺着边缘插入枪头,轻轻吹打、混匀蛋白液,注意不要碰到超滤膜,然后吸取浓缩液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取,否则难度太大,有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中,没过超滤膜,防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,【若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用枪头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗,内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml
离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用。一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。

㈡ 超滤膜如何除氨氮

氨氮的分子量很低,几乎接近水,所以可以直接穿透超滤膜的,如果回你需要去除氨氮,最答好对污水进行曝气处理,这样可以让氨氮通过微生物转化成硝酸盐,硝酸盐的水再和氨氮的水混合,会在反硝化菌条件下变成氮气释放,这样所有的氨氮会大幅度下降,同时总氮也能下降。

㈢ 什么是超滤

超滤膜属于毛细管式中空纤维膜,是以高分子材料经特殊的膜制造工艺生产的不对称半透回膜,它是答一种不产生相变的分离方法,其所用的制膜材料为改性PVC、PAN或者PVDF,具有良好的机械性能和耐热、耐化学性能以及较强的抗污染能力。它的切割分子量为10万道尔顿,超滤膜丝内径0。 9mm,外径1。6mm,属内压式过滤,即原液先进入中空膜丝内部,经压力差驱动,沿径向由内向外渗透过中空膜丝,从而滤除原液中的各种细菌、胶体、杂质等大分子物质。

㈣ 超滤净水器怎样知道内部超滤膜漏水

RO膜式唯能与有效去处水各种污染物水处理方式从处理效上说当反渗透

㈤ 超滤膜如何检测质量

透气率检测:
(一)抽样方法抽样方法抽样方法抽样方法:
1.随机抽取2根中空纤维膜。其中一根膜对折后穿入样品架子,使架子中膜的有效长度为40cm(架子分为两边,各长为10cm),用环氧胶将孔封住。按此方法做两个样品。
2.在生产工艺稳定、生产正常情况下,按以上比例抽检;非正常情况下可提高抽检比例。
(二)检验方法:
1.内径、壁厚测定壁厚测定壁厚测定壁厚测定:显微镜检测,用刀片切一段2mm左右的膜竖立在载玻片上,放大10×10的倍数测定样品的内径、壁厚,至少测试样品三段,记录,取平均值计算。
2.透气率测定步骤透气率测定步骤透气率测定步骤透气率测定步骤:
(1)将样品装入透气率测定仪的渗透池内,旋紧;
(2)确认透气率测定仪的进样阀、进样调节阀和U形差压计进气阀处于关闭状态;
(3)开N2钢瓶,调节钢瓶输出压力为0.3~0.55Mpa;
(4)开透气率测定仪进样阀,缓慢调节进样调节阀,至压力表读数为0.2kgf/cm2;
(5)系统气密性检验:用皂沫检验所有管路、接头、阀门和密封面,不得有漏气点;
(6)缓慢开启U形差压计进气阀,调节进样调节阀至U形差压计读数为15.0cmHg;
(7)按压皂沫流量计下端的鼓泡橡胶头,使皂沫产生,沿皂沫流量计内壁上行使其内壁充分湿润;
(8)控制皂沫流量计产生单个气泡,用秒表记录单个气泡通过一定体积所需时间;
(9)每一样品测完后,关进样阀和U形差压计进气阀,换下一个样品装入渗透池,重复(1)~(9)操作;
(10)每天所有样品测完后,关N2钢装,并将管路中剩余气体排空;(11)每天测试时,先测保留样的透气率,作为参照;
(11)每个样品至少重复三次,取平均值计算。

㈥ 流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白.B

1、选择合适的超滤来管,主要考源虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。 通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。 若目的蛋白分子量为10kD左右

㈦ 超滤膜净水器的使用方法是怎样的

第一步:将二分进水阀和自来水管相连将自来水的水管关上,然后开始进行安装步骤。首先,将二分进水球阀和自来水管相连,最好是缠上生胶带以免漏水。
第二步:PE管一头与自来水管相接,另一头与超滤净水器相连在链接的过程中要注意链接要贴合,以防出现漏水的现象;其次就是要注意PE管的长短度,不能留得太长,也不易留得太短,根据实际情况合适就行。
第三步:将能量机的三个堵头取下,进行PE管的链接在链接的过程中要注意将蓝色的小卡子与能量机卡好,以免到时候由于水压等原因导致漏水。
第四步:废水阀的链接在废水阀的链接过程中也要注意PE管的长短,另外在链接时也得将蓝色的卡扣卡好,以免漏水
第五步:鹅颈龙头的安装在安装鹅颈龙头时要注意螺丝的固定,以免以后会出现松动的情况。
第六步:将超滤净水器的净水出水口与鹅颈龙头链接链接是用3分的PE管链接,链接的PE管不要太长,在两头接口处要注意,不要链接松动出现漏水的情况。
第七步:先找到盛水的东西,然后将水阀打开进行冲洗在冲洗过程中要注意观察水质变化情况和检查是否有漏水现象。如果有要及时进行处理。
第八步:冲洗时间大概10-20分钟,直至出现清水为止刚刚开始时虽然是出清水了,但是还是建议大家不要直接饮用,还是烧开为好。

㈧ 怎样判断超滤膜被洗坏了

用压缩空气试一下就知道了,内压式的超滤膜,从出口加压,入口的浇注面超滤膜口有气泡说明有膜破掉了,这个冒泡的点堵上就行了。
一般从出水水质就看得出了,有应该能滤掉的杂质通过就算是漏了。

㈨ 我今天买了一台五级超滤机!我发现超滤膜的包装会透气啊!没密封好!请问有问题的吗

这个真的不好说。要看你的超滤膜是什么材质的。如果是中空纤维的超滤膜,据回我所知膜丝一答旦湿润之后是不允许再干燥的,否则会造成永久损害。所以你要检查下密封损坏是什么原因造成的,里面的膜有没有凉干。还有密封损坏是否已经导致污染。
另外,友情提示下,不管商家吹嘘的几级过滤机。最重要的是要定期清洗,定期更换滤芯。不要以为上了净水机就一劳永逸了哦。

㈩ 取50ul国产Bradford溶液 ,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白.

先回答你的问题:

  1. Bradford溶液现在自己配也行(其实就是考马斯亮蓝溶液),不过买商品化的也很多,可以买Bradford蛋白定量试剂盒之类的东西。可以用这个试剂检测溶液中蛋白的浓度。如果要自己配,可以参考:http://..com/link?url=7UwTia_b3FPpAaia

  2. 在用超滤管的时候,保留在上方的是所需蛋白样品,超滤膜下方收集到的溶液就是流穿液。


这个意思应该是说,如果超滤完全保留蛋白,流穿液中理论是没有蛋白的,所以加入bradford溶液(棕红色)是不应该引起溶液变色的。但是如果有蛋白,会与Bradford溶液反应,变成蓝色。但是也有问题,超滤膜只能保留一定分子量以上的蛋白,如果截留分子量比较大,例如30K或者更大,有一些小的蛋白还是会进到流穿液的,会产生变色反应,而且肉眼观察变色,也没有办法给出具体蛋白的量,可能还是用仪器检测一下比较好。

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