① 流式细胞仪激光滤光片有什么作用
能衰减激光强度，改变激光光谱成分或限定激光振动方向。
② 流式细胞仪
有几种方法。一是要研究的蛋白是通过载体在细胞中过表达的，而且这种蛋白还带有一个荧光蛋白作为标记，那可以直接使用流式细胞仪来测量荧光强度，荧光强度越高，就说明蛋白的表达量越高。
如果这个蛋白是细胞本身固有的蛋白，就需要用荧光标记的抗体来识别。抗体和蛋白结合后，在用流式细胞仪检测，荧光强度高的那组细胞就是高表达的（和其他组比较）。
这个方法，你必须有几组对照。一是无荧光抗体的细胞，原来设定阴性阈值。另外，还要有同型对照，就是非特异性的荧光标记的同型抗体，用来设定非特异性的抗体结合。最后就是你的几组实验细胞，比较荧光强度。荧光强度最高的，一般就是高表达。不过也可能所有的都是低表达。
③ 流式细胞仪的价格
产品名称 流式细胞仪
英文名称 Flow Cytometer
国产/进口 进口
产地/品牌 美国贝克曼库尔特有限公司
型号 EPICS® ALTRA™
参考报价
销售商 贝克曼库尔特香港有限公司
流式细胞仪
【性能参数】
EPICS® ALTRA™ Flow Cytometer with HyPerSort Cell Sorting
DATA Management
FlowCentreTM流式工作中心与建于Windows平台的EXPOTM32软件系统相配合，建立了强大的、多任务操作的工作环境，这一工作环境可用于数据采集、分析以及结果报告。
A CHOICE OF Sorters
小型、经济的空冷激光允许分选速度提高到10,000个／秒，为大多数应用领域提供了充足的空间，如果您的购买能力允许，或者研究工作需要，HyPerSort 系统将在更高分选速度的前提下提供更高效、精确的分选效果。
DESIGNED Simplicity
操作人员可以直接检查或更换光学滤片以便获得更广泛的荧光染料组合，不需要重新进行光路校准。
CONFIGURATION Optics
ALTRA多光源选择为用户当前及未来的研究工作提供最多的匹配空间。
MULTIPLE Lasers
光学工作台及工业标准组件允许多激光组合支持应用工作，经济的空冷激光及高功率的水冷激光为使用者提供多种选择，使用者可以极方便地在多光束间进行联合使用或相互切换。
QUARTZ FIOW Cells
贝克曼库尔特公司在行业中率先设计高灵敏度石英流动室SortSense，这项技术允许使用者在标准及高速分选模式中使用任何参数，包括侧向散射光。
INTELLIGENT Soting
崭新的ALTRA分选模式使得在保证得率的前提下最终达到99％的纯度，使用AccuSORT模式可以将特定数量的细胞分别选人微孔板中不同的微孔。标准分选模式与高速分选模式之间可以极方便地切换。
Sort LOCK
SortLOCK功能真正实现了无需守候分选，监视屏直观地实时显示分选监控状态，确保分选结果的可信度。
SPECFICATIONS
检测参数
前向-LOG，INT及PEAK
PMT 1—LOG，INT
PMT2-PMT 5-LOG，INT，PEAK
两个附加信号通道(AUX)可以任意附加到PMT2-PMT5；可选GATE AMP功能
参数，可指定至任意的PEAK信号
1043寸数放大器
数据采集
27项参数中，12项参数可以同步采集
一个前向散射信号
二个AUX信号
TIME时间参数
RATIO
PRISM
激光器选择
空冷激光
Cyonicsl5mW，488nm氩离子激光
MellesGriot氦氖激光,633nm，10mW
Omnichromee氦氖激光,325nm，20mW
MellesGriot氦氖激光，544nm，1．5mW
Coherent Enterprise II627氩离子激光，UV(50mW)，488nm(180mW)
可选带LASERPURE 5i空冷操作系统
Coherentlnnova 70系列、90系列、300系列激光。
流动室
76 µm SortSense石英流动室
100，140pmSortSense石英流动室
250 µm Biohazard石英流动室
51，61，76，100 and 150 µm jet-in-air
高速分选系统流动室
70µm及76µmHyPerSortSense石英流动室
光束成型器及光电倍增管
光斑大小(µm) 高x宽(µm)
12x51 15x60
12x151 15x80
12x70* 15x80
8x151* 10x80
6．5x151 8x80
6 x 112 15x80
17x34 40x80
*可选件
光电倍增管(PMT)光谱检测范围300-800nm，电压调整0-2000V
样品管
多种规格的样品管选择：12X75、12X76、13X100，保证在进行大量
样本分选时，避免频繁更换样本管
分选
标准套提供
分选纯度大于99％，该分选纯度的速度前提为10,000个／秒(SortSense)
与15，000个／秒(Jet-in-Air)9种分选模式，包括3种ALTRASort分选模式，同步提供大于99％纯度，大于99％回收率及大于98％的生存能力；Enrichment模式，以及AccuSortTM Exact Count模式用于分选矩阵建立及AUTOCLONE。
HyPerSort System可选件提供
在速度为25,000个／秒时分选纯度大于98％，回收率大于95％及生存能力大于97％
灵敏度
<100MESF(Spherotech Beads)
价格64万
④ 100微米无菌细胞滤网哪里有
师兄用的晶安生物100um细胞筛网还不错，希望可以帮到您。
⑤ 流式细胞仪的原理和操作过程
原理：
流式细胞仪可同时进行多参数测量，信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的，所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时，受到激光照射会向立体角为2π的整个空间散射光线，散射光的波长和入射光的波长相同。散射光的强度及其空间分布与细胞的大小、形态、质膜和细胞内部结构密切相关，因为这些生物学参数又和细胞对光线的反射、折射等光学特性有关。未遭受任何损坏的细胞对光线都具有特征性的散射，因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。经过固定的和染色处理的细胞由于光学性质的改变，其散射光信号当然不同于活细胞。散射光不仅与作为散射中心的细胞的参数相关，还跟散射角、及收集散射光线的立体角等非生物因素有关。
在流式细胞术测量中，常用的是两种散射方向的散射光测量：①前向角（即0角）散射（FSC）；②侧向散射（SSC），又称90角散射。这时所说的角度指的是激光束照射方向与收集散射光信号的光电倍增管轴向方向之间大致所成的角度。一般说来，前向角散射光的强度与细胞的大小有关，对同种细胞群体随着细胞截面积的增大而增大；对球形活细胞经实验表明在小立体角范围内基本上和截面积大小成线性关系；对于形状复杂具有取向性的细胞则可能差异很大，尤其需要注意。侧向散射光的测量主要用来获取有关细胞内部精细结构的颗粒性质的有关信息。侧向散射光虽然也与细胞的形状和大小有关，但它对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为敏感，也能对细胞质内较大颗粒给出灵敏反映。
在实际使用中，仪器首先要对光散射信号进行测量。当光散射分析与荧光探针联合使用时，可鉴别出样品中被染色和未被染色细胞。光散射测量最有效的用途是从非均一的群体中鉴别出某些亚群。
荧光信号主要包括两部分：①自发荧光，即不经荧光染色细胞内部的荧光分子经光照射后所发出的荧光；②特征荧光，即由细胞经染色结合上的荧光染料受光照而发出的荧光，其荧光强度较弱，波长也与照射激光不同。自发荧光信号为噪声信号，在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。在免疫细胞化学等测量中，对于结合水平不高的荧光抗体来说，如何提高信噪比是个关键。一般说来，细胞成分中能够产生的自发荧光的分子（例核黄素、细胞色素等）的含量越高，自发荧光越强；培养细胞中死细胞/活细胞比例越高，自发荧光越强；细胞样品中所含亮细胞的比例越高，自发荧光越强。
减少自发荧光干扰、提高信噪比的主要措施是：①尽量选用较亮的荧光染料；②选用适宜的激光和滤片光学系统；③采用电子补偿电路，将自发荧光的本底贡献予以补偿。
操作过程：
①打开电源，对系统进行预热；
②打开气体阈，调节压力，获得适宜的液流速度；开启光源冷却系统；
③在样品管中加入去离子水，冲洗液流的喷嘴系统；
④利用校准标准样品，调整仪器，使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的 基础上，0和90散射的荧光强度最强，并要求变异系数为最小；
⑤选定流速、测量细胞数、测量参数等，在同样的工作条件下测量样品和对照样品；同时选 择计算机屏上数据的显示方式，从而能直观掌握测量进程；
⑥样品测量完毕后，再用去离子水冲洗液流系统；
⑦因为实验数据已存入计算机硬盘（有的机器还备有光盘系统，存贮量更大），因此可关闭 气体、测量装置，而单独使用计算机进行数据处理；
⑧将所需结果打印出来。
⑥ 流式细胞仪实验可以用pp膜过滤细胞吗
流式样本应该用网目40-70微米的尼龙网过滤不能用
pp膜过滤啊
⑦ 上流式细胞仪前能用1ml的注射器给样品的过滤吗
几毫升不是问题，而是你使用的滤网，一般建议使用70微米网目的滤网。
注射器加针头是没有过滤作用的。
⑧ 流式细胞仪如何设置凋亡阳性对照
1、必须活细胞检测,不能用能破坏细胞膜完整性的固定剂和穿透剂固定或穿膜.
2、特殊细胞的染色方法：在消化或吹打时,有些细胞（如神经元细胞）很容易受到损伤,导致晚期凋亡或坏死比例非常高,不能反映真实结果.实验的解决方法：先低速离心,吸取细胞培养板中的液体,留少许液体,加入适量PI和Annexin-V染色10min后,将漂浮细胞吸至离心管中,离心洗涤两次,用PBS漂洗贴壁细胞两次,加胰酶消化后将细胞悬液移至另一离心管中,离心洗涤,再与漂浮细胞合并后上流式细胞仪检测.应用该法可降低晚期凋亡和坏死比例,增加早期凋亡细胞比例.
3、由于Annexin-V为钙离子依赖的磷脂结合蛋白,只有在钙离子存在的情况下与PS的亲和力才大,因而在消化细胞时,建议一般不采用含EDTA的消化液.
4、必须设置阴性对照和补偿对照（分别单染）.
⑨ 如何用流式细胞仪检测细胞内的ROS
流式检测ROS的特异性比较差。一般来说，针对过氧化氢和超氧化物有荧光探针。加到细胞培养液后，细胞摄龋遇到ROS，可以发出荧光，上机检测可以比较各组之间荧光强度的变化从而代表ROS水平的不同。你这个图横坐标代表的是相对荧光强度，纵坐标代表的是细胞计数。 图的含义就是在每个荧光强度有多少细胞。 估计你用了氧化敏感的荧光指针，ROS反应后荧光增加。所以你应该先用对照组设一个阈值，看实验组的荧光强度有没有高于或者低于该阈值。
⑩ 流式细胞仪带通滤光片500/25是什么意思
这个滤片是Band pass滤片，也就是只能通过一定波长的光线。500是指500nm，也就是能通过的光线的波长是以500nm为中心，波长的范围有25nm的幅度。换句话说，只有487.5-512.5nm波长范围内的光线可以通过这个滤片。