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超滤离心管为什么底部残留液体

发布时间:2023-03-18 06:09:05

① 移液管操作时应注意什么为什么放完液体后要停留一定的时间最后留在管上的半滴液体如何处理为什么

操作时要看清管上面是否标有要吹洗标志,若有,则滴加完后要用洗耳球吹洗一下,若无,则滴完后停留一段时间,其目的是使液体充分滴下,以免有未滴完的液体而影响溶液添加量,剩余的半笭发蒂菏郦孤垫酞叮喀滴液体要轻触容器壁,因为不需要吹洗的滴管流出多少液体就是你所取的溶液的量,这半滴也是应当滴出的量,不应属于残留量,不知道这样解释你是否明白,语文不好,有些惭愧;其次,在观察时,要与视线平齐;洗耳球中的气体要提前排出,否则容易混入杂质;吸取时不要过度,吸入洗耳球会造成污染;移液管在使用前要润洗,用蒸馏水洗净,润洗三次,再用带移取的液体润洗三次。

② 为什么移液管尖端仍残留有一滴液体不可吹出

因为在制作移液管的过程中已经考虑了这一滴不吹下来的误差,所以没必要将那一滴吹下来

③ 求助:第一次使用超滤离心管应该怎么处理

可能不同厂家的产品保存运输条件不一样。
如果有甘油等保护剂,那就一定要洗干净再加样品。版权
干的超滤管也要先润湿再用,否则可能不能完全利用膜面积。
最好,用样品buffer润洗下再加样,最大程度保证蛋白活性。尤其是用过后保存在NaOH或乙醇中后。
一般还是离心机甩一下好,使膜充分浸润。

降低吸附的办法有:
1,蛋白浓度不要过低
2,尽量选用纤维素的低吸附超滤管
3,用前可以用Tween 80等去垢剂润洗(不影响蛋白活性的前提下)
4,加入保护蛋白,如BSA(不影响蛋白后续使用的前提下)

用完保存在20% EtOH中,4C保存,防止长菌,依不同样品可以重复使用不同的次数。

④ 超滤离心管可以灭菌吗

1、可以用70%的酒精消毒
2、如果是高温高压灭菌,要注意灭完菌后,管里面的超滤膜是处于湿润的状态,所以需要立即使用,因为膜湿润后就不能干

⑤ 丝素溶液用超滤离心管离心后为什么有沉淀

那些沉淀是溶液中的蛋白析出啦。

⑥ 离心分离后,怎样洗涤离心试管底部的沉淀

沉淀的洗涤、转移和分离在装有沉淀的离心管中加入适量洗涤液(少量多次),用玻棒充分搅拌,可加热,再离心分离。在洗净沉淀试管中加入少量蒸馏水,搅动沉淀。

由于离心机等设备可产生相当高的角速度,使离心力远大于重力,于是溶液中的悬浮物便易于沉淀析出:又由于比重不同的物质所受到的离心力不同,从而沉降速度不同,能使比重不同的物质达到分离。

对于两相密度相差较小,黏度较大,颗粒粒度较细的非均相体系,在重力场中分离需要很长时间,甚至不能完全分离。若改用离心分离,由于转鼓高速旋转产生的离心力远远大于重力,可大大提高沉降速率,因此离心分离只需较短的时间即能获得大于重力沉降的效果。

(6)超滤离心管为什么底部残留液体扩展阅读:

当非均相体系围绕一中心轴做旋转运动时,运动物体会受到离心力的作用,旋转速率越高,运动物体所受到的离心力越大。

在相同的转速下,容器中不同大小密度的物质会以不同的速率沉降。如果颗粒密度大于液体密度,则颗粒将沿离心力的方向而逐渐远离中心轴。经过一段时间的离心操作,就可以实现密度不同物质的有效分离。

不互溶的液体在离心机中因密度不同而很快分离。这种方法比重力分离时间要短得多。常用一种称为离心萃取机的装置来分离液体溶液组分。

该装置由放置在圆筒转鼓中的一系列多孔同心环组成,转鼓环绕着一个筒形轴以每分钟2 0005 000转的速度旋转,液体通过筒形轴进出,以径向顺流方式在转筒中流动而达到液体溶液组分的分离。

⑦ 离心管和离心超滤管

离心管就来是一个简单的可自以承受高转速压力的管子,比如离一些样品,分离出上清沉淀。
离心超滤管会有一个类似于内管和外管的两个部分,内管中是带有一定分子量的膜,当高速离心时,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即内管中),就是超滤的原理。。。。常用于浓缩样品。

⑧ 超滤离心管怎么使用

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Buffer,直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作,用黄枪头(200ul)取,轻轻顺着边缘插入枪头,轻轻吹打、混匀蛋白液,注意不要碰到超滤膜,然后吸取浓缩液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取,否则难度太大,有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中,没过超滤膜,防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,【若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用枪头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗,内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml
离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用。一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。

⑨ 汽水分离器结构原理

MS9汽水分离器是采用高温纳米过滤滤清更加高效过滤去除蒸汽和压缩空气系统中夹带的液滴场合,大量含水的蒸汽、压缩空气进入分离器并在其中以中立旋流离心向下倾斜变向运动。

由于气体和液体的密度是不一样的,如果两者需要一起通过滤清的话,通常来说,液体就会被过滤到滤清上,而气体就能通过。而且因为中立,气体依旧会朝着原先的方向移动。而留在滤清上的液体就会分流至分离器的底部位置凝聚排出,从而提高气体质量达到饱和气体效果高达99.9%。

(9)超滤离心管为什么底部残留液体扩展阅读:

一、种类

1、挡板型

挡板或折板式分离器由很多挡板构成,流体在分离器内多次改变流动方向,由于悬浮的水滴有较大的质量和惯性,当遇到挡板流动方向改变时,干蒸汽可以绕过挡板继续向前。

而水滴就会积聚在挡板上,汽水分离器有很大的通流面积,减少了水滴的动能,大部分都会凝聚,最后落到分离器的底部,通过疏水阀排出。

2、汽旋型

汽旋或离心型分离器使用了一连串肋片以便产生高速气旋,在分离器内高速旋转流动的蒸汽。

3、吸附型

吸附型分离器内部的蒸汽通道上有一个阻碍物,一般是一个金属网垫,悬浮的水滴遇到它后被吸附,水滴大到一定程度后,由于重力作用落到分离器底部。结合汽旋和吸附两种形式的分离器也很常见,由于结合了这两种方法整个分离效率会有所提高。

二、保温效果

如果汽水分离器未进行保温,由于表面散热将会增加蒸汽的含水量,损失很多的热量。假如蒸汽温度为150℃,环境温度为15℃,那么增加保温后每年将会节省8600MJ的热量(假定是辐射传热,一年工作8760h),增加保温后会节省相当多的能量,短时间内就能节省出加保温的成本。

应使用专门保温套,由于分离器的形状特殊,尤其是法兰连接时,保温比较困难,使保温效果受到了限制。

即使最好的保温也不可能完全消除热量损失,一般保温效率为90%。使用专门为特殊的分离器设计的保温套非常重要,否则保温效率将下降。保温良好的分离器也会减少入被烫伤的危险。

⑩ 想问一下超滤离心管怎么使用啊还有它能不能重复使用

可以的,先用超声波洗干净,再用高压灭菌锅灭菌后,备用即可

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