中药超滤需要什么缓冲液

① 胃蛋白酶、胰蛋白酶处理样品时需要什么样的缓冲液啊终浓度和工作条件是什么啊

胰蛋白酶工作条件为37度，PH8.5的微碱性环境，缓冲液使用25mM的碳酸氢铵即可，终浓度为0.01ug/ul

② 我纯化的抗体，甘氨酸盐酸洗脱，TRIS-HCL中和，我要把缓冲液改成PBS，超滤可以吗透析要用多大浓度的PBS

您好！你这个是换缓冲体系，超滤能达到你需要的目的，用连续洗滤的方法需要5倍体积的PBS，就能达到对之前缓冲液99.3%的去除。
体积小的样品可用超滤离心管，体积大用超滤系统

如还有疑问可QQ89347157交流

③ 跑SDS-PAGE的电泳缓冲液需要什么水来配制

1.配制电泳试剂用水蒸馏水就可以了就是单蒸水,如果条件允许的话,可以只用更好的当然纯水是最好了;
2.一般实验室都会有蒸馏水,双蒸水,其实双蒸水就能满足大多数实验室的要求,纯水才是所谓的去离子水

④ EMS-TRIS 缓冲液是什么需要自己配嘛怎么

配置相同浓度的MES和Tris，用6M的NaOH调节pH后定容即可。
4度保存1个月左右，不宜放置太久，建议现用现配。

⑤ 缩短透析时间为什么要增加缓冲液的量

从生理学的角度来看， 它可以保持恒定的溶质清除率和超滤，以补充缺乏物质，如钙离子和氨基酸供应营养物质，而不增加代谢并发症的吸收渗透物质很少或没有吸收可以纠正酸中毒从细菌学的角度来看，酸碱度是生理的， 没有过敏原，无菌可以抑制细菌和真菌的生长而不损害人类的防御机制身体。

透析液中含有K＋，还有Na＋，还有Ca2＋，还有Mg2＋，Cl－，还有HCO3乙酸，透析液具有一定的渗透压，用于直肠、腹腔或体外透析。这里提到的 “体外透析” 实际上是我们常见的血液透析，因为透析过程不同于腹膜透析和结肠透析，所以如果会发现不好或者特别的情况，那么他们也是发生在体外。

⑥ 需要不同pH的krebs-ringer缓冲液，不知道不同pH的配制方法有什么不同。最好能给出处，感激不尽

krebs-Ringer phosphate（KRPD缓冲液）的配制：
130 mM NaCl, 5mM KCl, 1.27 mM MgSO4, 0.95 mM CaCl2, 5 mM glucose, 10 mMNaH2PO4/Na2HPO4, pH 7.4

配制方法：

A液：NaCl7.5985g ; KCl 0.3727g ; CaCl2 0.1054g，glucose-H2O 0.9495g, 加ddH2O 100ml溶解；

B液：NaH2PO4-2H2O 0.2964g Na2HPO4-12H2O 2.9011g，加100mlddH20溶解后加入MgSO4-7H2O0.3130g，充分溶解。

将A、B混合，用ddH20将体积调节至990ml左右，用1M NaOH或1M HCl调节pH至7.2~7.4，定容至1000ml。

⑦ 什么是超滤液

循环血液经过肾小球毛细血管时，血浆中的水和小分子溶质，包括少量分子量较小的血浆蛋白，可以滤入肾小囊的囊腔而形成滤过液。这种滤过液就是超滤液。

尿液首先在肾脏，通过肾小球滤过，形成超滤液，人体每天正常生成的超滤液可以达到180升。超滤液进入肾小管后，称为小管液，那么肾小管和集合管可以把人体大部分的水分和各种溶质重吸收回血液，称之为重吸收。

除此以外，肾小管和集合管还有分泌的功能，可以将某些物质分泌入小管腔内，称为分泌。经过肾小管和集合管的重吸收和分泌，人体正常每天生成的尿液只有1.5升。

(7)中药超滤需要什么缓冲液扩展阅读：

超滤技术：

超滤是一种加压膜分离技术，即在一定的压力下，使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜，而使大分子溶质不能透过，留在膜的一边，从而使大分子物质得到了部分的纯化。超滤原理也是一种膜分离过程原理.

超滤利用一种压力活性膜，在外界推动力(压力)作用下截留水中胶体、颗粒和分子量相对较高的物质，而水和小的溶质颗粒透过膜的分离过程。通过膜表面的微孔筛选可截留分子量为3x10000—1x10000的物质。当被处理水借助于外界压力的作用以一定的流速通过膜表面时.

水分子和分子量小于300—500的溶质透过膜，而大于膜孔的微粒、大分子等由于筛分作用被截留，从而使水得到净化。也就是说，当水通过超滤膜后，可将水中含有的大部分胶体硅除去，同时可去除大量的有机物等。

超滤原理并不复杂。在超滤过程中，由于被截留的杂质在膜表面上不断积累，会产生浓差极化现象，当膜面溶质浓度达到某一极限时即生成凝胶层，使膜的透水量急剧下降，这使得超滤的应用受到一定程度的限制。

为此，需通过试验进行研究，以确定最佳的工艺和运行条件，最大限度地减轻浓差极化的影响，使超滤成为一种可靠的反渗透预处理方法。

超滤是一种膜分离技术，(UItrafil-tration 简称UF)。能够将溶液净化，分离或者浓缩。超滤是介于微滤与纳滤之间，且三者之间无明显的分界线。一般来说，超滤膜的孔径在0.05 um–1 nm之间，操作压力为0.1–0.5 Mpa。

主要用于截留去除水中的悬浮物、胶体、微粒、细菌和病毒等大分子物质。超滤膜根据膜材料，可分为有机膜和无机膜。按膜的外型，又可分为：平板式、管式、毛细管式、中空纤维和多孔式。目前家用超滤净水器，多以中空膜为主。

超滤膜的工作以筛分机理为主，以工作压力和膜的孔径大小来进行水的净化处理。以中空纤维为例。

以进水方式可分为外压式：原水从膜丝外进入，净水从膜丝内制取。反之则为内压式。内压式的工作压力较外压式要低。超滤膜在饮用水深度处理，工业用超纯水和溶液浓缩分离等许多领域中，得到了广泛应用。

参考资料资料：网络-原尿

参考资料资料：网络-超滤技术

⑧ 缓冲液的定义是什么.

什么是缓冲液？
缓冲液是有着恒定pH值通常用来标定pH计的溶液.一般来
说,缓冲液是以液体或片剂的形式提供,其pH值为4,7,10.

在日常使用过程中,缓冲液易变脏.因此,在
把电极浸入缓冲液之前,一定要仔细用蒸馏水漂洗.缓冲液应贮藏在阴凉,干燥的容器中.未启封的缓冲液具
有12个月的贮藏寿命期,在经常使用的情况下,缓冲液应每六个月更换一次.
如何保管好pH电极 在贮藏期间,电极末端的玻璃泡一定保持在潮湿状态,每次更换电极保护帽,都要
在帽内注入pH值为7的缓冲液.在干燥环境下贮藏电极将缩短电极工作寿命,从而永久性损坏电极.
多长时间进行一次pH计标定 除去两个因素外,pH计的标定是不确定的.这两个因素是电极标准化或斜
率调整和电极老化处理.在通常使用情形下,应把电极放入pH值为7的缓冲液中确保pH计进行标定.在标准
化控制过程中,将进行一些调整.每月一次的两点法标定需要执行.采用pH计值为7和4,或7和10缓冲液
进行标定.也需要进行斜率调整,该调整能够保证pH计电路适应电极老化的需要.
温度对pH计读数有何影响 温度每变化1摄氏度,样品pH值将变化0.003pH单位.为了消除温度变化对
测量的影响,pH计中具有温度补偿功能(ATC).如果pH计具有人工补偿性能,需要确定样品的温度,并要
将之输入pH计中.
什么是氧化还原 使用pH/mV计的mV功能能够测量氧化还原性能.氧化还原电极监测化学反应,量化离
子活动和确定溶液的氧化还原特性.
电导率
什么是电导率 电导率(micromhos/cm微姆欧/厘米)是溶液传导电流的能力.溶液中自由离子的总量决定
导电强度.但电导率计不能测量特殊离子的强度.
测量单位是什么 阻抗的基本单位是ohm,而电导率是阻抗的倒数,即mho,且1 mho=1 siemens.
PPM和micromho(us)量程有何不同 PPM量程相当于us量程的70%.该比率由厂商内置表中,用户
根据自己需要可以更改.
什么是标定液
标定液可以采用不同的量程,即PPM和us.标定液具有恒定电导率值,用来进行电导率计的电性能标
定.在阴凉,干燥环境中保存的条件下,未启封的标定液具有12个月的贮藏寿命期.在经常使用的情况下,需
每6个月更换一次缓冲液.
温度对电导率影响如何 温度是影响电导率的关键因素,测量时必须加以考虑并加以调整.以水为例,它
的电导率变化率是+/- 2% /℃.
什么是电阻率 当电导率读数小到0.1us,读数会变得不稳定.这是由于样品导电性太低,仪表电路不能进
行准确测量.建议使用电阻率表进行对电阻率的测量.电阻率(ohm/cm)是电导率的倒数.电导率为0.1 us的
溶液,它的电阻率是10 MΩ.
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典型数值 量程
蒸馏水——1~2 us PPM=TDS(Total Dissolved Solids)
自来水——200~300 us Mg/L=PPM
海 水——45,000~47,000 us Micromho=电导率
溶 氧
如何进行溶氧的测量 有两种可供选择的技术方法进行对溶氧的测量,一种是化学实验法如温克勒(溶
氧)测定法,另外一种是采用溶氧仪测量.溶氧计通常在日常现场测试,连续监测和要求快速测量的场合中得
到应用.
原电池(Galvanic)电极和 极谱法(Polarigraphic)电极.这两种电极是用于溶氧仪最流行的电极.极谱法
电极要求定期更换膜和注入电解溶液.原电池电极不需要维护,定期更换即可,且使用完后便于处理.
原电池电极的寿命怎样 该电极的寿命取决于暴露接触氧的时间.通常的寿命为12个月.
如何保管溶氧电极 适当保存能延长电极寿命.决不能将电极放至较热环境中储存.建议把电极储存在低
温的冰箱中,在无氧的环境中,如氮气环境中,将增加电极的惰性.也可购买无氧储藏箱.
样品流速对测量有多重要 所有的溶氧计都要求液体流动经过电极薄膜.每个型号对样品流动程度的要求
不尽相同.如果样品不流动,流速为0,通过轻敲和摇摆电极的办法,使电极移动,但要保证电极薄膜接触溶
氧的连续性和一致性.
特殊离子电极
特殊离子电极用于溶液中含量较大的特殊离子(specific-ion)浓度的测量,如 溴(Br-) 钙(Ca+) 氯(Cl-
) 氟(F-)钾(K+) 银(Ag+) 钠(Na+)硫(S-)等.特殊离子计是专门测量这些离子浓度的仪器,它是
利用电极电压与特殊离子剧烈活动程度的对数成线性比例的原理来对特殊离子浓度进行测量的.特殊离子计的
使用方法与pH计相似,但有时需要离子强度调节仪和pH值调节仪,以避免强酸,强碱对特殊离子电极的腐
蚀.

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信

T21通用型变送器

通用性强,适用于各种传感器(PH,
ORP,DO,电导率等),只是软件不
同,硬件完全相同.
输出隔离,变送器接收各种电化学分析传
感器的信号,输出4~20mA或20~4mA
号给接受器,控制器或记录仪.输出的电
流信号稳定,不受噪音信号干扰.
双通道测量,T21型通用变送器可以接收
两个传感器的输入信号,提供2或3路输
出信号.这两路传感器可以是PH,
ORP,DO(溶解氧)和pION(特殊离
子)中的任意两种组合.电导率和电阻率
变送器只允许单路输入.
可选温度和PID输出.
自动缓冲液标定,只需简单地将标准缓冲
液数值输入内存,然后将传感器插入标准
缓冲液,待显示数据稳定后,按键存储即
完成标定.
32字符超宽液晶显示,可同时显示测量
值,温度,百分比等.
可在电极信号衰减后重新标定,延长电极
使用寿命.
安装简便,配备不同安装附件,可盘装,
挂墙或立柱安装.
产品描述:
T21型带微处理器两线制通用变送器功能强
大,通用性好,可以测量PH,ORP,pION(特殊
离子),DO(溶解氧),电导率和电阻率.调试简
便,精度高.电子单元在防护等级NEMA 4X
(IP66)的外壳内,适用于大多数应用场合,两线
制回路推荐24VDC供电.可选电源模块输入
110/220VAC, 60/50Hz输出24VDC/0.5A,可选两个
触电容量5A的继电器用于报警和控制.防爆变送
器参见第五页T28型变送器.
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T21变送器性能指标
外壳:
NEMA 4X IP66聚碳酸酯材质,
尺寸122mm×203mm×74.9mm
重量 标准T21: 0.91kg;
发货重量: 1.41kg
精度 ±0.10%的满量程
线性度
±0.05%的满量程
灵敏度
PH: ±0.01PH;
ORP: ±0.1mv;
DO: ±0.01ppm;
pION: ±0.1mv;
电导率: ±0.01西门子(mho)
电阻率: ±0.1mv;
稳定性
每年±0.2%@00C~700C
响应时间
达到90%变化仅需1秒
重复性
PH: ±0.01PH;
ORP: ±0.1mv;
DO: ±0.01ppm;
pION: ±0.1mv;
电导率: ±0.01西门子(mho)
电阻率: ±0.1mv;
环境温度
-200C~+700C
温度补偿
-300C~+1400C自动补偿
当跨度超过00C ~1000C时精度小于±0.10C
输入/输出隔离
传感器输入和4-20mA输出回路间最大耐压
300V
标定
自动缓冲标定
返厂标定
现场可选温度单位0C或0F
现场可调式对比显示

测量参数及范围
PH:
0.00~14.00PH -2.00~15.50PH(可选)
ORP:
-2000~+2000mv
pION(特殊离子):
从ppb到千分之一自动调整.
浓度从1到999.00Molar (克分子浓度)或从0.1
到9.999ppm
DO(溶解氧):
0~200%饱合或0-20mg/l
电导率:
1 s到1.5s
电阻率:
0~2M , 0~20 M
输出
4~20mA 或 20~4mA 线性
最多3路模拟输出(通道1,通道2,温度)
通道2可选PID输出
输入
可接两个传感器
pH, ORP, DO和特殊离子中的任意两种组合.
电导率/电阻率传感器只有单路输入.
供电
*两线制,13.5VDC到50VDC,推荐24VDC.
最大回路负载@24VDC
单通道输出为525 ,双通道输出约800
*四线制电源(可选)
115/230VAC,50/60Hz,0.5A
继电器模块(可选)
2路SPDT(单刀双掷)干节点
5A容量,可调节设置点和差动
115VAC 5A无感,3A有感.
220VAC 1.5A无感,0.75A有感.
双通道:一个通道一个继电器,输出隔离
继电器可现场按键设置高低位输出,
死区全量程完全可调
显示
32字符超宽液晶显示
主菜单同步显示:1)测量类型
2)测量值
3)输出百分比
4)温度

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T21变送器外形尺寸图

背板尺寸外形图

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四海归一的解决之道 An International Solution Provider
T21变送器安装图
1.立柱安装

2.护栏安装 3.壁挂安装

4.盘装

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四海归一的解决之道 An International Solution Provider
T21变送器两线制接线图
1.常用型

2.带温度输出

3.双通道

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T21变送器220V四线制线制接线图
1.常用型接线

2.带温度输出

3.双通道

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4.带继电器输出

注:
继电器电源模块与T21变送器组合模型,如上图(1),(2)
图(1) 图(2)

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T28防爆变送器

独特的技术优势:
T28型智能两线制变送器外观简单而符合人类
工程学原理.通用性强,可以测量PH/ORP,
溶解氧,电导率,电阻率和特殊离子.
外壳材质为316不锈钢,防护等级NEMA7C
(室内危险场合应用),前后表盖可以方便地
拆装,电气接口(1/2〃NPT)在两侧.
经FM和CSA认证符合要求本安和防爆的应
用.变送器允许安装在I区I,II,III级A到
G组的危险场合.
4~20mA或20~4mA信号输出,给接受器,控
制器或记录仪.回路供电典型为24VDC,输
出的电流信号稳定,不受噪音信号干扰,最大
可距电源可达3英里.
调试简单,调试及现场参数设置均可用ECD
的磁性螺丝刀通过磁感应键输入,无须拧开仪
表盖,从而解决了电子单元暴露于危险环境的
问题.温度显示可以是摄氏度,也可以是华氏
度;
自诊断功能在发现故障或传感器失效后会及时
显示,通知操作者尽快处理.
万能安装支架即可用于墙壁安装,也可用于护
栏管道安装,支架上的调节螺钉可以调节显示
方位和角度.
产品简介:
T28型带微处理器两线制通用变送器功能
强大,通用性好,可以测量PH,ORP,pION
(特殊离子),DO(溶解氧),电导率和电阻
率.调试简便,精度高.电子单元在经本安及
防爆(IP66)认证的外壳内,适用于大多数普
通及各种不同的危险场合应用,采用两线制回
路24VDC供电.可选4-20mA或20-4mA输
出.

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T28 型本安防爆变送器性能指标
测量参数及范围
PH:
0.00~14.00PH
-2.00~15.50PH(可选)
ORP:
-2000~+2000mv
pION(特殊离子):
从ppb到千分之一自动调整.
浓度从1到999.00Molar (克分子浓度)或从0.1
到9.999ppm
DO(溶解氧):
0~200%饱合或0-20mg/l
电导率:
1 s到1.5s
电阻率:
0~2M , 0~20 M
输出
4~20mA 或 20~4mA
电源要求
推荐24VDC
最大50VDC
最小14VDC
最大回路负载
4-20mA@24VDC为500
4-20mA@50VDC为1,800
可选供电
115vac,220Vac,50/60hz,0.5amp
操作温度
-40F~+1580F(-200C~+700C)
显示
菜单驱动,24字符超宽耐高温液晶显示
向内旋转±1800C以寻找最佳的观测角度.主
菜单将同步显示:1)测量类型
2)测量值
3)电流输出
4)温度
外壳
316不锈钢材质,NEMA7C防护等级,FM和
CSA认证.加合适的电缆密封接头在Ⅰ区Ⅰ级C
到G组防爆电子单元FM认证,本质安全,在Ⅰ区
Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ级A到G组本安.
外壳尺寸为Φ8.7cmх12.5cm
精度
PH: ±0.10%的满量程;
ORP: ±0.10%的满量程;
DO: ±0. 10%的满量程;
pION: ±0.10%的满量程;
电导率: ±1mV R.T.L
电阻率: ±1mV R.T.L
线性度
±0.05%的满量程
灵敏度
PH: ±0.01PH;
ORP: ±0.1mv;
DO: ±0.01O2;
pION: ±0.01ppm;
电导率: ±0.01西门子(mho)
电阻率: ±0.05的满量程;
稳定性
每年±0.2%@00C~700C
(DO:每年±0.2%@00C~500C)
响应时间
达到90%变化少于1秒
存储器
永久性存储器,EEPROM
温度补偿
-30~+140°C自动补偿,精度在0~+100°C
小于±1%
操作特点
通过前面板的四个非侵入式电磁开关可实
现菜单驱动,按键标定和组态.
标定
现场可调式标定值
自动标定
在开始阶段定义两个标定点,只需两个按
键即可完成随后的标定
温度显示
现场可选温度单位0C或0F
显示对比
现场可调式对比显示
安装附件
通用不锈钢安装支架可用于2英寸管及墙
壁式安装
重量 标准T28 2.95kg
发货重量 3.4kg
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四海归一的解决之道 An International Solution Provider
T28变送器尺寸外形图

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四海归一的解决之道 An International Solution Provider
T28变送器安装图
1.安装于护栏管道上

2.安装于墙壁或盘柜上

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四海归一的解决之道 An International Solution Provider
T28变送器接线图
参考资料：
http://cache..com/c?word=%CA%B2%C3%B4%3B%CA%C7%3B%BB%BA%B3%E5%3B%D2%BA&url=http%3A//www%2Ewbzk%2Enet/Proct/%5Fvti%5Fcnf/ph%2DECD%2Epdf&b=0&a=9&user=

⑨ 如何进行蛋白超滤设备选型

如何进行蛋白超滤设备选型？在分离分析特别是蛋白质分离分析中，层析是相当重要、且相当常见的一种技术，其原理较为复杂，对人员的要求相对较高，这里只能做一个相对简单的介绍。
一、 吸附层析
1、 吸附柱层析
吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。
2、 薄层层析
薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种层析方法。这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层，然后按纸层析操作进行展层。
3、 聚酰胺薄膜层析
聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。层析时，展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离在聚酰胺膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程，就能导致分离物质达到分离目的。
二、 离子交换层析
离子交换层析是在以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的。离子交换剂是由基质、电荷基团和反离子构成的。离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行，或借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。`
三、 凝胶过滤
凝胶过滤又叫分子筛层析，其原因是凝胶具有网状结构，小分子物质能进入其内部，而大分子物质却被排除在外部。当一混合溶液通过凝胶过滤层析柱时，溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。
四、 亲和层析
亲和层析的原理与众所周知的抗原一抗体、激素一受体和酶一底物等特异性反应的机理相类似，每对反应物之间都有一定的亲和力。正如在酶与底物的反应中，特异的废物(S')才能和一定的酶(E)结合，产生复合物(E－S')一样。在亲和层析中是特异的配体才能和一定的生命大分子之间具有亲和力，并产生复合物。而亲和层析与酶一底物反应不同的是，前者进行反应时，配体(类似底物)是固相存在；后者进行反应时，底物呈液相存在。实质上亲和层析是把具有识别能力的配体L(对酶的配体可以是类似底物、抑制剂或辅基等)以共价键的方式固化到含有活化基团的基质M(如活化琼脂糖等)上，制成亲和吸附剂M－L，或者叫做固相载体。而固化后的配体仍保持束缚特异物质的能力。因此，当把围相载体装人小层析柱(几毫升到几十毫升床体积)后，让欲分离的样品液通过该柱。这时样品中对配体有亲和力的物质S就可借助静电引力、范德瓦尔力，以及结构互补效应等作用吸附到固相载体上，而无亲和力或非特异吸附的物质则被起始缓冲液洗涤出来，并形成了第一个层析峰。然后，恰当地改变起始缓冲 液的PH值、或增加离子强度、或加人抑③剂等因子，即可把物质S从固相载体上解离下来，并形成了第M个层析峰(见图6－2)。显然，通过这一操作程序就可把有效成分与杂质满意地分离开。如果样品液中存在两个以上的物质与固相载体具有亲和力(其大小有差异)时，采用选择性缓冲液进行洗脱，也可以将它们分离开。用过的固相载体经再生处理后，可以重复使用。
上面介绍的亲和层析法亦称特异性配体亲和层析法。除此之外，还有一种亲和层析法叫通用性配体亲和层析法。这两种亲和层析法相比，前者的配体一般为复杂的生命大分子物质(如抗体、受体和酶的类似底物等)，它具有较强的吸附选择性和较大的结合力。而后者的配体则一般为简单的小分子物质(如金属、染料，以及氨基酸等)，它成本低廉、具有较高的吸附容量，通过改善吸附和脱附条件可提高层析的分辨率。
五、 聚焦层析
聚焦层析也是一种柱层析。因此，它和另外的层析一样，照例具有流动相，其流动相为 多缓冲剂，固定相为多缓冲交换剂。
聚焦层析原理可以从PH梯度溶液的形成、蛋白质的行为和聚焦效应三方面来阐述。
1、PH梯度溶液的形成
在离子交换层析中，PH梯度溶液的形成是靠梯度混合仪实现的。例如，当使用阴离子 剂进行层析时，制备PH由高到低呈线性变化的梯度溶液的方法是，在梯度仪的混合室(这层析柱者)中装高PH溶液，而在另一室装低PH极限溶液，然后打开层析柱的下端出口，让洗脱液连续不断地流过柱体。这时从柱的上部到下部溶液的PH值是由高到低变化的。而在聚焦层析中，当洗脱液流进多缓冲交换剂时，由于交换剂带具有缓冲能力的电荷基团，故PH梯度溶液可以自动形成。例如，当柱中装阴离子交换剂PBE94(作固定相)时，先用起始缓冲液(配方见表了一2)平衡到PHg，再用含PH6的多缓冲剂物质(作流动相)的淋洗液通过柱体，这时多缓冲剂中酸性最强的组分与碱性阴离子交换对结合发生中和作用。随着淋洗液的不断加人，住内每点的PH值从高到低逐渐下降。照此处理J段时间，从层析柱顶部到底部就形成了PH6～9的梯度。聚焦层析柱中的PH梯度溶液是在淋洗过程中自动形成的，但是随着淋洗的进行，PH梯度会逐渐向下迁移，从底部流出液的PH却由9逐渐降至6，并最后恒定于此值，这时层析柱的PH梯度也就消失了。
2．蛋白质的行为
蛋白质所带电荷取决于它的等电点(PI)和层析柱中的PH值。当柱中的PH低于蛋白质的PI时，蛋白质带正电荷，且不与阴离于交换剂结合。而随着洗脱剂向前移动，固定相中的PH值是随着淋洗时间延长而变化的。当蛋白质移动至环境PH高于其PI时，蛋白质由带正电行变为带负电荷，并与阴离子交换剂结合。由于洗脱剂的通过，蛋白质周围的环境PH 再次低于PI时，它又带正电荷，并从交换剂解吸下来。随着洗脱液向柱底的迁移，上述过程将反复进行，于是各种蛋白质就在各自的等电点被洗下来，从而达到了分离的目的。
不同蛋白质具有不同的等电点，它们在被离子交换剂结合以前，移动之距离是不同的，洗脱出来的先后次序是按等电点排列的。

供静脉注射的25%人胎盘血白蛋白（即胎白）通常是用硫酸铵盐析法、透析脱盐、真空浓缩等工艺制备的，该工艺流程硫酸铵耗量大，能源消耗多，操作时间长，透析过程易产生污染。改用超滤工艺后，平均回收率可达97.18%；吸附损失为1.69%；透过损失为1.23%；截留率为98.77%。大幅度提高了白蛋白的产量和质量，每年可节省硫酸铵6.2吨，自来水16000吨。目前国外生产超滤膜和超滤装置最有名的厂家是美国的Milipore公司和德国的Sartorius公司。
随着现代生物技术的发展, 通过基因工程生产蛋白质药物在治疗人类面临的重大疾病如癌症等方面展示出巨大的潜力. 为满足生物技术产品工业化生产的需要, 开发高通量、低成本、高效的分离纯化方法已引起人们的高度关注. 超滤技术由于具有通量高, 操作条件温和, 易于放大等特点, 特别适合生物活性大分子的分离. 在生物技术领域, 超滤技术目前已广泛应用于细胞收集分离、除菌消毒、缓冲液置换、分级( fract ionatio n) 、脱盐及浓缩[ 1] . 近年来越来越多的研究表明, 通过选择适当的膜或膜表面改性,以及对分离过程进行优化, 充分利用和调控膜—蛋白质以及蛋白质—蛋白质之间的静电相互作用, 可以实现分子量相近的两种蛋白质的高选择性超滤分离[2- 7] .

为克服常规蛋白质超滤分离过程优化中存在的实验蛋白质消耗多、工作量大、费时以及费用高等缺点, 我们相继开发了脉冲进样技术( Pulsed sampleinject ion technique ) [8]和参数连续变化超滤技术( Parameter scanning ultraf ilt ration) [9]. 并以此为基础, 结合载体相超滤技术( Carrier phase ult rafil—t rat ion) [10]进一步提出了一种蛋白质超滤分离快速优化新方法[11], 实现了人血浆白蛋白—免疫球蛋白[12]、人源化单克隆抗体( A lemtuzumab) 单体— 二聚体[13]的超滤分离过程快速优化和高选择性分离,并在膜的筛选及其适用性快速评估方面展现出巨大的潜力. 该方法的主要特征是与AKTA Prime 系统联用, 采用脉动进样技术显著减少了蛋白质的用量;而利用双缓冲体系( 类似梯度洗脱) 的参数连续变化超滤技术, 在pH 或离子强度连续变化的情况下考查pH 或离子强度对蛋白质透过率或截留率的影响, 进一步缩短了实验时间, 降低了蛋白质的用量,极大地减少了实验量, 加快了过程优化进程; 另外,载体相超滤技术的应用则可保证超滤分离自始至终在设定的条件下进行, 从而最大限度地保证超滤过程的稳定性.
2012-02-25
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⑩ 中药口服液分离纯化主流工艺是什么

中药制剂口服液在医药行业越来越受到重视，目前在《中国药典》中收纳了数十种中药口服液，相关的生产工艺也不断的完善。但是其中除杂的工序大多数仍然采用醇沉法，离心和板框。
中药原料经过浸提和煎制后，其中存在一些无药物活性的生物大分子杂质，这些物质能影响产品的质量与稳定性。向其中加入乙醇能够影响这些物质的溶解度，使其析出沉淀，例如乙醇会改变溶剂环境的介电常数，使蛋白质的水合作用以及自身构象发生转变，去折叠，影响彼此之间的相互作用，最终导致聚集沉淀。但是醇沉法还具有一些弊端，比如造成一些有效成分损失，或残留其中影响产品质量。离心或者板框工艺，过滤精度低，制造的产品存在黑粗大的问题。
陶瓷膜是主要由氧化铝、氧化锆、氧化钛等无机金属氧化物材料经高温烧结而成的精密过滤元件，过滤精度涵盖微滤、超滤、纳滤三个范围。陶瓷膜分离技术兼具过滤、分离、浓缩的功能，又具有耐酸碱、耐高温、抗污染、易清洗、高效、节能、环保、操作简单等特点，在中药制剂领域具有独特的应用优势。
目前已有多家生产企业，将陶瓷膜技术用于中药制剂的生产，以陶瓷超滤膜作为中药制剂的除杂工艺，能够有效除去其中的蛋白、多糖等无用大分子。进而也可以采用陶瓷纳滤膜作为浓缩工艺代替传统聚合物膜。由于陶瓷膜优秀的耐高温特性，易于设备灭菌，因此膜工艺段能够保证无菌环境。