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固定化细胞工程技术处理废水实例

发布时间:2022-06-15 00:54:24

污水处理的问题

1、水量大:人均排放每天200L,工业废水比重在逐年加大;
2、水质复杂内:各种各样工业废水掺杂其中容,很难做到分类处理很难控制排污企业自觉处理,加大了废水处理难度;
3、处理难:目前水处理技术很多,但是都有适用条件和薄弱环节,往往联合使用,但是对于总氮处理,以及很多工业废水如焦化废水,至今都是世界性难题;
4、资金紧张:目前水处理还是很烧钱的工作,很多地方政府用国家补助资金建设起来,但是运行费支付不起,由于指标逐年严格,新技术成本反倒被逼的越来越高,水处理好了,但是地方政府无力维持,导致成摆设的比比皆是。
5、人才缺失:由于国内废水处理恶性竞争和官办经营,导致整个行业发展畸形,工程师技术型人才缺少发展空间,逐步流出到国外,造成技术总是落后于外国,令人惋惜。
6、小城镇技术力量薄弱:小城镇发展污水往往很多套用大城市的技术需要高层次的研究生本科生才能理解处理,所以技术层次队伍在小城镇很难找到合适人才,高级人才和高级技术工人均流入大城市。

② 固定化微生物技术应用于饮用水处理有哪些优点

固定化微生物技术是用化学或物理的手段,将游离细胞或酶定位于限定的区域,使其保持活性并可反复利用的方法。最初主要用于发酵生产,70年代后期,被用到水处理领域,近年来则成为各国学者研究的热点。固定化微生物技术克服了生物细胞太小,与水溶液分离较难,易造成2次污染的缺点,保持了效率高、稳定性强、能纯化和保持高效菌种的优点,在废水处理领域有广阔的应用前景。在实际应用过程中,如何固定、何种载体,才能使固定化微生物能较长时间的保持一定强度和活度,才能降低固化的成本,延长固定微生物的使用寿命,是该技术在污水处理中得到广泛应用的关键。文本着重介绍近年来废水处理中常用的固定化材料,及比较成熟的固定方法和影响因素。

参考---------------------------------------------------------------------------------------------

2常用固定化方法

废水处理中常用微生物固定化方法主要有:包埋法、交联法、载体结合法。

2.1包埋法

包埋法是利用线性网状结构的高分子聚合物载体的加裹作用,将游离细胞截留在形成的高分子材料内,其结构可防止细胞渗出到周围培养基中,但底物仍能渗入与细胞发生反应。包埋法操作简便,微生物本身不参与水不溶性胶网格或微胶囊的形成,活力较高,应用广泛。但包埋材料会一定程度阻碍底物和氧扩散,并对大分子底物不适用。Joshi用海藻酸钙、聚丙烯酸酯、琼脂、蛋白质等,分别包埋产苯化工厂的活性污泥用于含酚废水处理。结果表明,海藻酸钙有最大的酚降解率,能市郊降解浓度在1000mg/L以上的含酚废水,固定化污泥反复使用12次而酚降解率不变。

2.2交联法

交联法是使用双功能或多功能的试剂与酶分子进行分子间的交联固定化方法。由于酶蛋白的功能团参与此反应,所以酶的活性中心构造可能受到影响,而使酶显著失活。此外,在剂如戊二醛等价格昂贵,限制了其应用,实际常与其它方法结合。陈陶声等报道,Smiley使用苯酚甲醛树脂DuoliteDS-73141,来吸附枯草芽孢杆菌的α-淀粉酶交联,形成酶-树脂复合物,用于连续水解造纸废水中悬浮微纤维的胶态淀粉,效果很理想。

2.3吸附法

又称载体结合法,是通过物理吸附、化学或离子结合,将微生物固定于非水溶性载体。这种方法操作简单,对微生物活力影响小,但所结合的微生物量有限,反应稳定性和反复使用性差。美国宾州大学培养从活性污泥中分离出的优势菌丝孢酵母(Frichosporoncutaneum)和假单胞菌(Pseudomonasp),提取高酶活的酚氧化酶,再以化学手段结合到玻璃珠上,用于处理冶金工业酚废水,使固定酶活性可达游离细胞的90%。

3载体的选择

水处理中对载体的要求是:

1) 具有足够的机械、物理和化学稳定性;

2) 具有惰性,不能干扰生物分子的功能;

3) 具备一定的容量;

4) 价廉易得。

载体包括2大类:无机载体如多孔玻璃、硅藻土、活性炭、石英砂等;有机载体如琼脂、聚乙烯醇凝胶(PVA)、角叉莱胶、海藻酸钠、聚丙烯酰胺(ACAM)凝胶等。无机载体常用于吸附法,高质量无机载体的指标之一是有较大的表面积。无机载体常与包埋载体结合,以提高包埋载体的强度,扩大孔径,提高包埋微生物的使用效率与寿命。吸附法中微生物与载体结合不牢固,易脱落,吸附数量不多;胶联法固定微生物活性较低,很少单独使用。

本文则主要讨论常用于包埋法的载体,而包埋载体品种很多,主要在天然高分子凝胶和有机合成高分子载体2类。

3.1天然高分子载体

天然高分子载体有琼脂、海藻酸钙、角叉莱胶等,它们无生物毒性,传质性好,但强度较低,在厌氧条件下易被生物分解。琼脂凝胶有良好的惰性,但机械性能与化学稳定性差,常在碱性条件下加2,3-二溴丙醇交联,以提高其稳定性。琼脂凝胶在实际操作时应避免剧烈搅拌破坏结构,同时也应尽量避免冷冻。海藻酸盐的分子式为(C8H8O8)n,聚合度可从80到750,无毒、不易被降解,一价盐为水溶性,二价以上的为水不溶性。可形成耐热的凝胶的重要依据,实际应用中常添加其它物质以增加强度。

3.2合成有机高分子载体

合成有机高分子聚合物有ACAM、PVA、聚乙酰几丁酯、光敏聚乙烯醇等。一般强度较好,但传质性能较差,包埋后对细胞活性有影响。实际应用需注意其表面亲水性、粘度均一性和内部孔的结构。PVA因无毒、价廉、搞微生物分解和机械强度高等特点受到重视,被认为是目前最有效的固定化载体之一。但存在包埋颗粒易破碎、传质阻力大、产气上浮及活性丧失大等缺陷。实际常以PVA为主要包埋骨架,添加其它能提高包埋效果的添加剂。闵航等以PVA为主要包埋材料的混合载体,来固定厌氧活性污泥,以处理有机废水。混合载体由聚乙烯醇、0.15%海藻酸钠、2%铁粉、0.3%碳酸钙、4%二氧化硅组成。中野报道,PVA胶制备过程中,加入少量粉末活性炭可提高凝胶强度,且制成的固定细胞在进水不稳定、难降解组分突然进入处理系统的情况下,与单一PVA凝胶相比显示出优势。

3.3载体的混合使用

实际中常将几种载体混合使用,利用各自的优点以提高使用效率。Pai用含1%活性炭、4%海藻酸钙凝胶、1%湿菌体的泫藻酸钙凝胶,包埋微生物以降解苯酚废水,效果比较理想。Lin利用海藻酸钙与吸附剂(粉末活性炭)联合包埋固定Phanerochatechrysosporiun菌,用于降解五氯酚,与非固定化和单独固定化体系比较的结果表明,联合固定化体系更有效。孙艳利用添加硅藻土和用已二胺一戊二醛,对降酚菌种(以海藻酸钠包埋固定)的表面进行化学处理,使固定细胞的机械强度、降酚活性和稳定性得到了提高。陈敏提出聚乙烯醇包埋活性炭与微生物的固定化技术,并用于有机磷农药水胺硫磷的降解,结果表明固定微生物对废水温度、pH值和水胺硫磷浓度的适应范围扩大。混合载体法有效地缓解了实际固定化细胞成球难、易破碎、活性易丧失等难题。

3.4常见固定细胞载体性能比较

一些常见的固定细胞载体性能比较如表1。

表1各种固定化细胞载体的性能比较

性能
载体

琼脂
海藻酸钙
角叉莱胶
ACAM
PVA-硼酸

压缩强度(kg/cm2)
0.5
0.8
0.8
1.4
2.75

耐曝气强度

一般
一般



扩散系数(·10-6cm2/s)
/
6.8(30

③ 固定化细胞的固定化原理及方法

细胞的种类多种多样,大小和特性个不相同,故此细胞固定化的方法有很多种。归结起来,主要可以分为吸附法和包埋法两大类。 吸附法 利用各种吸附剂,将细胞吸附在其表面而使细胞固定的方法称为吸附法。
用于细胞固定化的吸附剂主要有硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃、多孔塑料、金属丝网、微载体、和中空纤维等。
酵母细胞带有负电荷,在pH3~5的条件下能够吸附在多空陶瓷、多空塑料等载体的表面,制成固定化细胞,用于酒精和啤酒等的发酵生产;在环境保护领域内使用的活性污泥中含有各种各样的微生物,这些微生物可以沉积吸附在硅藻土、多孔玻璃、多孔陶瓷、多空塑料等载体的表面,用于各种有机废水的处理,降低废水中的化学需氧量(COD)和生化需氧量(BOD);各种霉菌会长出菌丝体,这些菌丝体可以吸附缠绕在多空塑料、金属丝网等载体上用于生产有机酸和酶等;植物细胞可吸附在中空纤维外壁,用于生产色素、香精、药物和酶等次级代谢产物;动物细胞大多属于贴壁细胞,必需依附在固体表面才能正常生长,故可吸附在容器壁、微载体、中空纤维外壁等载体上,制成固定化细胞,用于各种蛋白质的生产。
2.包埋法
将细胞包埋在多空载体内部而制成固定化细胞的方法称为包埋法。包埋法可分为凝胶包埋法和半透膜包埋法。
凝胶包埋法是应用最广泛的细胞固定方法。

④ 举例说明人类在治理环境污染方面的做法

我国生态环境现状
目前我国由于工业“三废”污染、农用化肥和农药的污染以及废弃塑料和农用地膜的污染,严重的影响了我国的生态环境,使得水污染日益加剧,水资源严重短缺,全国600多个城市中已有一半城市缺水,农村则有8000万人和6000万头牲畜饮水困难;土壤污染严重,耕地面积锐减,近10年来每年流失的土壤总量达50亿t,土地荒漠化日益加剧;森林覆盖面积下降,草场退化,每年减少森林面积达2500万亩;人们的身体健康受到严重威胁,疾病发病率急剧上升。因此,加大环境保护和环境治理力度,加快应用高新技术,如现代生物技术来控制环境污染和保持生态平衡,提高环境质量已成为环保工作者的工作重点。
2现代生物技术与环境保护
现代生物技术是以DNA分子技术为基础,包括微生物工程,细胞工程,酶工程,基因工程等一系列生物高新技术的总称。现代生物技术不仅在农作物改良、医药研究、食品工程方面发挥着重要作用,而且也随着日益突出的环境问题在治理污染、环境生物监测等方面发挥着重要的作用。自20世纪80年代以来生物技术作为一种高新技术,已普遍受到世界各国和民间研究机构的高度重视,发展十分迅猛。与传统方法比较,生物治理方法具有许多优点。
(1)生物技术处理垃圾废弃物是降解破坏污染物的分子结构,降解的产物以及副产物,大都是可以被生物重新利用的,有助于把人类活动产生的环境污染减轻到最小程度,这样既做到一劳永逸,不留下长期污染问题,同时也对垃圾废弃物进行了资源化利用。
(2)利用发酵工程技术处理污染物质,最终转化产物大都是无毒无害的稳定物质,如二氧化碳、水、氮气和甲烷气体等,常常是一步到位,避免污染物的多次转移而造成重复污染,因此生物技术是一种既安全又彻底消除污染的手段。
(3)生物技术是以酶促反应为基础的生物化学过程,而作为生物催化剂的酶是一种活性蛋白质,其反应过程是在常温常压和接近中性的条件下进行的,所以大多数生物治理技术可以就地实施,而且不影响其他作业的正常进行,与常常需要高温高压的化工过程比较,反应条件大大简化,具有设备简单、成本低廉、效果好、过程稳定、操作简便等优点。
所以,当今生物技术已广泛应用于环境监测、工业清洁生产、工业废弃物和城市生活垃圾的处理,有毒有害物质的无害化处理等各个方面。
3现代生物技术在环境保护中的应用
3.1污水的生物净化
污水中的有毒物质的成分十分复杂,包括各种酚类、氰化物、重金属、有机磷、有机汞、有机酸、醛、醇及蛋白质等等。微生物通过自身的生命活动可以解除污水的毒害作用,从而使污水中的有毒物质转化为有益的无毒物质,使污水得到净化。当今固定化酶和固定化细胞技术处理污水就是生物净化污水的方法之一。固定化酶和固定化细胞技术是酶工程技术。固定化酶又称水不溶性酶,是通过物理吸附法或化学键合法使水溶性酶和固态的不溶性载体相结合,将酶变成不溶于水但仍保留催化活性的衍生物,微生物细胞是一个天然的固定化酶反应器,用制备固定化酶的方法直接将微生物细胞固定,即是可催化一系列生化反应的固定化细胞。运用固定化酶和固定化细胞可以高效处理废水中的有机污染物、无机金属毒物等,此方面国内外成功的例子很多,如德国将能降解对硫磷等9种农药的酶,以共介结合法固定于多孔玻璃及硅珠上,制成酶柱,用于处理对硫磷废水,去除率达95%以上;近几年我国在应用固定化细胞技术降解合成洗涤剂中的表面活性剂直链烷基苯磺酸钠(LAS)方面取得较大进展,对于含100mg/L废水,降解率和酶活性保存率均在90%以上;利用固定化酵母细胞降解含酚废水也已实际应用于废水处理。
望采纳。

⑤ 生物技术在水污染治理方面的应用有哪些

生物技术的研究方向:

生物净化
污水中的有毒物质包括各种酚类、氰化物、重金属、有机磷、有机汞、有机酸、醛、醇及蛋白质等等。微生物通过自身的生命活动可以解除污水的毒害作用,从而使污水中的有毒物质转化为有益的无毒物质,使污水得到净化。当今固定化酶和固定化细胞技术处理污水就是生物净化污水的方法之一,固定化酶和固定化细胞技术是酶工程技术。固定化酶又称水不溶性酶,是通过物理吸附法或化学键合法使水溶性酶和固态的不溶性载体相结合,将酶变成不溶于水但仍保留催化活性的衍生物,微生物细胞是一个天然的固定化酶反应器,用制备固定化酶的方法直接将微生物细胞固定,即可催化一系列生化反应的固定化细胞。运用固定化酶和固定化细胞可以高效处理废水中的有机污染物、无机金属毒物等,此方面国内外成功的例子很多。近几年我国在应用固定化细胞技术降解合成洗涤剂中的表面活性剂直链烷基苯磺酸钠(LAS)方面取得较大进展,对于含100mg/L废水,降解率和酶活性保存率均在90%以上;利用固定化酵母细胞降解含酚的废水也已实际应用于废水处理。

生物修复
重金属污染是造成土壤污染的主要污染物。重金属污染的生物修复是利用生物(主要是微生物、植物)作用,削减、净化土壤中重金属或降低重金属的毒性。其原理是:通过生物作用(如酶促反应)改变重金属在土壤中的化学形态,使重金属固定或解毒,降低其在土壤环境中的移动性和生物可利用性,通过生物吸收、代谢达到对重金属的削减、净化与固定作用。污染土壤的生物修复过程可以增加土壤有机质的含量,激发微生物的活性,由此可以改善土壤的生态结构,这将有助于土壤的固定,遏制风蚀、水蚀等作用,防止水土流失。

白色污染
废弃塑料和农用地膜经久不化解,估计是形成环境污染的重要成分。利用生物工程技术一方面可以广泛地分离筛选能够降解塑料和农膜的优势微生物、构建高效降解菌,另一方面可以分离克隆降解基因并将该基因导入某一土壤微生物(如:根瘤菌)中,使两者同时发挥各自的作用,将塑料和农膜迅速降解。

化学农药
利用微生物降解农药已成为消除农药对环境污染的一个重要方面。能降解农药的微生物,有的是通过矿化作用将农药逐渐分解成终产物CO 和H O,这种降解途径彻底,一般不会带来副作用;有的是通过共代谢作用,将农药转化为可代谢的中间产物,从而从环境中消除残留农药,这种途径的降解结果比较复杂,有正面效应也有负面效应。为了避免负面效应,就需要用基因工程的方法对已知有降解农药作用的微生物进行改造,改变其生化反应途径,以希望获得最佳的降解、除毒效果。要想彻底消除化学农药的污染,最好全面推广生物农药。

⑥ 使用生物技术方法的废水处理

生物强化技术的主要特点 生物强化技术是一种利用生物治理废水的高效技术,在废水治理中具有广阔的应用前景。与传统的活性污泥法相比,生物强化技术更体现出易于操作、针对性强等优点,这种废水处理技术主要研究并投放特殊菌种进入污水,通过其新陈代谢,将分解并吸收废水中的一些物质,净化污水,具有明显的低成本、高效率等特点,所以在近期成为废水处理领域的重要研究方向。 首先来看其技术原理。所谓生物强化技术,就是以生物制住生物,以菌制菌,向自然菌群中投入特殊的微生物以增强生物力量,并对污水等特定环境或特殊污染物加以反应。按投入菌种与底质之间的不同作用,可分为直接作用与共代谢作用两种方式。 其中,直接作用是以驯化、筛选、诱变、基因重组等一系列关键技术的实施,获得一批以污水为主要能源的微生物,然后复制投入一定数量,对目标物质进行降解,达到去除污染的目标,这种技术方法使用的菌株大多通过质粒育种和基因工程获取。共代谢作用则是针对废水中的一些有害物质,在一定条件下降解,改变其化学结构,从而降低物质的有害性,主要包括菌株通过新陈代谢将二级基质共同氧化、不同微生物之间的协同作用、休眠细胞对污染物降解等三种类型。这三种类型所采取的原理有所不同,例如不同微生物协同,是因为有些污染物的降解必须以两种甚至多种微生物共同作用才能完成,通过几种微生物的交替作用,微生物制造氧化物,然后氧化物再被另一种微生物降解,多次作用后彻底消除污染物。再如休眠细胞降解,由于处于休眠状态的微生物在含有不同有机物的污水中会产生不同的酶,在一定条件下可以相互作用,降解废水中的不同有机物。 其次来看其应用。生物强化技术作用用于焦化废水、印染废水和制药废水等几个领域。焦化废水因成分复杂,无机物和有机物的种类多,被列为难以降解工业废水,一般通过投放高效菌种,以固定化、高效降解微生物法等强化技术来进行处理。而印染废水中的有机物含量非常大,以前采用生物膜法来处理,无法有效去除其中的有机物,通过应用高效脱氧色菌和pva降解菌,加快生物膜的形成速度,稳定性好,效率高。对于制药废水,近年通常以混合菌种加以处理,并得到广泛推广。因为混合菌比单一菌种具备更强的降解能力,降解速度和降解效率明显提升,并且在稳定性和抑制其他杂菌生长等方面有大幅改善,这些特性单靠单一菌种根本无法完成。 总的说来,由于成本低廉、操作简单、效率较高,生物技术在污水处理领域不断得到推广,并取得显著效果。随着对生物膜法和生物强化等生物技术的深入研究,发展出越来越多污水处理技术,成本降低和效益提升日渐突出,我们只有不断吸收国际上先进的生物技术信息,勇于创新,敢于实践,才能逐渐提高国内污水处理的系统性水平

⑦ 细胞培养工程废水怎么处理

这些都先要处理的。水里不同物质含量有着不同处理工艺。您这样笼统问。真的没办法回答您。您要给我一个水利物质含量的数据。我才能给您一份准确处理方案。

⑧ 固定化微藻细胞处理废水时怎样得到均一的小球藻

你只能将微藻分离纯化,就是不断涂布分离,取藻液稀释N倍涂布,选出单一小球藻菌落再划线。

⑨ 对于水污染的处理方法主要有哪几种

一、生物治理

生物净化是外环境治理的重要手段,它是一种符合我国国情的水污染治理方法。

由于地球上到处都有能参与净化活动的生物种类,它们通过自身特有的新陈代谢活动,吸收、积累、分解、转化污染物,降低污染物浓度,使有毒物变为无毒,最终达到水排放标准。因此利用生物净化污水受到人们的重视。

生物治理的种类包括:沉淀处理法;水生生物养殖法;生物称定塘法;活性污泥法;生物膜法;生物接触权化法;土地处理系统;固定化细胞法

二、物理治理

物理治理水污染有多种方法,主要包括膜工程法,吸附法。其中,吸附法由于具有多样性、高效、易于处理,可重复利用,而且可以实现低成本而最受重视。活性炭是现在用得最广泛的吸附剂,主要用来吸附有机物,也可以用来吸附重金属,但价格比较昂贵。

壳聚糖作为一种生物吸附剂,可以在不同的环境中分别吸附重金属阳离子和有害阴离子。骨碳、铝盐、铁盐以及稀土类吸附剂都是有害阴离子的有效吸附剂。稻壳、改性淀粉、羊毛、改性膨润土等都可以用来吸附重金属阳离子。

随着水质的日益复杂和科技的进步,水处理用的吸附剂不仅要求高效,还要廉价,而纤维素作为世界上最丰富的可再生聚合物资源,非常廉价,可以成为理想的吸附剂基体材料。

三、化学治理

利用化学反应的作用,通过改变污染物的性质降低其危害性或有使污染物的分离除去。包括向各类废水中投加各类絮凝剂,使之与水中的污染物起化学反应,生成不溶于水或难溶于水的化合物,析出沉淀,使废水得到净化的化学沉淀法;使用中和作用处理酸性或碱性废水的中和法;

使用液氯、臭氧等强氧化剂氧化分解废水中污染物的化学氧化法;使用电解的原理,在阴阳两极分别发生氧化和还原反应,使水质达到净化的电解法等。

(9)固定化细胞工程技术处理废水实例扩展阅读:

现代污水处理技术,按处理程度可分为以下等级:

1、一级处理

主要去除污水中呈悬浮状态的固体污染物质,物理处理法大部分只能完成一级处理的要求。经过一级处理的污水,BOD一般可去除30%左右,达不到排放标准。一级处理属于二级处理的预处理。

2、二级处理

主要去除污水中呈胶体和溶解状态的有机污染物质(BOD,COD物质),去除率可达90%以上,使有机污染物达到排放标准,悬浮物去除率达95%出水效果好。

3、三级处理

进一步处理难降解的有机物、氮和磷等能够导致水体富营养化的可溶性无机物等。主要方法有生物脱氮除磷法,混凝沉淀法,砂滤法,活性炭吸附法,离子交换法和电渗析法等。

⑩ 微生物细胞的固定方法有哪些常用的是哪种

微生物细胞的固定方法有主要有物理吸附法和包埋法两种.
1.物理吸附法
带电的微生物细胞和载体之间的静电相互作用,使细胞体吸附固定在硅藻土、木材、玻璃、陶瓷和塑料等载体上.如酵母细胞是带负电的,在固定时要选择带正电的载体.在PH4时,热带假丝酵母、酿酒酵母等在陶瓷表面上的吸附程度较大,载体表面的40~70%被细胞牢固吸附,不会被高流培养液冲掉.载体的性质也影响细胞与载体之间的相互作用,主要是载体的成分、表面电荷、表面积和PH的影响.所有的玻璃和陶瓷都是由不同比例的氧化硅、氧化镁等组成,如将玻璃等放在溶液中,在它的表面会发生离子交换,形成不再是铝、硅等的氧化物,而为相应的氢氧化物.载体表面的羟基可被微生物细胞表面的氨基或羧基所取代,在细胞与载体之间形成键.物理吸附法固定化活细胞的酶活性不受影响,但吸附过程相当复杂,吸附过程与微生物的性质、载体的特性及细胞与载体之间发生的相互作用有关,只有这些参数配合恰当时才能形成稳定的微生物细胞-载体复合物.
物理吸附法固定微生物细胞现已广泛用于废水处理工程——生物膜法,中国科学院微生物研究所应用自养菌和异养菌的混合菌,吸附于玻璃钢蜂窝填料繁殖成生物膜,用以处理含硫氰酸钠的腈纶废水.北京工业大学应用驯化的混合菌吸附于活性炭的大孔及其表面,用以处理印染废水等.
2.包埋法
将微生物细胞用物理的方法包埋在琼脂、海藻酸钠、明胶、聚丙烯酰胺和聚乙烯醇(PVA)等凝胶载体内,使微生物细胞固定化.一般的包埋成形法比较复杂、机械性能差、易磨损、不适于大批量生产.因而近年来一些学者又研究了一种制备珠型固定化细胞技术.
1)琼脂凝胶包埋法,称取4g琼脂或琼脂糖溶于50ml 0.2M pH7.0磷酸缓冲液中,加热溶解后,冷却到55℃左右,将细胞浓度为60%左右细菌悬浮液于40℃下保温,然后与琼脂溶液混合均匀.用注射器针头将热的混合液滴入冷的甲苯溶液,四氯乙烯溶液或液体石腊内,冷却形成2~3mm直径的小球.或将热琼脂-细菌混合液流加到搅拌下的500ml30℃的醋酸丁酯中,加完后继续搅拌3分钟,到混合物分散成小滴,迅速加入300ml冷的醋酸丁酯,再搅拌2~5分钟,倾去醋酸丁酯,抽滤干,用缓冲液洗至无醋丁酯味,即制成珠型固定化细胞,小珠约在1~3mm.使用前将球形固定化细胞放入消毒好营养液中30℃活化24小时后再用.

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