1. 还原糖的测定方法有哪几种
总糖:主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖(水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖),麦芽糖(水解后为2分子葡萄糖)以及可能部分水解的淀粉(水解后为2分子葡萄糖)。 还原糖:在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都是还原糖。还原性糖包括所有单糖(除二羟丙酮)、乳糖、麦芽糖等。非还原性糖有蔗糖、淀粉、纤维素等,但它们都可以通过水解生成相应的还原性单糖。 分光光度计:分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为:(1)200,400nm的紫外光区(2)400,760nm的可见光区,(3)2.5,25μm(按波数计为4000cm<-1>,400cm<-1>)的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比。糖含量的检测方法
2. 直接滴定法测总糖的方法和计算公式是怎样的
总糖的测定(直接滴定法)
滴定, 蒸馏水, 葡萄糖, 酒石酸, 试剂
斐林氏试剂
甲液:称取15g硫酸铜(CuSO4·5H2O)及0.05g次甲基兰,用蒸馏水溶解。移入1000mL棕色容量瓶中,用蒸馏水定容。
乙液:称取50g酒石酸钾钠,75g氢氧化钠及4g亚铁氰化钾,用蒸馏水溶解,移入1000mL容量瓶中,用蒸馏水定容。
斐林氏溶液的标定:吸取斐林氏甲液和乙液各5mL于150mL三角瓶中加水10ml,从滴定管中滴加约9.5mL葡萄糖标准溶液控制在2min内加热至沸,趁沸以1滴/2s的速度滴加葡萄糖标准溶液。滴定至蓝色退尽为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。同时平行操作三份,取其平均值计算第10mL(甲乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(mg)。
A=W*V/1000
式中:
A——10ml斐林氏甲乙液,相当于葡萄糖克数,g;
W——称取葡萄糖克数,g;
V——滴定时所消耗葡萄糖的毫升数,mL;
1000——葡萄糖的稀释倍数。
3. 测定糖类的主要方法有哪些
4种糖的测定方法
总结:
1、 直接滴定法。
原理为 糖还原天蓝色的氢氧化铜为红色的氧化亚铜。缺点:水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响。
2、 高锰酸钾滴定法。
所用原理同直接滴定法。缺点:水样中的还原性物质能对糖的测定造成影响,过程较为复杂,误差大。
3、硫酸苯酚法。
糖在浓硫酸作用下,脱水形成的糠醛和羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10-100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比,且在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方法简单,灵敏度高,实验时基本不受蛋白质存在的影响,并且产生的颜色稳定160min以上。
缺点:如果水样呈橙红色(大部分水样为黄色),会对比色法造成较大的干扰。
4、蒽酮法
糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛和羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,故可用于糖的测定。
缺点:,不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同,果糖显色最深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖较浅,五碳糖显色更浅。
综合比较;采用蒽酮法能将最为准确地测定尾水中糖的含量。
4. 测定总糖的各种方法的优缺点
实验原理还原糖与斐林试剂发生作用,可以生成砖红色沉淀。试剂斐林试剂(主要由质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成)实验材料准备植物组织是常用的实验材料,但必须加以选择。
5. 还原糖总糖测定实验中哪些步骤是影响实验结果的关键步骤
用斐林试剂水浴加热出现砖红色沉淀,水浴加热是关键
6. 果脯的总糖的测定与注意事项
1)先看一下蜜饯产品标准对糖含量及其测定方法要求.
2)用GB/T5009.34-2003方法中第二法蒸馏法试试。注意标准溶液的浓度一定要准确。
7. 如何分别测定样品中的乳糖,蔗糖和总糖
方法二 乳糖、蔗糖和总糖的测定(莱因-埃农氏法) 9 方法提要 乳糖:样品经除去蛋白质以后,在加热条件下,直接滴定已标定过的费林氏液,样液中的乳糖将费林氏液中的二价铜 还原为氧化亚铜。以次甲基蓝为指示剂,以终点稍过量时,乳糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基 蓝。根据样液消耗的体积,计算乳糖含量。 蔗糖:样品除去蛋白质后,其中蔗糖经盐酸水解转化为具有还原能力的葡萄糖和果糖,再按还原糖测定。将水解前后 转化糖的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。 总糖:乳糖和蔗糖之和。 10 试剂 所有试剂,如未注明规格,均指分析纯;所有实验用水,如未注明其他要求,均指三级水。 10.1 费林氏液(甲液和乙液) 10.1.1 甲液:取34.639g硫酸铜,溶于水中,加入0.5mL浓硫酸,加水至500mL。 10.1.2 乙液:取173g酒石酸钾钠及50g氢氧化钠溶解于水中,稀释至500mL,静置两天后过滤。 10.2 次甲基蓝溶液:10g/L。 10.3 盐酸溶液:体积比1:1。 10.4 酚酞溶液:0.5g酚酞溶液于75mL体积分数为95%的乙醇中,并加入20mL水,然后再加入约0.1mol/L的氢氧化钠 溶液,直到加入一滴立即变成粉红色,再加入水定容至100mL。 10.5 氢氧化钠溶液:c(NaOH)为300g/L。取300g氢氧化钠,溶于1000mL水中。 10.6 乙酸铅溶液:c(PbAc 2 )为200g/L。取20g乙酸铅,溶解于100mL水中。 10.7 草酸钾-磷酸氢二钠溶液:取草酸钾3g,磷酸氢二钠7g,溶解于100mL水中。 11 仪器 :常用理化实验室仪器。 12 操作步骤及结果计算 12.1 费林氏液的标定 12.1.1 用乳糖标定 12.1.1.1 称取预先在92~94℃烘箱中干燥2h,乳糖标样约0.75g(准确至0.2mg),用水溶解并稀释至250mL。将 此乳糖溶液注入一个50mL滴定管中,待滴定。 12.1.1.2 预滴定:取10mL费林氏液(甲、乙液各5mL)于250mL三角烧瓶中。再加入20mL蒸馏水,从滴定管中放出 15mL乳糖溶液于三角瓶中,置于电炉上加热,使其在2min内沸腾,沸腾后关小火焰,保持沸腾状态15s,加入3滴次甲 基蓝溶液(10.2),继续滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止,读取所用乳糖 的毫升数。 12.1.1.3 精确滴定:另取10mL费林氏液(甲、乙液各5mL)于250mL三角烧瓶中,再加入20mL蒸馏水,一次加入比 预备滴定量少0.5~1.0mL的乳糖溶液,置于电炉上,使其在2min内沸腾,沸腾后关小火焰,维持沸腾状态2min,加入 3滴次甲基蓝溶液,然后继续滴入乳糖溶液(一滴一滴徐徐滴入),待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算 的依据(在同时测定蔗糖时,此即为转化前滴定量)。 12.1.1.4 按式(2)、(3)计算乳糖测定时,费林氏液的乳糖校正值(f 1 ): V 1 ——滴定时消耗乳糖液量,mL; m 1 ——称取乳糖的质量,g; AL 1 ——由乳糖液滴定毫升数查表1所得的乳糖数,mg。 表1 乳糖及转化糖因数表(10mL费林氏液) 12.1.2 用蔗糖标定 12.1.2.1 称取在105℃烘箱中干燥2h的蔗糖约0.2g(准确到0.2mg),用50mL水溶解并洗入100mL容量瓶中,加水 10mL,再加入10mL盐酸(10.3),置75℃水浴锅中,时时摇动,在2min30s至2min45s之间,使瓶内温度升至67℃。 自达到67℃后继续在水浴中保持5min,于此时间内使其温度升至69.5℃,取出,用冷水冷却,当瓶内温度冷却至35℃ 时,加2滴甲基红指示剂(10.4),用300g/L的氢氧化钠(10.5)中和至呈中性。冷却至20℃,用水稀释至刻度,摇 匀。并在此温度下保温30min后再按12.1.1.2和12.1.1.3操作。得出滴定10mL费林氏液所消耗的转化糖量。 12.1.2.2 按式(4)、(5)计算蔗糖测定时,费林氏液的蔗糖校正值(f 2 ): V 2 ——滴定时消耗蔗糖液量,mL; m 2 ——称取蔗糖的质量,g; AL 2 ——由蔗糖液滴定毫升数查表1所得的转化糖数,mg。 12.2 乳糖的测定 12.2.1 样品处理 12.2.1.1 称取2.5~3g样品(准确至0.01g),用100mL水分数次溶解并洗入250mL容量瓶中。 12.2.1.2 加4mL乙酸铅(10.6)、4mL草酸钾-磷酸氢二钠溶液,每次加入试剂时都要徐徐加入,并摇动容量瓶, 用水稀释至刻度。静止数分钟,用干燥滤过滤,弃去最初25mL滤液后,所得滤液作滴定用。 12.2.2 滴定 12.2.2.1 预滴定:将此滤液注入一个50mL滴定管中,待测定。取10mL费林氏液(甲、乙液各5mL)于250mL三角烧 瓶中,再加入20mL蒸馏水,置于电炉上加热,使其在2min内沸腾,沸腾后关小火焰,保持沸腾状态15s,加入3滴次甲 基蓝(10.2),然后徐徐滴入乳糖溶液至蓝色完全褪尽为止,读取所用乳糖的毫升数。 12.2.2.2 精确滴定:另取10mL费林氏液(甲、乙各5mL)于250mL三角烧瓶中,再加入20mL蒸馏水,一次加入比预 备0.5~1.0mL的乳糖溶液,置于电炉上,使其在2min内沸腾,沸腾后关小火焰,维持沸腾状态2min,加入3滴次甲基 蓝溶液,然后一滴一滴徐徐滴入乳糖溶液,待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算的依据(在同时测定蔗糖 时,此即为转化后滴定量)。 12.2.3 乳糖含量的计算 式中:L——样品中乳糖的质量分数,g/100g; F 1 ——由消耗样液的毫升数查表1所得乳糖数,mg; f 1 ——费林氏液乳糖校正值; V 1 ——滴定消耗滤液量,mL; m——样品的质量,g。 12.3 蔗糖的测定 12.3.1 转化前转化糖量的计算 利用测定乳糖时的滴定时,自表1中查出相对应的转化糖量,按式(7)计算: 式中:F 2 ——由测定乳糖时消耗样液的毫升数查表1所得乳糖数,mg; f 2 ——费林氏液蔗糖校正值; V 1 ——滴定消耗滤液量,mL; m——样品的质量,g。 12.3.2 样液的转化及滴定 取50mL样液于100mL容量瓶中,加水10mL,再加入10mL的盐酸(10.3),置75℃水浴锅中,时时摇动,在2min30s至2min45s 之间,使瓶内温度升至67℃。自达至67℃后继续在水浴中保持5min,于此时间内使其温度升至69.5℃,取出,用冷水 冷却,当瓶内温度冷却至35℃时,加2滴酚酞溶液剂(10.4),用氢氧化钠(10.5)中和至呈中性,冷却至20℃,用 水稀释至刻度,摇匀。并在此温度下保温30min后再按12.2.2滴定,得出滴定10mL费林氏液所消耗的转化液量。 式中:F 3 ——由V2 2 1查得转化糖数,mg; f 2 ——费林氏液蔗糖校正值; m——样品的质量,g; V 1 ——滴定消耗转化液量,mL。 12.3.3 蔗糖含量的计算 式中:L 1 ——转化后转化糖的质量分数,%; L 2 ——转化前转化糖的质量分数,%。 12.3.4 若样品中乳糖与蔗糖之比超过3:1时,则计算乳糖时应在滴定量中加上表2中的校正值数后再查表1和计算。 12.3.5 总糖=蔗糖+乳糖 13 允许差 13.1 重复性 :由同一分析人员在短时间间隔内测定的两个结果之间的差值,不应超过结果平均值的1.5%。 13.2 重现性 :由不同实验室的两个分析人员对同一样品测得的两个结果之差,不应超过结果平均值的2.5%。 表2 乳糖滴定量校正值数 方法三 蔗糖的测定——(酶比色法) 同GB/T 16286。
8. 如何快速测定还原糖和总糖
DNS检测的是还原性糖,严格的说是还原末端,如果水解不充分,没有完全暴露还原末端,DNS法测出来的当然小了。
如果你大概知道糖的成分的话,旋光法是可以测的。
如果你不知道成分的话,蒽铜比色法可以用来测总糖,因为不受还原末端多少的影响。
9. 测定葡萄糖中的总糖,用GB/T 15038-2006的方法好像测不准,为什么
GB/T 15038-2006 葡萄酒、果酒通用分析方法 863KB
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10. 可溶性糖含量的测定方法有哪些
1、苯酚法
苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方法简单,灵敏度高,基本不受蛋白质存在的影响,并且产生的颜色稳定160min以上。
2、蒽酮比色法
一个快速而简便的定糖方法。蒽酮可以与游离的己糖或多糖中的己糖基、戊糖基及己糖醛酸起反应,反应后溶液呈蓝绿色,在620nm处有最大吸收。本法多用于测定糖原的含量,也可用于测定葡萄糖的含量。
(10)国标废水中总糖的测定方法扩展阅读
1、苯酚法测定可溶性糖的原理是:糖在浓硫酸作用下,脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物,在10~100ug范围内其颜色深浅与糖的含量成正比,且在485nm波长下有最大吸收峰,故可用比色法在此波长下测定。
2、蒽酮比色法实验原理:蒽酮可以与游离的已糖或多糖中的已糖基、戊糖 基及已糖醛酸起反应,反应后溶液呈蓝绿色,在620nm处有最大吸收。