A. 求污水处理厂的粪大肠菌群数的测定方法,详细的,包括操作细节的注意事项书上写的太宽泛了,初次做不理
如果用多管发酵法,主要是稀释度的问题,就是每五根管子一个浓度,稀释的时候要逐级稀释。
B. 粪大肠菌群对于不同水质检测方法一样吗
应该说原理是一样的,但是,不同水质因为粪大肠菌群的含量不一样,需要视回情况增加或减少稀释度答,才能恰当地判断出其含量。如果因为对稀释度判断得不好,所接种的发酵管全部发酵,那么也只能报告大于等于多少,或者重新采样了。
C. 关于水中粪大肠菌群数的测定
1.管的规划不定,最好是带盖子的10-50ml的玻璃管,一般要最少做5个平行。
2.培养基都可以自己配的,建议用简单的lb培养基即可,药品为蛋白胨和nacl(固体用agar)。
3.塞子或盖子都可以,但一定要加。
4.需要超净台、高压灭菌锅、调温摇床这些必备仪器。
粪大肠菌群是生长于人和温血动物肠道中的一组肠道细菌,随粪便排出体外,约占粪便干重的1/3以上,故称为粪大肠菌群。粪大肠菌群不是细菌学上分类命名,而是根据卫生学方面的需要,而设定的一类与粪便污染有关的一组细菌,是能在44.5℃24h内发酵乳糖产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。粪大肠菌群为一群需氧及兼性厌氧的菌群,呈革兰氏阴性反应,能在普通培养基上生长繁殖;其生化活动能力较强,能发酵多种糖类,产酸产气,其特点是能较快发酵乳糖,粪大肠菌群在乳糖培养基中于.37℃下进行培养,在24h内能使乳糖发酵产酸,还有甲酸解氢酶进行分解甲酸,生成氢气和二氧化碳,产生大量气体,这时,若加入伊红美兰指示剂,分解乳糖所产生的酸(带阳电荷)与伊红相染呈紫色且有金属光泽,故常用此特性来鉴定识别粪大肠菌群。
具体操作如下:
(1)发酵(产酸产气)试验
将试样液以无菌接种于双倍乳糖胆盐发酵管(其内放有倒置的小玻璃管,以收集气体)内,置44'e培养箱中培养24—48h,由于乳糖胆盐培养基是一种具有选择作用的培养基,其中胆盐具有抑制革兰氏阳性菌的作用,若观察到发酵管内不产酸(有酚红指示剂指示)不产气,则报告试样为粪大肠菌群阴性,未检出,检测结束。
若发酵管内产酸产气,则继续进行下列检测。
(2)鉴别培养
将有产酸产气的发酵管内试样培养液接种到伊红美兰琼脂培养基平皿上,置37℃培养18~24h;同时将该培养液接种到蛋白胨水中,置44℃培养24h。
(3)验证实验
菌落观察:在上述平皿培养基上,仔细观察菌落生长情况:大肠菌群在伊红美兰琼脂培养基上其典型菌落是呈深紫色、圆形、边缘整齐、表面光滑、湿润、常具有金属光泽,或呈紫黑色不带或略带金属光泽及粉紫色,中心较深的菌落。
革兰氏染色、镜检:将以上典型的(或近似的)大肠菌群菌落进行革兰氏染色、镜检,若革兰氏染色呈阳性(紫色)反应,则报告粪大肠菌群呈阴性,未检出。若革兰氏染色呈阴性,检测还需进行下一试验,以待进一步证实。
靛基质试验(吲哚试验):对前已培养好的蛋白胨水中,滴人靛基质试剂(对二甲基氨基苯甲醛试剂),进行靛基质反应,若液面呈玫瑰红色,呈阳性反应,则报告粪大肠菌群呈阳性,检出;若液面仍是棕黄色,则报告粪大肠菌群呈阴性,未检出。
(4)检测程序
将上述检测粪大肠菌群的操作步骤可归结为以下程序图示。
(5)检验报告
当发酵管内产酸产气,观察试液平皿上为典型粪大肠菌群菌落,并经革兰氏染色、检镜试验为阴性(—)及靛基质试验为阳性,则报告该试液经检测检出粪大肠菌群。其他结果均为未检出粪大肠菌群。
D. 废水中粪大肠菌群的标准是多少啊
我国废水排放标准的粪大肠指标为1000个/升。国家规定“粪大肠菌群数”一级排放A标准为10³个/L,一级排放A标准为10^4个/L,二级排放标准为10^4个/L.三级不做规定。
(4)生活污水中需要测粪大肠菌群吗扩展阅读:
检验注意事项
(1)将接种好的样品放人恒温水浴箱或隔水式恒温培养箱时,箱内温度一定要求达到所要求的温度(44±1℃)时,方可放入。如用恒温水浴箱其水面要高于接种物面,放滤膜的培养皿要沉到水浴箱底部。
(2)MFC培养基中苯胺蓝的纯度和质量往往影响菌落的颜色,根据试验结果用进口苯胺蓝加O.1g,用国产苯胺蓝加0.2g,培养出的粪大肠菌菌落颜色较典型。但国产苯胺蓝的性能是否同样稳定尚不能肯定。因此,制好的培养基在使用前,最好先接种典型粪大肠菌,以观察对比菌落的颜色。
玫红酸高压后会分解,配好的试液应在2-lO℃保存不超过2周,如颜色由暗红变成棕色沉淀时应弃去。如杂菌污染少,且加与不加玫红酸对菌落计数无影响时,可不加。.
(3)在滤膜上生长的菌落除挑取蓝色菌落外,浅蓝色菌落或浅蓝色中心较深的菌落也应挑取。
(4)生活饮用水通常都是经氯处理消毒的,水中含有一定量的余氯,使大肠菌群处于受损或受抑制状态,在采集水样时应加硫代硫酸钠脱氯,使此受损的细菌得以复苏与修复,从而避免计数结果偏低甚至假阴性出现。
(5)采样后水样的正确保存很重要,如保存不当可使检样中的大肠菌群细菌死亡或在一定条件下再生长,这些都将影响检验结果的准确性。检验室接到水样后,应立即检验。如因故不能检验时,应立即置于冰箱内并于2小时内检验。
关于水样储存时间与温度对大肠菌群数的影响,Lonsans等报告认为水样中大肠菌群数不多时,则冰箱保存与室温保存相差不大;如水样中菌数多时,则在室温(23-39.5℃)内保存比在冰箱(0-1O℃)中保存菌数的减少速度快。
参考资料来源:
网络-粪大肠菌
E. 水中粪大肠菌群的测定
化妆品检测项目中粪大肠菌群的检测流程:
10g/mL样品+90mL灭菌生理盐水 →10mL+10mL双倍乳糖胆(含中和剂)培养基→粪大肠菌群 44.5℃,48h培养
注:在化妆品检测项目中,如果样品含有油脂性的成分,如精油,在样品前处理中需加入液体石蜡、吐温80、生理盐水进行均质,使样品能够均匀分散开来。
粪大肠菌群又是一个什么样的微生物呢?下面我们来详细介绍下:
大肠菌群:大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。
定义(GB2010):在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。
粪大肠菌群:大肠菌群的一种,又称耐热大肠菌群,培养温度:44.5±0.5℃,粪大肠菌群是化妆品检测项目中必检的微生物项目。
大肠埃希氏菌:((Escherichia. coli )通常称为大肠杆菌。根据不同的生物学特性将致病性大肠杆菌分为5类:
致病性大肠杆菌(EPEC)、
肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、
肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、
肠出血性大肠杆菌(EHEC)、
肠黏附性大肠杆菌(EAEC)。
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F. 粪大肠菌群测定的环境要求
粪大肠菌群是大肠菌群中比较特别的一类,其特点是能在44.5℃能发酵乳糖、产酸产气的一类版革兰权氏阴性、耐受胆盐、无芽胞杆菌。(现在国家标准中改叫耐热大肠菌群)
因此接种于EC肉汤和最后一步证实试验,需要44.5℃环境进行培养。
G. 生活污水粪大肠菌群有多少
生活污水粪大肠菌群数的日最高允许排放浓度为一级A标的10^3以及一级B和二级标准版的10^4,单位(个/L),三级权标准没有要求。原废水中的粪大肠菌群数为多少需要具体水样化验测得,化验个体不同,所测值也不同,没有固定值。
H. 请问,谁知道典型生活污水大肠菌群的数量,最好是小区污水的。谢谢
粪大肠菌群:生活污水处理厂进水10^6数量级,那么粪便污水估计再提高一个数量级
I. 废水中含有粪大肠菌群+是否可以认定为含病原体污水
怎么认定还真难说,应该是检测病毒的数量,但肯定不是根据大肠杆菌来定,废水中都含有不同数量的大肠杆菌,不如生活污水。但生活污水并非含病原体污水。