❶ 蒸馏装置
蒸馏装置由三个部分组成:加热气化部分、冷凝部分、接收部分。
注意:
①减压蒸馏时应用克氏蒸馏头,带支管的接液管或使用多头接液管。
②需用毛细管代替沸石,防止暴沸。
③要求用热浴加热,需使用厚壁耐压的玻璃仪器。
两组分的挥发能力相差越大,则上述的增浓程度也越大。在工业精馏设备中,使部分汽化的液相与部分冷凝的气相直接接触,以进行汽液相际传质,结果是气相中的难挥发组分部分转入液相,液相中的易挥发组分部分转入气相,也即同时实现了液相的部分汽化和汽相的部分冷凝。
❷ 凯氏定氮法测定蛋白质中氨基酸含量的主要步骤有哪些
凯氏定氮法只能检测蛋白质中氮含量,不能检测氨基酸的含量.其中蛋白质含量也只是称为粗蛋白质的含量,只是用氮的含量乘以6.25(系数)得出,不是真正的蛋白质的含量.
凯氏定氮法测氮的方法如下:
1、称取0.1g试样(含氮量5~80mg)准确至0.0002g,无损失地放入凯氏烧瓶中,加入硫酸铜0.9g,无水硫酸钾(或硫酸钠)15g,与试样混合均匀,再加硫酸25ml和2粒玻璃珠,在消煮炉士小心加热,待样品焦化,泡沫消失,再加强火力(360~410℃)直至溶液澄清后,再加热消化15min.
2、氨的蒸馏
(1)常量直接茂馏法 将上述的试样消煮液冷却,加蒸馏水200ml,摇匀,冷却.沿瓶壁小心加入40%氢氧化钠溶液100ml,立即与蒸馏装置相连.蒸馏装置冷凝管的末端应浸入50ml硼酸吸收液lcm.加混合指示剂2滴,轻摇凯氏烧瓶,使溶液混匀,加热蒸馏,直至馏出液体积约150ml.先将吸收液取下,再停止加热.
(2)半微量水蒸汽蒸馏法 上述试样的消煮液冷却,加蒸馏水20m1转入100ml容量瓶,冷却后用水稀释至刻度,摇匀,为试样分解液.取2%硼酸溶液20ml,加混合指示剂2滴,使半微量蕉馏装置的冷凝管末端浸入此溶液;蒸馏装置的蒸汽发生器的水中应加甲基红指示剂数滴,硫酸数滴,且保持此液为橙红色,否则应补加少许硫酸.准确移取试样分解液10~20ml注入蒸馏装置的反应室中,用少量蒸馏水冲洗进样入口,塞好入口玻璃塞,再加10ml40%氢氧化钠溶液,小心提起玻璃塞使之流入反应室,将玻璃塞塞好,并在入口处加水封密好,防止漏气,蒸馏4min,使冷凝管末端离开吸收液面,用蒸馏水洗冷凝管末端,洗液均流入吸收液.
3、滴定 用硼酸吸收氨后,立即用0.05mol/L的HCI标准溶液滴定,仍以甲基红或混合甲基红为指示剂.
在测定样本中含氮量的同时,应做一空白对照测定,即各种试剂的用量及操作步骤完全相同,但不加样本,这样可以校正因药品不纯所发生的误差,吸收氨后的吸收液立即用0.05mol/L盐酸标准溶液滴定,溶液由蓝绿色变为灰红色为终点.
4、空白测定 称取蔗糖0.0lg,以代替试样,按上述测定步骤进行空白测定,消耗0.05mol/L盐酸标准溶液的体积应不得超过0.3ml.
5、计算
N%*6.25=粗蛋白质(%)=(V2-V1)*0.014*6.25*100/m*(V’/ V)
每m1的lmol/L盐酸标准溶液相当于0.0140g的N.因此,
式中:v2—试样滴定时所需酸标准溶液的体积(m1);
x09 v1—空白滴定时所需酸标准溶液的体积(m1);
x09c—盐酸标准溶液的浓度(mol/L);
x09m一试样的质量(g);
x09v —试样的分解液总体积(ml);
x09v’—试样分解液正衡山蒸馏用体积(m1);
x090.0140—每ml HCl标准溶液相当于N的克举中数;
x096.25一氮换算成蛋白质的平均系数.
每个试样取两个平行样进行测定,以其算术拦闭平均值为结果.当粗蛋质含量在25%以.上,允许相对偏差为1%;当粗蛋白质含量在l0%~25%时,允许相对偏差为2%;当粗蛋白质含量在10%以下时,允许相对偏差为3%.
❸ 请教:为什么粗蛋白空白太高!
直接用硼酸接收液吸收空蒸出来的液滴,空白达到升皮1.10ml,且你所使用的是定氮仪,那么与此测定值相关的就只有如下几个因素: 1、硼酸不纯或被污染。可以加入甲基红-溴甲酚绿指示剂,如果呈酒红色,无问题,呈蓝色,有问题。估计你在做实验时已观察到无问题。 2、检查你所使用的定氮仪,有无碱倒吸情况。由于你的硫酸氨测定结果稳定,故此可能性不大,但不排除同时存在漏气(氨气)所产生的假象。 3、检查你定氮仪蒸汽发生器装置中所吸入的蒸馏水是否有闹纳问题,估计吵弯差最大的可能就在于此。 查看原帖>>
❹ 凯氏定氮法粗蛋白测定所用的仪器设备有
凯氏定氮法粗蛋白测定所用的仪器设凯拍备包括:分光光度计、反应槽、加热装置、微量滴定装置、pH计、分敬孙败析天平和酶亮颤标仪。
❺ 饲料粗蛋白测定值高的离谱什么原因
楼上各位老师总结的都很好,做下空白、硫酸铵。这几天一直偏高的话,操作上的错误可能性不大,你检查下蒸馏水、药品、试剂有没有污染,或者纯度能不能达标,半微量定氮的话,烧瓶里的水也要经常更换。
❻ 饲料中粗蛋白的测定,为什么消耗0.1mol/L盐酸标准溶液的体积应不得超过0.2ml,如果超过说明什么问题呢
你可能是没有理解标准的意思 。这个指的是空白。
一般在测定蛋白时要做空白,比如用蔗糖代替试样,用同样的方法消化、蒸氮以后 用0.1的盐酸标液老友去滴定吸收液州弯,如果消耗体积大于0.2mL,说明在消化蒸馏过程中存在问题,要重新检验消化步骤,侍迹槐试剂,以及蒸馏装置
❼ 用半微量蒸馏法做饲料粗蛋白时蒸馏发生器硫酸应加多少
用半微量蒸馏法做饲料粗蛋白时蒸馏发生器硫酸应加多少
蛋白质是含氮的版有机化合物权。食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。
1.有机物中的胺根在强热和CuSO4,浓H2SO4 作用下,硝化生成(NH4)2SO4
反应式为:
2NH2+H2S04+2H=(NH4)2S04 (其中CuSO4做催化剂)
2.在凯氏定氮器中与碱作用,通过蒸馏释放出NH3 ,收集于H3BO3 溶液中
反应式为:
(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4
2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O
3. 用已知浓度的H2SO4(或HCI)标准溶液滴定,根据HCI消耗的量计算出氮的含量,然后乘以相应的换算因子,既得蛋白质的含量
反应式为:
(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3
(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3
❽ 油厂棉粕蛋白化验蛋白的微量做法怎么做
微量做法就是凯氏半微量定氮法,具体操作步骤如下:
饲料粗蛋白的检测方法(凯氏半微量定氮法)
1 原理
凯氏法测定试样含氮量,即在催化剂存在下,用浓硫酸破坏有机物,使含氮物转化成硫酸铵,加入强碱(NaOH)并蒸馏使氨逸出,用硼酸吸收后,用标准盐酸溶液滴定测出含氮量,将结果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白质含量。
2 仪器设备
2.1实验室用样品粉碎机或研钵
2.2分样筛:孔径0.45mm(40目)
2.3分析天平:感量0.0001g
2.4消煮炉或电炉
2.5滴定管:酸式25mL
2.6凯氏烧瓶:100mL
2.7凯氏蒸馏装置:半微量水蒸汽蒸馏式
2.8锥形瓶:150mL
2.9容量瓶:100mL
3 试剂
3.1硫酸:分析纯
3.2硫酸铜:分析纯
3.3硫酸钾:分析纯
3.4硒粉:分析纯
3.5氢氧化钠:分析纯40g溶于100mL蒸馏水配成40%水溶液。
3.6硼酸:分析纯2g溶于100mL蒸馏水配成2%水溶液。
3.7混合指示剂:甲基红分析纯0.1%乙醇溶液,溴甲酚绿分析纯0.5%乙醇溶液,两溶液等体积混合,阴凉处保存期三个月以内。
3.8 0.02N盐酸标准溶液:1.67mL盐酸分析纯溶于1000mL 蒸馏水中。
3.8.10.02N盐酸标准溶液的标定(碳酸钠法)
精确称取0.04g于270—300°C灼烧至恒重的基准级无水碳酸钠,准确至0.0001g,无损失地转入100 mL三角瓶中,加入无CO2蒸馏水(新做蒸馏水或蒸馏水煮沸数分钟放凉后使用)50mL溶解,并加入混合指示剂10滴,用盐酸标准溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色,煮沸2分钟,冷却后继续滴定至溶液呈暗红色,同时做空白试验。
3.8.2盐酸标准溶液当量浓度的计算
G
N =
(V1-V2)×0.05299
式中:G——无水碳酸钠的重量,g;
V1——盐酸标准溶液消耗的体积,mL;
V2——空白试验所消耗盐酸标准溶液的体积,mL;
0.05299——每毫克当量碳酸钠的克数;
注:标定各浓度间的相对偏差不大于0.2%。
3.9蔗糖:分析纯
3.10硫酸铵:分析纯,干燥。
4 试样的选取与制备
选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g,粉碎后全部通过40目筛,装于密封容器中,防止试样成分变化。
5 测定方法及步骤
5.1试样的消煮
称取0.5—1g试样 (粗蛋白含量在25%以下称取1g,粗蛋白含量在25%以上称取0.5g),准确至0.0002g,放入凯氏烧瓶中,加入硫酸铜0.4g,无水硫酸钾6g,硒粉0.004g,与试样混合,再加浓硫酸12.5mL,在消煮炉上小心加热,待样品焦化,泡沫消失,加强火力,至溶液澄清后,再加热至少1h。
5.2氨的蒸馏(半微量水蒸汽蒸馏法)
将上述消煮液冷却,无损失地转入100 mL容量瓶中,冷却后定容为试样分解液,取20 mL 2%硼酸溶液,加混合指示剂2滴,使半微量蒸馏装置的末端浸入此溶液,准确移取试样分解液10 mL注入反应室中,塞好入口玻璃塞,再加入10mL 40%NaoH溶液,小心提起玻璃塞使之流入反应室(加碱时流速不可过快,否则会引起硼酸吸收液倒流),塞好玻璃塞,并在入口处加水密封好,防止漏气,蒸馏,自吸收液变为蓝色开始计时,4分钟后,使冷凝管末端离开吸收液面,再蒸馏1分钟,用蒸馏水洗净冷凝管末端,洗液均流入吸收液。
5.3滴定
吸收氨后的吸收液立即用0.02mol/L的标准溶液滴定,溶液由蓝色变成灰红色为终点,记录所耗标准溶液的体积。
5.4空白测定
称取蔗糖0.5g代替试样,重复上述操做,以校正药品不纯所发生的误差,消耗0.02mol/LHCL应不超过0.3mL。
6 测定结果的计算与分析
6.1计算公式如下:
(V-V0)×(N×0.014×6.25) ×100
粗蛋白(%)=
W×V/V′
式中:V-----滴定试样时所需酸标准溶液体积,mL;
V0------滴定空白时所需酸标准溶液体积,mL;
N-------盐酸标准溶液当量浓度;
W------试样重量,g;
V-------试样分解液总体积,mL;
V′------试样分解液蒸馏用体积,mL;
0.0140------氮的毫克当量数;
6.25-----氮换算成蛋白质的平均系数。
6.2重复性
每个试样取两个平行样,以其算数平均值为结果;
粗蛋白含量在25%以上,允许相对偏差为1%;粗蛋白含量在10-25%之间,允许相对偏差为2%;粗蛋白含量在10%以下,允许相对偏差为3%;
7 测定步骤的检验
精确称取0.2g硫酸铵,代替试样,按上述步骤操作,按上述公式计算(不乘系数6.25),测得硫酸铵含氮量为21.19±0.2%,否则应检查加碱,蒸馏和滴定各步骤是否正确。
8 注意事项
8.1试样消煮时,先低温加热,避免泡沫溢出,待泡沫消失后,再逐渐增加温度,使之微沸,避免剧烈沸腾,否则会使氮分子损失。
8.2加碱必须过量,碱除了与铵盐和剩余的硫酸作用,还与硫酸铜作用生成蓝色氢氧化铜,然后分解为黑色氧化铜。
8.3消化过程中,若硫酸损失过多,可酌量补加硫酸,勿使瓶内干涸。
❾ 食品营养成分分析
食品营养成分的分析
食品营养成分:就是指食品中对人体具有营养学意义的成分。
主要有蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质(也称为无机盐)和水。其中,蛋白质、脂肪和碳水化合物被称为三大营养素。它们都是动植物食品中的主要组成成分,能供给机体能量。无机盐和维生素则不能给人类提供热量,但它们是人体多种酶和生理活性物质的重要组成部分。水则是维持人体生存的重要物质。
食品营养成分的摄入是否合理直接关系着人体的健康,但是没有一种天然的食物能供给人体所需的全部营养素。因此,对食品进行营养成分分析,掌握食品中营养素的质和量,指导人们合理营养与膳食,对食品的生产、加工、运输、贮藏、销售过程进行营养成分的检测,及时了解食品品质的变化,以及为食品新资源和新产品的研发提供可靠的依据。
第一节 食品中水分的测定
水分是食品的天然成分,也是动植物体内不可缺少的重要成分,具有及其重要的生理作用。如水是体内营养素及其代谢产物的良好溶剂,是体内各种化学反应的介质,能帮助营养素的吸收和代谢产物的运输、排泄,同时在调节体温、润滑关节和肌肉、减少摩擦等方面都发挥了重要的作用。
❿ 半微量凯氏定氮蒸馏装置气密性检查方法
方法是:
1、使用前检查蒸馏装置及循环水道是否畅通,连接是否牢固,防止漏水漏气;
2、接通电源,加热蒸汽发生器(瓶内水要保持橙红色,蒸汽发生器蒸汽明显时,再通循环水,冷却冷凝管;
3、将装有吸收液和指示剂的三角瓶置于冷凝管末端,并使尖端浸入吸收液。凯氏定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理,通过测定样品中氮的含量从而计算蛋白质含量的仪器。因其蛋白质含量测量计算的方法叫做凯氏定氮法,故被称为凯氏定氮仪,又名定氮仪、蛋白质测定仪、粗蛋白测定仪。