① 純化水微生物限度檢查操作
純化水微生物限度操作規程
文件編號
總
頁
數
共
3
頁
制訂部門
實施日期
起
草
人
審
核
人
批
准
人
起草日期
審核日期
批准日期
1.
目的
本規程旨在為微生物限度檢查提供一個標准化方法。
2.
適用范圍
微生物限度實驗室
3.
責任者
QC
主管生測員
4.
安全注意事項
嚴格無菌操作,防止微生物污染。
5.
規程
5.1
取樣
a
.在車間、實驗室所有用水點按序取樣,標明日期和取樣點位置,一個監測
點取水
3
次,一次
250mL
,送檢驗室按中國葯典
2010
年版二部標准進行全檢。
b
.
取樣前將直接接觸樣品的容器用
75%
酒精棉球進行擦拭,
採用滅菌後瓶收
集樣品。
c
.取樣時,取樣人洗手並消毒,取樣前用純化水淋洗檢驗用取樣瓶和瓶塞
3
次。滅菌瓶至少取
200mL
用於微生物檢驗用水,微生物檢驗應在取樣後的
1
小
時內進行,或將樣品冷藏並在
4
小時內進行檢驗。
5.2
微生物限度檢查
純化水檢驗標准微生物限度檢查採用平皿法和薄膜過濾法。
5.3
微生物培養
(
1
)
除另有規定,
本檢查法中細菌培養溫度為
30-35
℃,黴菌、酵母菌培養溫
度為
② 純化水微生物真菌檢測,培養出紅色小點和白色大圓點,請問這兩個分別是什麼品種的菌
白色大圓點可能是酵母菌吧,酵母菌菌落形態與細菌相似,但較大較厚,呈乳白色或紅色,表面濕潤、粘稠,易被挑起。
③ 純化水微生物限度檢查
細菌計數:純化水取水樣100 ml,並做陰性對照,經直徑為50 mm、孔徑0.45μm 的薄膜過濾器過濾,小心取出版濾膜,菌權面向上貼於營養瓊脂培養基平板上,將培養皿倒置於培養箱中,於30~35℃培養72 h,菌落計數,
黴菌及酵母菌計數:純化水取水樣100 ml,並做陰性對照,經直徑為50 mm、孔徑0.45μm 的薄膜過濾器過濾,小心取出濾膜,菌面向上貼於玫瑰紅鈉培養基平板上,將培養皿倒置於培養箱中,於23~28℃培養5天(可延長到7天),菌落計數;
④ 純化水微生物限度檢測一般為多少
水質常抄規項目:菌落襲總數、大腸菌群、大腸桿菌、黴菌、酵母菌等;
致病菌:沙門氏菌、單核增生李斯特氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌、霍亂弧菌、創傷弧菌、彎曲桿菌屬、阪崎腸桿菌、綠膿桿菌、溶血性鏈球菌、肉毒梭菌、產氣莢膜梭菌、蠟樣芽孢桿菌、大腸埃希氏O157:H7/NM、致瀉大腸埃希氏菌、溶藻弧菌等;
其他:軍團菌、乳酸菌、罐頭食品的商業無菌、腸桿菌科、嗜滲酵母、糞鏈球菌、糞大腸菌群、腸桿菌屬、厭氧菌落總數、厭氧亞硫酸鹽還原菌、需氧嗜溫菌芽孢、厭氧嗜溫菌芽孢、嗜熱嗜酸菌、嗜熱菌落總數、白色念珠菌等;
實時PCR快速檢測:沙門氏菌、單核增生李斯特菌、大腸桿菌O157:H7/NM
抗菌性測試:塑料製品,陶瓷,其他抗菌材質
葯典常規測試:USP 62,ChP
科標檢測可以做檢測,專業的檢測機構
⑤ 我問一下做純化水注射用水的微生物限度時為什麼營養瓊脂上長的細菌為黃色,而玫瑰紅納瓊脂上長的菌為紅色
樓上說錯了來一樣東西自,營養瓊脂是沒有選擇培養性的,你的這種情況應該是玫瑰紅鈉瓊脂上有某些成分可供那種菌分解,再配有指示劑所以顏色不同,像大腸桿菌在血平板是灰白色,在麥康凱板上是玫紅色一樣(大腸桿菌分解麥康凱上的乳糖)
⑥ 純化水微生物限度檢查方法
4.10微生物限度(薄膜過濾法)
4.10.1取相當於每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液,加至適量的稀釋劑中,混勻,過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數較多時,可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜,沖洗方法和沖洗量同「計數方法的驗證」。沖洗後取出濾膜,菌面朝上貼於營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉腖葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
4.10.2陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液1ml,照上述薄膜過濾法操作,作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。
4.10.3培養和計數 除另有規定外,細菌培養48小時,逐日點計菌落數,一般以48小時的菌落數報告;黴菌、酵母菌培養72小時,逐日點計菌落數,一般以72小時的菌落數報告;必要時,可適當延長培養時間至5~7天進行菌落計數並報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數後,計算各稀釋級供試液的平均菌落數,按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不少於15,則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
4.10.4菌數報告原則 以相當於1g或1ml供試品的菌落數報告菌數;若濾膜上無菌落生長,以<1報告菌數(每張濾膜過濾1g或1ml供試品),或<1乘以稀釋倍數的值報告菌數。
這是我們公司的純化水微生物檢測部分內容,請參考。
⑦ 純化水微生物限度檢查什麼菌,5種標准菌菌種可以只選其中一兩種嗎
5種菌種是做驗證用的,用一次就好,平時做純化水微生物限度只要金黃色葡萄球菌做陽性對照就好。
⑧ 那個國標規定純化水的檢出限
1、性狀:應無臭、無味、無色澄明液體
2、酸鹼度:加甲基紅2滴不得顯紅色,加溴麝香草酚藍5滴,不得顯藍色。
3、電導率:電導率應≤5.1μS•cm-1。
4、硝酸鹽:如顯色不得超過標准對照液。
5、亞硝酸鹽:如顯色應不超過標准對照液。
6、氨:如顯色應不超過對照液。
7、易氧化物:粉紅色不得完全消失。
8、不揮發物:遺留殘渣不得超過1mg。
9、重金屬:顯色不得超過對照液。
10、微生物限度:取純化水採用薄膜過濾法理後,依法查中國葯典(附錄XIJ),純化水細菌、黴菌和酵母菌總數每1mL不得超過100個。
上述內容即是純化水檢測標准,這時醫葯用水需求用戶必須要掌握的,定期檢測水質標准才是對用水安全最大的保障,另外定期對純化水管道清洗消毒也是對純化水成產的保障。
⑨ 微生物檢測出現紅色菌落是什麼細菌
細菌菌落總數是微生態制劑樣品檢測必做的一項指標。菌落總數檢測同其他檢驗一樣,也存在檢測誤差。平板計數法是檢測飼料中細菌總數、活酵母數、芽孢桿菌數及乳酸菌數的常用方法之一,因此,該值准確與否直接關繫到微生物飼料添加劑類產品的質量好壞。微生物平板計數的通常方法為每個樣品用 3個稀釋度,每個稀釋度常做 3個重復。但如何對平板菌落進行正確計數、3個稀釋度以哪一個稀釋度進行計數及微生物檢測允許誤差等問題,在飼料標准中並未有所規定,而這些問題與統計值的准確性密切相關。我們就實際檢測芽孢桿菌工作中遇到一些菌落計數的問題,與大家進行探討。
1材料與方法
1.1試驗材料
1.1.1樣品:隨機抽取微生態飼料添加劑合生素樣品3份。
1.1.2培養基:營養瓊脂。
1.1.3儀器設備:磁力攪拌器,無菌培養皿,培養箱,振盪器。
1.2 試驗方法
1.2.1樣品的振盪時間對菌數檢測的影響
選擇1個樣品,稱取10 g,放入無菌錐形瓶內,加入90 mL無離子水,磁力攪拌分別為l0、20、30、40和60 min。
用1 mL移液槍從中吸取1 mL樣品懸濁液加入到盛有9 mL去離子水的試管中,用振盪器使樣品充分均勻,以此類推,製成10-1~1O-7不同稀釋度的樣品溶液。
平板塗布法檢測菌含量:用移液槍從樣品稀釋液中各吸取200uL,每個樣品稀釋液3個重復;將平板倒置於35-37℃培養箱中培養24 h。
1.2.2檢測方法對菌數檢測的影響
各個樣品稱取l0 g,放入無菌錐形瓶內,加入90 mL無離子水,磁力攪拌分別為40 min。並稀釋成10-1~l0-7不同稀釋度的樣品溶液。
傾注平板法檢測菌含量:用移液槍從各個平行樣品相應稀釋液中各吸取1 mL,每個樣品稀釋液3個重復,待培養基表面乾燥後,將平板倒置於35-37℃培養箱中培養24 h。
平板塗布法檢測菌含量:用移液槍從各個平行樣品相應稀釋液中各吸取200uL塗布平板,每個樣品稀釋液3個重復;將平板倒置於35~37℃培養箱中培養24 h。
2結果
2.1樣品的振盪時間對菌數檢測結果的影響
採用細菌平板計數的方法,不同振盪時間對合生素中芽孢桿菌檢出量的結果見表1。從表l中可見:不同振盪時間獲得的細菌菌落數量有較大差別。總體而言,在一定時間內,隨著振盪時間的延長檢出有效菌含量增加,說明細菌從載體上解析需要一定的時間;當振盪時間為40 min後產品中的菌含量基本穩定。採用適當振盪時間才能更精確的顯示產品中有效菌的含量。
表1 震盪時間對有效菌含量結果的影響 億CFU/g
震盪時間
10min
20min
30min
40min
60min
含菌量
2
6
10.5
15
14
2.2 檢測方法對菌數檢測結果的影響
表2 檢測方法對有效菌含量結果的影響 億CFU/g
檢測方法
樣品平行
1
2
3
傾注平板法檢測有效菌含量
16.1
13.0
15.3
平板塗布法檢測有效菌含量
14.5
11.2
14.2
採用不同的檢測方法,對合生素中芽孢桿菌檢出量的結果見表2。從表2可見:不同方法獲得的細菌菌落數量有差別,傾注平板法相較平板塗布法檢測的菌含量多,但基本在20%誤差范圍內。平板計數法操作相對簡單、快捷且影響因素較少。傾注法培養基營養分布較均勻,對部分蔓延菌落能控制,但對操作人員熟練程度要求相對較高。
3分析與討論
3.1樣品處理對結果的影響
取樣時對樣品取樣口和取樣工具要消毒,防止樣品交叉污染。
3.2樣品的均質處理對結果的影響
固體樣品要用均質器或玻璃珠等充分均質,也可在稀釋液中添加相應溶解液(如吐溫80和液體石蠟等)的稀釋液,以保證樣品的充分均質。
測定芽孢桿菌活菌數時,不同振盪時間獲得的細菌菌落數量有較大差別,因為細菌從載體上解析並均勻分散到溶液中需要一定的時間,待測樣品應在振盪器上充分振盪,使得芽孢桿菌可以充分和均勻地分散到待測溶液中,避免因為菌體未完全釋放而引起結果中細菌含量偏低的現象。
3.3 試驗過程中操作方法的影響
加樣l mL時,用1 mL的吸管並且每做一個稀釋度都要換1支吸管,否則稀釋度間菌落計數誤差會超過10%,說明存在操作誤差。用吸管向平皿里加樣,平皿開口要小,吸管要直立且加樣結束後,讓吸頭接觸皿底乾燥處,保證加樣的體積不少。
⑩ 純化水微生物限度,按照葯典要5種菌種。然後看您的回答是可以只用金黃色葡萄球菌,請問有什麼依據嗎
純化水的微生物的限抄度,按照2015版葯典是只需計數就好吧,而5種細菌分別是:大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑麴黴。這5種是用來做純化水的驗證的。一種都不能少。具體檢驗純水水的方法葯典上有可以查看。