❶ he染色時,分化用哪種試劑如何操作
常規he染色步驟
(1)二甲苯(Ⅰ) 15min
(2) 二甲苯(Ⅱ) 15 min
(3)二甲苯:無水乙醇=1:1 2min
(4)100%乙醇(內Ⅰ) 5min
(5)100%乙醇(Ⅱ) 5 min
(6)80%乙醇 5min
(7)蒸餾容水 5 min
(8)蘇木精液染色 5 min
(9) 流水稍洗去蘇木精液 1-3 s
(10) 1%鹽酸乙醇 1-3 s
(11) 稍水洗 10-30 s
(12)蒸餾水過洗 1-2 s
(13) 0.5%伊紅液染色 1-3 min
(14) 蒸餾水稍洗 1-2 s
(15) 80%乙醇稍洗 1-2 s
(16) 95%乙醇(Ⅰ) 2-3 s
(17) 95%乙醇(Ⅱ) 3-5 s
(18) 無水乙醇 5-10 min
(19) 石炭酸二甲苯 5-10 min
(20) 二甲苯(Ⅰ) 2 min
(21) 二甲苯(Ⅱ) 2 min
(22) 二甲苯(Ⅲ) 2 min
(23) 中性樹膠封固
❷ 做HE染色觀察腦組織用冰凍切片好還是石蠟切片好 謝謝
當然是石蠟切片好,石蠟切片比冰凍切片薄,結構更清晰,而且不容易掉片,標本可長期保存。
❸ HE染色中,鹽酸的作用是什麼,謝謝
使著色的細胞核以外的組織細胞成分的顏色去掉
❹ HE染色中蘇木精染色前蒸餾水為什麼不能用自來水代替
晚上好,HE染色中因為要使用到兩種水溶性染料,其中鹼性染料為陽離專子偶氮鹽,屬酸性染料為陰離子磺酸鹽,使用三級蒸餾水或者去離子水是為了保證染色不與水中的其他雜質締合而失去上染效能——自來水中TDS非常高,其中含有大量的陰離子雜質,它們首先就會破壞陽離子的蘇木精部份,使偶氮陽離子沉降或者成為不溶性色淀失去吸附力了,一步錯下面步步錯,至少在有機合成和生物實驗方面我沒有聽說過有人敢使用自來水作為GPL或者有限元分析等精密用途,它會嚴重污染分析樣品及結果造成不可修復的數據偏差,請參考。比如這是做分析常用的陽離子染料鹼性玫瑰精(羅丹明B)在我這里的黃河灘區自來水中溶解的情況,可以看到生成了大量不溶性色淀及不明沉澱。
❺ he染色所用的染料中什麼是酸性染料
HE染色法所用染料中屬於酸性染料的是伊紅染料。
伊紅是一種紅色酸性染料.在微生物學實驗中,用於鑒別產酸性細菌的一種培養基添加劑。
HE染色法所用的蘇木精染液為鹼性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。
伊紅染料的介紹:
伊紅(eosin)為酸性染料,將細胞質和細胞間質染為粉紅色·切片在染色前需要脫蠟,染色後用中性樹膠或DPX封片,以便長期保存 。伊紅為紅色粉末,易溶於水,溶液呈綠色熒光,能溶於醇。常用於組織學用於上皮細胞、肌肉纖維和細胞漿染色。
he染色法介紹:
蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為鹼性 ,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中最基本、使用最廣泛的技術方法。
HE染色法結果鑒定:
細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。
著色情況與組織或細胞的種類有關,也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜鹼,當其衰老時或發生退行性變則呈現嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現透明變性時,伊紅著色由淺變深。
❻ HE染色法能直接染色嗎用蘇木精和伊紅的水溶液
要先用甲醛固定,&通透細胞膜,不能直接染色吧
❼ 細胞he染色時沒有用到二甲苯為什麼還要用酒精脫水
染色流程(1)二甲苯(Ⅰ) 15min (2) 二甲苯(Ⅱ) 15 min (3)100%乙醇(Ⅰ) 5min (4)100%乙醇(Ⅱ) 5 min (5)80%乙醇 5min (6)蒸餾水 5 min (7)蘇木精液染色 5 min (8 ) 流水稍洗去蘇木精液 1-3 s (9) 1%鹽酸乙醇 1-3 s (10) 稍水洗 10-30 s (13)蒸餾水過洗 1-2 s (14) 0.5%伊紅液染色 1-3 min (15) 蒸餾水稍洗 1-2 s (16) 80%乙醇稍洗 1-2 s (17) 95%乙醇(Ⅰ) 2-3 s (18) 95%乙醇(Ⅱ) 3-5 s (19) 無水乙醇 5-10 min (20) 石炭酸二甲苯 5-10 min (21) 二甲苯(Ⅰ) 2 min (22) 二甲苯(Ⅱ) 2 min (23) 二甲苯(Ⅲ) 2 min (24) 中性樹膠封固 註:①第(10)、(11)步可省去,(12)步沖水時間需延長至20-30min.②第(20)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用無水乙醇.* 冷凍切片HE染色步驟:(1)冰凍切片固定 10~30 s (2)稍水洗 2 s (3)蘇木精液染色(60℃) 30~60 s (4)流水洗去蘇木精液 10 s (5)1%鹽酸乙醇 3 s (6)稍水洗 2 s (7)促藍液返藍 10 s (8)流水沖洗 15~30 s (9)0.5%曙紅液染色 30~60 s (10)蒸餾水稍洗 2 s (11)80%乙醇 2 s (12)95%乙醇 2 s (13)無水乙醇 2 s (14)石炭酸二甲苯 3 s (15)二甲苯(Ⅰ) 3 s (16)二甲苯(Ⅱ) 3 s (17)中性樹膠封固.註:第(14)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用無水乙醇.染色結果:細胞核藍色,胞質、肌纖維、膠原纖維和紅細胞呈深淺不一的紅色.4.12 切片脫水透明 切片經HE染色後,要徹底脫水透明,才能用中性樹膠封蓋.如果脫水不徹底,封片後呈白色霧狀,鏡下觀察模糊不清,且容易褪色.切片1-2級無水乙醇脫水,也可使用石碳酸二甲苯進行脫水.石碳酸有較強脫水能力,但長時間可使切片脫色,因此要經過多次二甲苯以使石碳酸完全除去.
❽ 都說HE染色法最常用的,誰能給我具體講講...
HE 染色法為蘇木精-伊紅染色法,是石蠟切片技術里常用的染色法之一,也是組織回學、答胚胎學、病理學教學與科研中最基礎、最廣泛的技術方法。
屬性為鹼性的蘇木素染色液可以使細胞著藍色,為酸性的伊紅使細胞著紅色,其結果胞核呈藍色,胞漿呈紅色。兩種不同的染色液使細胞通過顏色來改變折光率,在光鏡下呈現出細胞圖像。
HE染色法之所以成為細胞染色最常用的方法是因為HE染色法過程中除化學反應外,還有物理作用中吸附、吸收效果,使HE染色提供良好的核漿對比染色效果。
❾ HE染色的作用
由於組織或細胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質不一樣。經蘇木精染色後,細胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,可用鹽酸酒精分化和弱鹼性溶液顯藍,如處理適宜,可使細胞核著清楚的深藍色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細胞成分與病變的一般形態結構特點均可顯示出來。
❿ he染色中的伊紅醇溶性和水溶性哪個好用
伊紅本身是鈉鹽。當然是水溶性很好的。