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紫外分光光度計用的純化水

發布時間:2022-03-20 04:30:05

① 紫外分光光度計如何使用 詳細

使用前儀器要調零、調百校準,參比溶液又稱空白溶液。測量時用作比較的、不含被測物質但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常,用參比溶液掃描的曲線應是一條平坦的直線。有時,基體中雖不含被測物質,但含有別的物質,這時必須保證其不影響測試。經常碰到的是試劑空白中含有被測物質,此時必須經過純化將其除去。否則將影響測定結果。在色譜分析中,有時基體中可能存在一個以上的和被測組分相距較遠的色譜峰,計算機在數據處理中不會計入它們,不影響測定。
以所含鐵離子是多少為例:
參比溶液與測量溶液就相差鐵離子含量,在測量之前要用不含鐵離子的參比溶液掃描,調整儀器後(調100的過程),然後再測量含鐵離子溶液的比色皿,這樣測量溶液中的鐵離子會形成自己特定的峰值,次峰值與資料庫里基準峰值對比就可以得出溶液所含量了。如果資料庫中沒有鐵離子的曲線,你還要自己先用不同鐵離子濃度的溶液做工作曲線,然後進行測量。

② 用紫外分光光度計測I+G含量時,為什麼樣品溶液里要加入0.01mol/l的鹽酸溶液

因為I+G是IMP和GMP的混合物,IMP與GMP是肌苷酸二鈉和鳥苷酸二鈉,這兩種物質又是由肌苷和鳥苷組成的,所以根據肌苷和鳥苷在紫外吸收特性下,pH在3到6有最大吸收峰,所以選擇用0.01鹽酸當溶劑,同時做空白,但是在不同的pH值下,最大吸收的波長也是不固定的,多多少少都會有降解,所以要盡快檢測,你可以在可以掃描光譜的紫外分光光度計下掃一下譜圖,可以看到肌苷的最大吸收波長應該是248.5nm。以上是個人觀點,請參考

③ 紫外分光光度計的使用步驟是什麼

開機自檢預熱,主要設置狹縫,自動樣品架控制,數據存儲調用列印,測試光度、定量、光譜掃描、動力學測量、蛋白質測量。說起來簡單,建議您可以聯系下紫外的專業供應商 京東7G旗艦店或者青島法特科技,讓他們技術人員給您這邊詳細講解下,很快就學會操作了,各品牌他們都很精通
























光纖熔接機主要用於光通信中光纜的施工和維護,所以又叫光纜熔接機。一般工作原理是利用高壓電弧將兩光纖斷面熔化的同時用高精度運動機構平緩推進讓兩根光纖融合成一根,以實現光纖模場的耦合。
普通光纖熔接機一般是指單芯光纖熔接機,除此之外,還有專門用來熔接帶狀光纖的帶狀光纖熔接機,熔接皮線光纜和跳線的皮線熔接機,和熔接保偏光纖的保偏光纖熔接機等。
按照對准方式不同,光纖熔接機還可分為兩大類:包層對準式和纖芯對準式。包層對準式主要適用於要求不高的光纖入戶等場合,所以價格相對較低;纖芯對準式光纖熔接機配備精密六馬達對芯機構、特殊設計的光學鏡頭及軟體演算法,能夠准確識別光纖類型並自動選用與之相匹配的熔接模式來保證熔接質量,技術含量較高,因此價格相對也會較高。
最常見的單芯光纖熔接機的使用方法一般都基本相同:
1、開剝光纜,並將光纜固定到盤纖架上。常見的光纜有層絞式、骨架式和中心束管式光纜,不同的光纜要採取不同的開剝方法,剝好後要將光纜固定到盤纖架。
2、將剝開後的光纖分別穿過熱縮管。不同束管、不同顏色的光纖要分開,分別穿過熱縮管。
3、打開熔接機電源,選擇合適的熔接方式。光纖常見類型規格有:SM色散非位移單模光纖(ITU-T G.652)、MM多模光纖(ITU-T G.651)、DS色散位移單模光纖(ITU-T G.653)、NZ非零色散位移光纖(ITU-T G.655),BI耐彎光纖(ITU-T G.657)等,要根據不同的光纖類型來選擇合適的熔接方式,而最新的光纖熔接機有自動識別光纖的功能,可自動識別各種類型的光纖。
4、制備光纖端面。光纖端面製作的好壞將直接影響熔接質量,所以在熔接前必須制備合格的端面。用專用的剝線工具剝去塗覆層,再用沾用酒精的清潔麻布或棉花在裸纖上擦試幾次,使用精密光纖切割刀切割光纖,對0.25mm(外塗層)光纖,切割長度為8mm-16mm,對0.9mm(外塗層)光纖,切割長度只能是16mm。
5、放置光纖。將光纖放在熔接機的V型槽中,小心壓上光纖壓板和光纖夾具,要根據光纖切割長度設置光纖在壓板中的位置,並正確地放入防風罩中。
6、接續光纖。按下接續鍵後,光纖相向移動,移動過程中,產生一個短的放電清潔光纖表面,當光纖端面之間的間隙合適後熔接機停止相向移動,設定初始間隙,熔接機測量,並顯示切割角度。在初始間隙設定完成後,開始執行纖芯或包層對准,然後熔接機減小間隙(最後的間隙設定),高壓放電產生的電弧將左邊光纖熔到右邊光纖中,最後微處理器計算損耗並將數值顯示在顯示器上。如果估算的損耗值比預期的要高,可以按放電鍵再次放電,放電後熔接機仍將計算損耗。
7、取出光纖並用加熱器加固光纖熔接點。打開防風罩,將光纖從熔接機上取出,再將熱縮管移動到熔接點的位置,放到加熱器中加熱,加熱完畢後從加熱器中取出光纖。操作時,由於溫度很高,不要觸摸熱縮管和加熱器的陶瓷部分。
8、盤纖並固定。將接續好的光纖盤到光纖收容盤上,固定好光纖、收容盤、接頭盒、終端盒等,操作完成。6489是我的幸運數字,祝你好運!

④ 紫外可見分光光度計使用中應注意哪些問題

【紫外可見分光光度計使用注意事項】在使用紫外可見分光光度計時,必須要注意一些使用後的維護、保養,和一些基本使用注意事項,才能達到更好的使用效果。
1、使用的吸收池必須潔凈,並注意配對使用。量瓶、移液吸管均應校正、洗凈後使用。
2、取吸收池時,手指應拿毛玻璃面的兩側,裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發性溶液時應加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭乾凈,檢視應無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應注意方向相同。用後用溶劑或水沖洗干凈,晾乾防塵保存。
3、供試品溶液濃度除各該品種已有註明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
4、測定時除另有規定外,應以配製供試品溶液的同批溶劑為空白對照,採用25px石英吸收池,在規定的吸收峰±2nm以內,測幾個點的吸收度或由儀器在規定的波長附近自動掃描測定,以核對供試品的吸收峰位置是否正確,並以吸收度最大的波長作為測定波長,除另有規定外吸收度最大波長應在該品種項下規定的測定波長±2nm以內。
5、供試品應取2份,如為對照品比較法,對照品一般也應取2份。平行操作,每份結果對平均值的偏差應在±0.5%以內。
6、選用儀器的狹縫寬度應小於供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值會偏低,狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為准,對於大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。

⑤ 紫外分光光度計的使用步驟是什麼

儀器名稱:紫外/可見分光光度計系統
使用方法:開機步驟
1 開光譜儀電源
2 開計算機電源
3 在文件管理器中用滑鼠指按UV WinLab圖標,此時出現UV WinLab的應用窗口,儀器已准備好,可選用適當方法進行分析操作.
2 方法:在分析中必須對分光光度計設定一些必要的參數,這些參數的組合就形成一個「方法」.Lambda系列UV WinLab軟體預設四類常用方法.
1)掃描(SCAN),用以進行光譜掃描.
2)時間驅動(TIME DRIVER),用以觀察一定時間內某種特定波長處縱坐標值的變化,如酶動力學.
3)波長編程(WP)用以在多個波長下測定樣品在一定時間內的縱坐標值變化,並可以計算這些縱坐標值的差或比值.
4)濃度(CONC)用以建立標准曲線並測定濃度.
2.1 進入所需方法,在方法窗口中選擇所需方法的文件名.
2.2 方法的設定
2.2.1 掃描、波長編程及時間驅動
各項方法可根據顯示的參數表,逐項按需要選用或填入,並可參考提示.
2.2.2 濃度
濃度方法窗口下方標簽較多,說明做濃度測定時需要參數較多.用滑鼠指按每一標簽,可翻出下頁,其上有一些需要測定的參數.必須逐頁設定.
3 工具條
3.1 SETUP
當所需的各項參數都已在參數中設好後,必須用滑鼠指按SETUP,才能將儀器調整到所設狀態.
3.2 AUTOZERO
用滑鼠指按此鍵,分光光度計即進行調零(在光譜掃描中則進行基線校正).
3.3 START
用滑鼠指按此鍵,光度計即開始運行所設定的方法.
4 方法運行
4.1 掃描,時間驅動,波長編程
方法選好後,先放入參比溶液,按AUTOZERO鍵,進行自自動校零或背景校正結束後再放入樣品,按START,分光光度計即開始進行,同時屏幕上出現圖形窗口,將結果顯示出來.
4.2 濃度
4.2.1制訂標准曲線
1 方法選好後,確認各項數據正確,特別是REFS頁中第一行要選中右上角的「edit mode」.再放入參比溶液,按AUTOZERO鍵自動校零或背景校正.
2 按setup,待該圖標消失後,再按「start」,按提示依次放入標准色列的各管溶液,每次都按提示進行操作.
3 標准色列測定
完畢後,屏幕上出現calibgraphwindow,顯示擬合的標准線,並標出各項標准管的位置,屏幕下方還有一條Concentration mode的對話框,可以用來修改擬合的曲線類型(按 change calbration),或修改標准溶液的任何一管(replace),或取消某一管(delete),或增加標准溶液管數(add).如過已經滿意,則按analyse sample鍵,進入樣品測定窗口.
4 標准曲線有關的各項數據,均在calibresultwindow中,可用滑鼠將其調出觀察.其中包括每個標准溶液的具體數據,標准曲線的回程方程式,相關系數,殘差.
4.2.2樣品濃度測定
4.2.2.1剛制定好的標准曲線接著進行樣品濃度測定時
1 只需在concentration mode對話框按analyse sample鍵,進入樣品測定窗口.
2 按設定的樣品順序放入各樣品管,每次按提示進行操作.
3 屏幕上出現結果窗口,結果數據將依次顯示在樣品表中的相應位置.
4.2.2.2利用原有的標准曲線接著進行樣品濃度測定時
4.2.2.2.1 調出所測定樣品的濃度方法文件,首先調出refs頁,將原設edit mode選項取消,改設左上角的using exiting
calibration.重新將方法存檔,則今後再調用時即不需再作修改.
4.2.2.2.2 在sample頁中按要求重設各種樣品名稱機樣品信息.
4.2.2.2.3 按工具條中setup鍵,將主機設到該方法所設定的條件.
4.2.2.2.4 將參比溶液放入比色室,按autozero鍵做背景校零.
4.2.2.2.5 按start鍵,按設定的樣品順序放入各樣品管,每次按提示進行操作.
4.2.2.2.6 屏幕上出現結果窗口,結果數據將依次顯示在樣品表中相應位置.

⑥ 如何用紫外分光光度計,測量水中二甲苯的濃度(步驟)

分光光度計要測量的樣品必須是均一的溶液,不能有沉澱,如果有沉澱的話就要搖勻。之於為什麼這樣做和可以做哪些測量、如何測量,下面詳述:
分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器。
而分光光度法則是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析。 常用的波長范圍為:(1)200~400nm的紫外光區,(2)400~760nm的可見光區,(3)2.5~25μm(按波數計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和准確度,所有儀器應按照國家計量檢定規程或本附錄規定,定期進行校正檢定。 單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式: 1 A=log — =ECL T 式中 A 為吸收度; T 為透光率; E 為吸收系數,採用的表示方法是(E1% 1cm),即吸收度換算成溶液濃度為1%(g/ml),液層厚度為1cm的數值; C 為100ml溶液中所含被測物質的重量,g(按乾燥品或無水物計算); L 為液層厚度 ,cm。 物質對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數後,可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區,除某些物質對光有吸收外,很多物質本身並沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色後再測定,故又稱比色分析。由於顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應用標准品或對照品同時操作。
分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器。常用於核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
分光光度計的簡單原理
分光光度計計採用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光源透過測試的樣品後,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
核酸的定量
核酸的定量是分光光度計使用頻率最高的功能。可以定量溶於緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波長260 nm。每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應的系數。如:1OD 的吸光值分別相當於50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。測試後的吸光值經過上述系數的換算,從而得出相應的樣品濃度。測試前,選擇正確的程序,輸入原液和稀釋液的體積,爾後測試空白液和樣品液。然而,實驗並非一帆風順。讀數不穩定可能是實驗者最頭痛的問題。靈敏度越高的儀器,表現出的吸光值漂移越大。
事實上,分光光度計的設計原理和工作原理,允許吸光值在一定范圍內變化,即儀器有一定的准確度和精確度。如Eppendorf Biophotometer的准確度≤1.0%(1A)。這樣多次測試的結果在均值1.0%左右之間變動,都是正常的。另外,還需考慮核酸本身物化性質和溶解核酸的緩沖液的pH值,離子濃度等:在測試時,離子濃度太高,也會導致讀數漂移,因此建議使用pH值一定、離子濃度較低的緩沖液,如TE,可大大穩定讀數。樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素:由於樣品中不可避免存在一些細小的顆粒,尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在干擾測試效果。為了最大程度減少顆粒對測試結果的影響,要求核酸吸光值至少大於0.1A,吸光值最好在0.1-1.5A。在此范圍內,顆粒的干擾相對較小,結果穩定。從而意味著樣品的濃度不能過低,或者過高(超過光度計的測試范圍)。最後是操作因素,如混合要充分,否則吸光值太低,甚至出現負值;混合液不能存在氣泡,空白液無懸浮物,否則讀數漂移劇烈;必須使用相同的比色杯測試空白液和樣品,否則濃度差異太大;換算系數和樣品濃度單位選擇一致;不能採用窗口磨損的比色杯;樣品的體積必須達到比色杯要求的最小體積等多個操作事項。
除了核酸濃度,分光光度計同時顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度,如A260/A280的比值,用於評估樣品的純度,因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品,比值大於1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低於1.8 或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,較純凈的核酸A260/A230的比值大於2.0。A320檢測溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品,A320一般是0。
蛋白質的直接定量(UV法)
這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg 公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然後直接測試蛋白質。由於緩沖液中存在一些雜質,一般要消除320nm 的「背景」信息,設定此功能「開」。與測試核酸類似,要求A280的吸光值至少大於0.1A,最佳的線性范圍在1.0-1.5 之間。實驗中選擇Warburg 公式顯示樣品濃度時,發現讀數「漂移」。這是一個正常的現象。事實上,只要觀察A280的吸光值的變化范圍不超過1%,表明結果非常穩定。漂移的原因是因為Warburg 公式吸光值換算成濃度,乘以一定的系數,只要吸光值有少許改變,濃度就會被放大,從而顯得結果很不穩定。蛋白質直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質。紫外直接定量法相對於比色法來說,速度快,操作簡單;但是容易受到平行物質的干擾,如DNA的干擾;另外敏感度低,要求蛋白的濃度較高。
比色法蛋白質定量
蛋白質通常是多種蛋白質的化合物,比色法測定的基礎是蛋白質構成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應,產生有色物質。有色物質的濃度與蛋白質反應的氨基酸數目直接相關,從而反應蛋白質濃度。
比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry 等幾種方法。
Lowry 法:以最早期的Biuret 反應為基礎,並有所改進。蛋白質與Cu2 反應,產生藍色的反應物。但是與Biuret 相比,Lowry 法敏感性更高。缺點是需要順序加入幾種不同的反應試劑;反應需要的時間較長;容易受到非蛋白物質的影響;含EDTA,Triton x-100,ammonia sulfate 等物質的蛋白不適合此種方法。
BCA(Bicinchoninine acid assay)法:這是一種較新的、更敏感的蛋白測試法。要分析的蛋白在鹼性溶液里與Cu2 反應產生Cu ,後者與BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波長。此化合物與蛋白濃度的線性關系極強,反應後形成的化合物非常穩定。相對於Lowry法,操作簡單,敏感度高。但是與Lowry法相似的是容易受到蛋白質之間以及去污劑的干擾。
Bradford 法:這種方法的原理是蛋白質與考馬斯亮蘭結合反應,產生的有色化合物吸收峰595nm。其最大的特點是,敏感度好,是Lowry 和BCA 兩種測試方法的2 倍;操作更簡單,速度更快;只需要一種反應試劑;化合物可以穩定1小時,方便結果;而且與一系列干擾Lowry,BCA 反應的還原劑(如DTT,巰基乙醇)相容。但是對於去污劑依然是敏感的。最主要的缺點是不同的標准品會導致同一樣品的結果差異較大,無可比性。
某些初次接觸比色法測定的研究者可能為各種比色法測出的結果並不一致,感到迷惑,究竟該相信哪種方法?由於各種方法反應的基團以及顯色基團不一,所以同時使用幾種方法對同一樣品得出的樣品濃度無可比性。例如:Keller等測試人奶中的蛋白,結果Lowry,BCA 測出的濃度明顯高於Bradford,差異顯著。即使是測定同一樣品,同一種比色法選擇的標准樣品不一致,測試後的濃度也不一致。如用Lowry測試細胞勻漿中的蛋白質,以BSA作標准品,濃度1.34mg/ml,以a球蛋白作標准品,濃度2.64mg/ml。因此,在選擇比色法之前,最好是參照要測試的樣本的化學構成,尋找化學構成類似的標准蛋白作標准品。另外,比色法定量蛋白質,經常出現的問題是樣品的吸光值太低,導致測出的樣品濃度與實際的濃度差距較大。關鍵問題是,反應後1011分光光度計的重要配件—— 比色杯的顏色是有一定的半衰期,所以每種比色法都列出了反應測試時間,所有的樣品(包括標准樣品),都必須在此時間內測試。時間過長,得到的吸光值變小,換算的濃度值降低。除此,反應溫度、溶液PH值等都是影響實驗的重要原因。此外,非常重要的是,最好是用塑料的比色法。避免使用石英或者玻璃材質的比色杯,因為反應後的顏色會讓石英或者玻璃著色,導致樣品吸光值不準確。
細菌細胞密度(OD 600)
實驗室確定細菌生長密度和生長期,多根據經驗和目測推斷細菌的生長密度。在遇到要求較高的實驗,需要採用分光光度計准確測定細菌細胞密度。OD600是追蹤液體培養物中微生物生長的標准方法。以未加菌液的培養液作為空白液,之後定量培養後的含菌培養液。為了保證正確操作,必須針對每種微生物和每台儀器用顯微鏡進行細胞計數,做出校正曲線。實驗中偶爾會出現菌液的OD值出現負值,原因是採用了顯色的培養基,即細菌培養一段時間後,與培養基反應,發生變色反應。另外,需要注意的是,測試的樣品不能離心,保持細菌懸浮狀態。
分光光度計的重要配件—— 比色杯
比色杯按照材質大致分為石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根據不同的測量體積,有比色杯和毛細比色杯等。一般測試核酸和紫外定量蛋白,均採用石英杯或者玻璃杯,但是不適合比色法測定。因為反應中的染料(如考馬斯亮蘭)能讓石英和玻璃著色,所以必須採用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不適合用於在紫外范圍內測試樣品。
由於另外測試的樣品量不同,所以一般分光光度計廠家提供不同容積的比色杯以滿足用戶不同的需求。目前市場已經存在一種既可用於核酸、紫外蛋白質定量,亦可用於蛋白比色法測定的塑料杯,樣品用量僅需50μl,比色杯單個無菌包裝,可以回收樣品。如Eppendorf UVette塑料比色杯,是目前比色杯市場上一個革新。隨著生命科學以及相關學科發展,對此類科學的實驗研究提出更高的要求,分光光度計將是分子生物學實驗室不可缺少的儀器,也成為微生物、食品、制葯等相關實驗室的必備設備之一。
隨著科技的發展,現在比色杯已經不是使用分光光度計時的必備物品。目前國外Nanodrop公司(現已被Thermo Fisher公司收購)生產的ND1000分光光度計與舊式分光光度計相比,已經可以做到無需稀釋樣品,無需使用比色杯,每次測量僅需1-2μl樣品即可完成測量。

⑦ 紫外_可見分光光度法,用吸收系數法定量,公式是什麼

一、原理可見光、紫外線照射某些物質,主要是由於物質分子中價電子能級躍遷對輻射的吸收,而產生化合物的可見紫外吸收光譜。基於物質對光的選擇性吸收的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法。它是以朗伯──比耳定律為基礎。1朗伯—比耳定律A=lg—-=ECLT式中A為吸收度;T為透光率;E為吸收系數,採用的表示方法是(E1%1cm),其物理意義為當溶液濃度為1%(g/ml),液層厚度為1cm時的吸收度數值;C為100ml溶液中所含被測物質的重量(按乾燥品或無水物計算),g;L為液層厚度,cm。二、使用范圍凡具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物,根據在特定吸收波長處所測得的吸收度,可用於葯品的鑒別、純度檢查及含量測定。三、儀器可見-紫外分光光度計。其應用波長范圍為200~400nm的紫外光區、400~850nm的可見光區。主要由輻射源(光源)、色散系統、檢測系統、吸收池、數據處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。本儀器是根據相對測量的原理工作的,即先選定某一溶劑(或空氣、試樣)作為標准(空白或稱參比)溶液,並認為它的透光率為100%(或吸收度為0),而被測的試樣透光率(或吸收度)是相對於標准溶液而言,實際上就是由出射狹縫射出的單色光,分別通過被測試樣和標准溶液,這兩個光能量之比值,就是在一定波長下對於被測試樣的透光率(或吸收度)。本儀器可精密測定具有芳香環或共軛雙鍵結構的有機化合物、有色物質或在適當條件下能與某些試劑作用生成有色物的物質。使用前應校正測定波長並按儀器說明書進行操作。四、儀器的校正1.波長的准確度試驗以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示,應在±1.0nm范圍內。可用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正。2.吸收度的准確度試驗3.雜散光的試驗4.波長重現性試驗5.解析度試驗五、測定方法1.對照品比較法(1)按各品種項下的方法,分別配製供試品溶液和對照品溶液,對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分標示量的100±10%,所用溶劑也應完全一致,在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸收度後,按下式計算含量,即得。(2)計算式A樣×G對/稀釋倍數×100×1含量(%)=————————————--×100%A對×G樣/稀釋倍數×100×12.吸收系數法(1)按各品種項下的方法配製供試品溶液,在規定的波長處測定其吸收度,再以該品種在規定條件下的吸收系數計算含量。用本法測定時,應注意儀器的校正和檢定。(2)計算式A樣含量(%)=——————————————-×100%G樣/稀釋倍數×(E1%1cm)對×100×13.計算分光光度法採用計算分光光度法應慎重。本法有多種,使用時均應按各品種項下規定的方法進行。當吸收度處在吸收曲線的陡然上升或下降的部位測定時,波長的微小變化可能對測定結果造成顯著影響,故對照品和供試品測試條件應盡可能一致。若測定時不用對照品,如維生素A測定法,則應在測定時對儀器作仔細的校正和檢定。六、注意事項1.空白溶液與供試品溶液必須澄清,不得有渾濁。如有渾濁,應預先過濾,並棄去初濾液。2.測定時,除另有規定外,應以配製供試品溶液的同瓶溶劑為空白對照,採用1cm的石英吸收池。3.在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度,以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確,除另有規定外,吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內;否則應考慮該試樣的真偽、純度以及儀器波長的准確度,並以吸收度最大的波長作為測定波長。4.一般供試品溶液的吸收度讀數,以在0.3~0.7之間的誤差較小。5.吸收池應選擇配對,否則要引入測定誤差。

⑧ 求教使用紫外分光光度計測定人血紅蛋白溶液的濃度

是可以測定的,具體的波長可以問問庚辰諾頂的專業技術人員吧,我也不是很清楚

⑨ 紫外分光光度計純水吸光度

「進行分光光度計調節時,將高純水推入光路調節100%透光比」這是正確的做法
「水樣顯色反應後測得到的吸光度減去高純水作為水樣進行顯色反映後測得的吸光度」這是正確的原理,lz說的對

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與紫外分光光度計用的純化水相關的資料

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