Ⅰ 配製培養基時不小心撒了一點氯化鈉,然後憑感覺加了一點進去 有誤差的話影響大嗎 會不會要重做
肯定會用些影響的,最好是重做一份。
可以看下下面的培養基配製的注意事項:
培養基是絕大多數微生物試驗的基礎。因此,培養基的質量是微生物試驗成功與否的關鍵因素。適宜的中海生物技術培養基制備方法、貯藏條件和質量控制試驗是提供優質培養基的保證。
⑴培養基可按處方制備也可使用按處方生產的符合規定的商品化成品培養基,脫水培養基除附有處方和使用說明外還應註明有效期、貯存條件、適用性試驗的質控菌株和用途。配製時應按使用說明上的要求操作,受潮結塊不能使用,以確保培養基的質量符合要求。
⑵配製培養基使用的容器應是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角燒瓶、刻度吸管、試管、培養皿等。使用的器皿應 洗凈,用蒸餾水沖凈,烘乾後方可使用。禁用金屬容器如鐵、銅、鋁容器,避免金屬離子與培養基成分結合,生成有害物質,影響細菌生長。
⑶培養基若於非潔凈的玻璃器皿中制備,可能導致抑菌物質進入培養基中。抑菌物質可能是殘留的玻璃器皿清潔用的清潔劑或之前玻璃器皿所盛裝的物質。因此。應使用純化水完全沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質的殘留,並進行清除污物的確認。
⑷ 配製培養基最常用的溶劑是純化水,特殊情況下需要用去離子水和蒸餾水,對熱敏感的培養基應用滅菌水和無菌容器配製與分裝,配製時若需加熱助溶應注意溫度不要過高
⑸、對配製培養基的過程作詳細的記錄,記錄內容包括:配製日期、培養基名稱、成分、配製數量、質量監控結果等進行全面詳細記錄。
Ⅱ 微生物培養基的配製原則有哪些(望詳解)
培養基的制備和質量控制-培養基的制備
培養基是微生物測定的基礎,培養基的質量因而成了保證微生物實驗成功的關鍵。培養基的制備、合理的貯存、培養基的質量檢驗,能確保提供持續高質量的培養基。在按照可接受的來源和標准中的配方制備培養基的過程中,重要的是選擇正確的培養基和成分。與脫水和制備好的培養基一起的還常常伴有供應商的配方和說明。因為不同的培養基可能有不同的制備要求(如:加熱、填加物、
ph值的調節等),按照說明確保制備可接受的培養基是重要的。一份描述效期和建議貯存條件的COA是同制備好的培養基一起的,同時附有用於培養基的促生長試驗和靈敏度測試的菌種。
水普遍用於微生物培養基的稀釋。純化水是最常用的,但是在有些情況下,也用去離子水和蒸餾水。稀釋用水的體積應該記錄。
使用脫水培養基和培養基組分來制備培養基時要准確稱量。使用己校正的具有適合的稱量范圍的天平。使用清潔的容器和工具,防止配方中帶入外來物質,改變培養基的最終組成。稱量也應該記錄。
脫水培養基先在水中分散,並完全溶解和滅菌。如果必要可以加熱使溶解,但要防止過度加熱,因為所有的培養基或多或少有對熱敏感的。用於培養基制備的設備應適於加熱控制,持續攪拌,溶質混合。培養基變黑(梅特拉反應和非酶的棕色著色劑)通常顯示過度加熱。當需要向培養基中添加補充物時,添加後應充分混合。
制備好的培養基應放在清潔無菌的玻璃器具中,也可以加入抑制性物質。抑制性物質可以由器具清潔時產生也可由先前貯存在此器具的物質產生。必須確保清潔過程能有效去除殘留和異物,確保清潔劑用純化水充分清洗。參見《1051玻璃器具的清洗》。
培養基的滅菌應根據供應商提供的參數或用戶自己的驗證。買來的制備好的培養基應提供其使用的滅菌方法的文件。理想的供應商應提供培養基的滅菌保證水平(SAL),此水平是依靠公認的生物指示劑確定的。濕熱高壓滅菌是首選的滅菌技術,除了一些為避免培養基中的熱敏物質遭到破壞而採用的煮沸方法。通過過濾滅菌對有些配方也是合適的。
培養基的滅菌方法、滅菌條件的效果應通過培養基的滅菌和促生長試驗來驗證。另外,如果通過濕熱滅菌,滅菌周期應經過驗證,對選擇合適的負載和體積來確保合適的熱分布。通常供應商建議採用一個已校正過的滅菌高壓鍋,在121°滅菌15分鍾。通常指培養基達到溫度的時間。當滅菌鍋負載結構影響加熱的速度是時,越多的負載就需要越長的滅菌周期。然而,滅菌的時間取決於培養基的體積和高壓鍋的負載。滅菌周期中,當溫度是慢慢上升時,可能導致培養基的過度加熱。因此,必須仔細確認能達到最小的SAL要求的滅菌周期,在過度加熱時,抑制培養基降解的趨勢。在流體循環完成後,不主張放冷後的培養基中放在滅菌鍋中貯存,因為這樣可能破壞培養基。不合適的加熱或滅菌(對買來的培養基或是內部制備的培養基)可能導致顏色的不同變化,不透明,改變培養基的規格,或是PH發生漂移(與供應商的提議范圍)。
通過無菌技術為測試制備的每一批培養基其PH在放冷至室溫(25°)後,都應測定。一個扁平的pH計用於培養基表面pH值的測定,浸入式的pH計用於液體的測定。各供應商提供的培養基的pH應該在規定的±0.2的范圍內,除非通過驗證得到更寬的范圍。
制備培養基應對培養皿和試管進行適當如下的檢查:
有裂紋的容器和蓋子;
容器內不同的填充體積;
有裂紋容器內可導致脫水的結果或是固體培養基表面起皺;
溶血;
額外黑或顏色改變;
可能過冷引起的結晶;
過量的氣泡;
微生物的污染;
氧化顯示的情況;
批號、效期的檢查和記錄;
培養基的滅菌。
Ⅲ 微生物配置培養基用什麼水
不同的來培養基選用不同的水
細胞培養基源一般用新鮮三蒸水或Millipore超純水(分子生物學及生命科學,動物細胞及植物細胞培養,組織培養,試管嬰兒,電泳、凝膠分析,生物工程,培養基制備)
醫院檢驗科培養病人標本的培養基用的是普通蒸餾水
現在有的實驗室使用的是反滲透純水,應用:① 實驗室器皿的最後清洗② 緩沖液、化學試劑配製用水③ 微生物培養基制備用水④ 氫氣發生器、室內加濕器、高壓消毒鍋用純水⑤ 人或實驗動物飲用水等
超純水的應用① 醫院、醫葯制劑室及中心供應室用純化水和高純水② 各種醫療用生化儀、分析儀、血液透析儀用水③ 分析試劑及葯品配置稀釋用水④ 生理、病理、毒理學實驗用水⑤ 動、植物細細胞培養用水⑥ 原子吸收光譜用水⑦ 試管嬰兒用水⑧ 各種高效液相色譜、離子色譜用水⑨ 其他各種實驗室用水和醫葯用水
Ⅳ 實驗室純水分幾個等級
實驗室純水分四個等級,即:
1、蒸餾水:
實驗室最常用的一種純水,雖設備便宜,但極其耗能和費水且速度慢,應用會逐漸減少。蒸餾水能去除自來水內大部分的污染物。
2、去離子水:
應用離子交換樹脂去除水中的陰離子和陽離子,但水中仍然存在可溶性的有機物,可以污染離子交換柱從而降低其功效,去離子水存放後也容易引起細菌的繁殖。
3、反滲水:
反滲水克服了蒸餾水和去離子水的許多缺點,利用反滲透技術可以有效的去除水中的溶解鹽、膠體,細菌、病毒、細菌內毒素和大部分有機物等雜質。
4、超純水:
超純水在TOC、細菌、內毒素等指標方面並不相同,要根據實驗的要求來確定,如細胞培養則對細菌和內毒素有要求,而HPLC則要求TOC低。
拓展資料:
實驗室純水的分類與標准:國家實驗室純水標准(GB/T 6682)依據水的純度(水的導電性)分1、2、3級,1級電導率小於0.1μs/cm;2級電導率小於1.0μs/cm;3級電導率小於5.0μs/cm;
泉瑞QTCJ系列小型去離子水設備可滿足用戶的不同需求,產水水量10L-50L/h,水質完全符合國家實驗室1、2、3級標准,不同級別的水其生產工藝、生產產本相差較大,所以其用途也相以區分。
三級水是**級別的實驗室級純水,推薦用於玻璃器皿洗滌;水浴、高壓滅菌鍋用水以及超純水系統的進水。
二級水一般用於常規實驗室應用,比如緩沖液、pH 溶液及微生物培養基的制備;為超純水系統、臨床生化分析儀、培養箱、老化機供水;也可為化學分析或合成制備試劑。
一級水往往用於嚴格的實驗應用,如HPLC 流動相制備;GC 空白樣制備和樣品稀釋、HPLC、AA、ICP-MS等高精度分析技術;緩沖液、哺乳動物培養基制備及試管嬰兒;分子生物學試劑制備(DNA 測序、PCR 擴增等);電泳及雜交實驗溶液配製等。
通常我們實驗室工作人員為了實驗的准確與精確性,採用一級標準的水用於二級水的實驗應用中。
Ⅳ 培養基的制備原則和要求是什麼
培養基是根據各類微生物生長繁殖的需要,用人工方法把多種物質混合而成的營養物。一般用來分離、培養菌類。常用的培養基有基礎培養基、增菌培養基、選擇培養基、鑒別培養基和厭氧培養基。在制備培養基時,應掌握如下原則和要求:
(一)培養基必須含有細菌生長繁殖所需要的營養物質。所用的化學葯品必須純凈,稱取的份量務必准確。
(二)培養基的酸鹼度應符合細菌生長要求。按各種培養基要求准確測定調節pH值。多數細菌生長的適宜pH值為7.2~7.6,呈弱鹼性。
Ⅵ 純化水微生物限度檢查方法
在醫葯的生產過程中,純化水的質量是關繫到葯品質量的一個首要原因。純化水在生產,儲存和運輸的過程中,非常容易受到微生物的污染,因此對於水質的日常檢測是質量部門一個重要工作。對於純化水微生物限度檢查,各國所使用的方法不外乎與培養基澆注法,塗布法,膜過濾法,以及最大可能數法,最大的區別在於所使用的培養基不同。
我總結了以下對於純化水微生物限度檢查方法,同時我司熟悉純化水檢測相關標准和檢測項目要求,可提供專業、可靠的純化水檢測服務,出具國家認可的純化水微生物限度檢查報告。cma資質認證如下:
對於活力比較強的微生物,在高營養性培養基上可以快速大量的生長,而對於活力比較差的微生物,生長速度會比較緩慢。在日常生活中,這兩種微生物經常會同時出現由由於它們的生長速率不同,會產生無法完全檢出的現象,因此高營養性培養基和低營養性培養基常常會同時使用來提高微生物的檢出率,
培養的溫度和時間同樣是影響檢測的條件,高營養性培養基通常在30-35℃培養48-72小時,但是在同一個系統中,培養的時間越長,可以檢出的微生物數量就越多,低營養性培養基就在這時候被設計出來,有些培養基的培養時間甚至達到14天,可以至大化的復甦低營養性微生物及受損傷的微生物。但是檢測周期的延長,對於工作效率來說,是很不利的,因此我們需要一個既能保證效率,又能保證檢出率的辦法。
在比較了中國葯典,美國葯典中所記載的方法,中國葯典中純化水微生物檢查所用到的培養基是 R2A 瓊脂培養基,在30-35℃培養大於5天。美國葯典中對於純化水的微生物檢測用何種培養基沒有做強制性規定,只要求在水系統確認驗證及周期性確認驗證時,使用適當的方法對水系統中的微生物做出評價即可。
《中國葯典》2010版、2015版以及2020版純化水微生物限度檢查中表示,生產企業必須確保純化水的質量符合葯典要求,但葯典對於純化水的規定其實也只是至低水平,滿足了葯典的標准不一定就能保證符合企業預期用途的要求。因此,開展純化水微生物限度檢查直接影響到生產產品的安全質量,中科檢測具有純化水微生物限度核查檢測,具有獨立實驗室,報告具有CMA和CNAS資質。
Ⅶ 純化水採用的r2a培養基原理是什麼
純化水採用的r2a培養基原理如下:
1、r2a培養基可以修復被氯氣損傷的細菌,支持專耐受氯氣的微生物的屬生長。
2、r2a培養基中的酵母浸出粉、蛋白腖、酸蛋白水解物提供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖、為可發酵糖類;可溶性澱粉可以吸收菌在復甦過程產生的有害物質;
3、r2a培養基中的丙酮酸鈉可增強細菌的復甦。
4、r2a培養基中的磷酸二氫鉀為酸鹼緩沖劑,無水硫酸鎂提供二價陽離子,瓊脂為凝固劑。
Ⅷ 配製培養基的流程
不是啊用靈敏度為0.1mg的天平稱取葯品.
(2) 往燒杯加入適量蒸餾水或無菌水.
(3) 將葯品放入燒杯內,並用玻璃棒攪拌使其溶解,難溶時可適當加溫以加速溶解.
(4) 要待一種葯品完全溶解後再加入下一種葯品.
(5) 所加入的葯品應依次加入,直至葯品全部加入溶解為止。 例MS母液的配製
按MS培養基成分表,將各種化學物質歸成幾大類,分別為大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物。 大量元素10倍液(mg/L)微量元素1000倍液(mg/L)有機物100倍液(mg/L)鐵鹽NH4NO3 1,6500
KNO3 1,9000
CaCl2?2H2O 4,400
MgSO4?7H2O 3,700
KH2PO4 1,700HBO3 6,200
MnSO4?4H2O 22,300
ZnSO4?7H2O 8,600
KI 830
Na2MoO4?2H2O 250
CuSO4?5H2O 25
CoCl2?6H2O 25甘氨酸 200
肌醇 10,000
煙酸 50
維生素B6 50
維生素B1 405.57g FeS04?7H2O和7.45g Na2一EDTA溶於1升蒸餾水裡,用時每配1升MS培養基取5ml。取燒杯注入約600ml蒸餾水,按順序加入葯品並使其溶解,最後加蒸餾水定容至1000ml。取燒杯注入約600ml蒸餾水,按順序加入葯品並使其溶解,最後加蒸餾水定容至1000ml。 2. 培養基制備
配製流程見圖1-2,其順序是:
① 取燒杯或三角瓶注入一定量的蒸餾水,將各種母液按所需容積分別用移液管吸取並混合在一起,然後按要求加入一定量的激素、蔗糖後定容至一定體積。
② 用1mol/L的NaOH或HCl調節pH
③ 如制固體培養基,則加入1%左右的瓊脂後加熱煮沸,使其熔化。
④ 分裝,可用漏斗將液狀培養基注入培養瓶,注入量視培養瓶容量大小而定,通常為容器的1/5左右。
⑤ 封瓶口。
⑥ 高壓蒸汽滅菌。120℃,1.5Mpa,消毒15~20min。注意壓力不能太大,時間也不宜過長,否則蔗糖、有機物特別是維生素類物質會在高溫下分解,影響培養基的酸鹼度,瓊脂也會分解,顏色變深且不易凝固。
⑦ 滅菌後的培養基可放入接種室內靜置,讓其降溫後凝固,如需斜面可將其斜放。
Ⅸ 請問純化水的微生物檢測的培養基用什麼
CP用營養瓊脂培養細菌、玫瑰紅納瓊脂培養黴菌及酵母
USP用SCDA培養總需氧菌、SDA培養黴菌及酵母