PCR級無離子純水

『壹』 pcr 去離子水

diH2O是去離子水,ddH2O是雙蒸水,不太一樣,但我覺得在PCR體系裡完全可以相互替代.

『貳』 去離子水，超純水，純水三者有什麼區別

蒸餾水、去離子水、高純水、超純水各有什麼區別 ：

天然水中通常含有五種雜質:

• 電解質,包括帶電粒子,常見的陽離子有H+、Na+、K+、NH4+、、Mg2+、Ca2+、Fe3+、Cu2+、Mn2+、Al3+等；陰離子有F-、Cl-、NO3-、HCO3-、SO42-、PO43-、H2PO4-、HSiO3-等.

2.有機物質,如:有機酸、農葯、烴類、醇類和酯類等.

3.顆粒物.

4.微生物.

5.溶解氣體,包括：N2、O2、Cl2、H2S、CO、CO2、CH4等.

所謂水的純化,就是要去掉這些雜質.雜質去的越徹底,水質也就越純凈

1.蒸餾水：就是將水蒸餾、冷凝的水,

2.去離子水就是將水通過陽離子交換樹脂（常用的為苯乙烯型強酸性陽離子交換樹脂）,則水中的陽離子被樹脂所吸收,樹脂上的陽離子H+被置換到水中,並和水中的陽離子組成相應的無機酸；

3.高純水,是指化學純度極高的水,其主要應用在生物、化學化工、冶金、宇航、電力等領域,

4.、超純水,水的電阻率大於18MΩ*cm（沒有明顯界線）,則稱為超純水.關鍵是看你用水的純度及各項征性指標,如電導率或電阻率,PH值,鈉,重金屬,二氧化硅,溶解有機物,微粒子,以及微生物指標等.

『叄』 實驗室純水分幾個等級

實驗室純水分四個等級，即：

1、蒸餾水：

實驗室最常用的一種純水，雖設備便宜，但極其耗能和費水且速度慢，應用會逐漸減少。蒸餾水能去除自來水內大部分的污染物。

2、去離子水：

應用離子交換樹脂去除水中的陰離子和陽離子，但水中仍然存在可溶性的有機物，可以污染離子交換柱從而降低其功效，去離子水存放後也容易引起細菌的繁殖。

3、反滲水：

反滲水克服了蒸餾水和去離子水的許多缺點，利用反滲透技術可以有效的去除水中的溶解鹽、膠體，細菌、病毒、細菌內毒素和大部分有機物等雜質。

4、超純水：

超純水在TOC、細菌、內毒素等指標方面並不相同，要根據實驗的要求來確定，如細胞培養則對細菌和內毒素有要求，而HPLC則要求TOC低。

拓展資料：

實驗室純水的分類與標准：國家實驗室純水標准（GB/T 6682）依據水的純度（水的導電性）分1、2、3級，1級電導率小於0.1μs/cm；2級電導率小於1.0μs/cm；3級電導率小於5.0μs/cm；

泉瑞QTCJ系列小型去離子水設備可滿足用戶的不同需求，產水水量10L-50L/h，水質完全符合國家實驗室1、2、3級標准，不同級別的水其生產工藝、生產產本相差較大，所以其用途也相以區分。

三級水是**級別的實驗室級純水，推薦用於玻璃器皿洗滌；水浴、高壓滅菌鍋用水以及超純水系統的進水。

二級水一般用於常規實驗室應用，比如緩沖液、pH 溶液及微生物培養基的制備；為超純水系統、臨床生化分析儀、培養箱、老化機供水；也可為化學分析或合成制備試劑。

一級水往往用於嚴格的實驗應用，如HPLC 流動相制備；GC 空白樣制備和樣品稀釋、HPLC、AA、ICP-MS等高精度分析技術；緩沖液、哺乳動物培養基制備及試管嬰兒；分子生物學試劑制備(DNA 測序、PCR 擴增等)；電泳及雜交實驗溶液配製等。

通常我們實驗室工作人員為了實驗的准確與精確性，採用一級標準的水用於二級水的實驗應用中。

『肆』 實驗室超純水設備

杭州永潔達凈化科技有限公司實驗室級超純水器，選擇國外著名廠商的配件，採用多級預過濾、反滲透、核子級混床樹脂純化、雙波長紫外線消解等國外先進處理技術和本公司獨特的工藝設計，確保產品卓越的性能及其穩定性。整機一體化設計，集預處理系統、RO系統、超純水系統、後處理系統於一體，易於操作、維護。還可以根據用戶需要輕松實現功能升級。
1.超純水制備原理
杭州永潔達實驗室超純水器通常由原水預處理系統、反滲透純化系統、超純化後處理系統三部分組成。預處理的目的主要是使原水達到反滲透膜分離組件的進水要求，保證反滲透純化系統的穩定運行。反滲透膜系統是一次性去除原水中98%以上離子、有機物及100%微生物（理論上）最經濟高效的純化方法。超純化後處理系統通過多種集成技術進一步去除反滲透純水中尚存的微量離子、有機物等雜質，以滿足不同用途的最終水質指標要求。
2.原水預處理系統
預處理系統通常由聚丙烯纖維（PP）過濾器和活性炭（AC）過濾器組成。對硬度較高的原水還需加裝軟化樹脂過濾器。PP濾芯可高效去除原水中5μm以上的機械顆粒雜質、鐵銹及大的膠狀物等污染物，保護後續過濾器，其特點是納污量大, 價格低廉。AC活性炭濾芯可高效吸附原水中余氯和部分有機物、膠體，保護聚醯胺反滲透復合膜免遭余氯氧化。軟化樹脂可脫除原水中大部分鈣鎂離子，防止後續RO膜表面結垢堵塞，提高水的回收率。
3.反滲透純化系統
反滲透（Reverse Osmosis，簡稱RO）是以壓力差為推動力的一種高新膜分離技術，具有一次分離度高、無相變、簡單高效的特點。反滲透膜「孔徑」已小至納米（1nm=10-9m），在掃描電鏡下無法看到表面任何「過濾」小孔。在高於原水滲透壓的操作壓力下，水分子可反滲透通過RO半透膜，產出純水，而原水中的大量無機離子、有機物、膠體、微生物、熱原等被RO膜截留。
通常當原水電導率<200μS/cm時，一級RO純水電導率≤5μs/cm，符合實驗室三級用水標准。對於原水電導率高的地區，為節省後續混床離子交換樹脂更換成本，提高純水水質，客戶可考慮選擇二級反滲透純化系統，二級RO純水電導率約1~5μS/cm，與原水水質有關。
4.超純化後處理系統
①混床離子交換純化柱
混床離子交換純化柱由陰離子交換樹脂和陽離子交換樹脂按比例混合而成。陽離子交換樹脂用其H＋交換去除水中的陽離子，陰離子交換樹脂用其OH－交換去除水中的陰離子，在混床樹脂中被交換出來的H＋和OH－結合生成H2O，因此混床離子交換純化柱可用來深度去除RO純水中尚存的微量離子。小型實驗室超純水器中的混床離子交換純化柱通常為一次性使用。永潔達混床離子交換純化柱採用原裝進口核級混床樹脂，其產水電阻率可達18.2MΩ.cm。
②EDI裝置
連續電去離子EDI（Electrodeionization的縮寫），是利用混床離子交換樹脂吸附給水中的陰陽離子，同時這些被吸附的離子又在直流電壓的作用下分別透過陰陽離子交換膜而被連續去除的過程。這一新技術可以代替傳統的離子交換（DI），產出10MΩ.cm以上的超純水。EDI深度除鹽的最大優點是可長期穩定運行，無需用酸鹼再生陰陽樹脂，十分適合造水量100L/h以上的超純水中央制備系統，水質穩定，並將大大降低運行成本，TOC也將更低更穩定。永潔達EDI裝置通常的產水電阻率約15~18MΩ.cm。
③除熱原超濾膜
超濾除熱原已廣泛用於現代制葯行業。超濾（Ultrafiltration，縮寫「UF」）膜的孔徑介於反滲透和微濾之間（約0.01～0.1μm），通常用最小截留分子量來表示。永潔達除熱原超濾膜採用截留分子量為5000道爾頓的聚碸膜，可徹底去除水中熱原（其最小分子量通常大於7000）及各類微生物。
④紫外線殺菌燈與TOC紫外消解器
紫外線殺菌燈採用254nm波長的紫外線照射殺菌，可有效破壞微生物的DNA分子，使之形成TT兩聚體而無法繁殖，是空氣、水安全有效的常用滅菌方法。TOC紫外消解器採用可同時產生185nm/254nm雙波長的紫外線燈管，其中185nm紫外線在空氣中可產生臭氧而殺菌除味，在水中會產生氫氧自由基，可將純水中微量有機物迅速氧化為CO2，達到去除TOC的目的。
⑤終端過濾器
孔徑0.22um的終端過濾器可徹底濾除細菌、真菌及孢子、樹脂碎片及一切微米級污染物。終端過濾器形式有中空纖維式、PP桶過濾器、囊式過濾器、針頭式濾器等，膜材質有聚丙烯、尼龍、聚偏氟乙烯等。
5.應用：
HPLC、TOC分析、原子吸收光譜、離子色譜分析、質量光譜分析、微量金屬測定、鑒定用溶量配製、微生物學分析、組織培養、樣品稀釋、鑒定用玻璃器皿洗滌、及TCEP和TCEI系列適用范圍、DNA測序、PCR和電泳、試管培養抗體製取等。普通的定性分析、尿分析、組織檢查、寄生蟲檢查、玻璃器具清洗：檢查室的分析，微生物檢查；各自動化設備的分析用水、沖洗用水、理化性分析，高精度儀器清洗；血液、血清檢查，質譜分析、原子吸收等用水；AA、ICP細胞培養，氣相色譜分析，組織培養基的配製等用水；低波長的HPLC、TOC、IC、GC/MS、IVF中的細胞培養，氨基酸分析，分子生物學實驗，PCR、基因研究及細胞培養等用水。

杭州永潔達專業的實驗室超純水器生產單位， HYJD系列是優於實驗室一級用水標準的純水機。

『伍』 求助：做PCR用什麼水的效果是最好的

因為你已經加了Buffer有了一個緩沖條件，理想狀態下，新鮮制備的蒸餾水也是可行的。
但為了保證PCR質量，減少麻煩，大家的做法是使用滅菌的去離子水。
水到不必最純凈，但是一定要保證無核酸酶最重要。一般滅菌都能除去dna酶，rna要是特別在意就用depc處理。

不厚道的說一下，你沒有師兄師姐么，這種入門的東西問一下就知道了，幹嘛還發這種帖子。

溝通是科研第一要務。

『陸』 請問PCR用的滅菌蒸餾水可以用普通飲用純凈水滅菌後使用嗎

這得看你純進水的純度了！如果質量不錯的話，應該問題不大！如果各種離子回的含量過高，那你的PCR結果會答很不穩定，同時有些會P不出來！尤其是Mg離子的濃度！解決辦法當然是想辦法去掉水裡面的多餘離子，我們用的都是去離子機器去除

『柒』 超純水，去離子水，三級水和純水有什麼區別

蒸餾水、去離子水、高純水、超純水各有什麼區別 ：

天然水中通常含有五種雜質:

• 電解質,包括帶電粒子,常見的陽離子有H+、Na+、K+、NH4+、、Mg2+、Ca2+、Fe3+、Cu2+、Mn2+、Al3+等；陰離子有F-、Cl-、NO3-、HCO3-、SO42-、PO43-、H2PO4-、HSiO3-等.

2.有機物質,如:有機酸、農葯、烴類、醇類和酯類等.

3.顆粒物.

4.微生物.

5.溶解氣體,包括：N2、O2、Cl2、H2S、CO、CO2、CH4等.

所謂水的純化,就是要去掉這些雜質.雜質去的越徹底,水質也就越純凈

1.蒸餾水：就是將水蒸餾、冷凝的水,

2.去離子水就是將水通過陽離子交換樹脂（常用的為苯乙烯型強酸性陽離子交換樹脂）,則水中的陽離子被樹脂所吸收,樹脂上的陽離子H+被置換到水中,並和水中的陽離子組成相應的無機酸；

3.高純水,是指化學純度極高的水,其主要應用在生物、化學化工、冶金、宇航、電力等領域,

4.、超純水,水的電阻率大於18MΩ*cm（沒有明顯界線）,則稱為超純水.關鍵是看你用水的純度及各項征性指標,如電導率或電阻率,PH值,鈉,重金屬,二氧化硅,溶解有機物,微粒子,以及微生物指標等.

『捌』 基因測序，pcr對純水有什麼要求

PCR產物直接測序技術現已成為分子生物學和基因組學研究中的一個重要技術,廣泛用於基因突變檢測、遺傳性疾病診斷、單核苷酸多態性研究、基因組重疊序列群等.與傳統克隆測序技術相比較,直接對PCR擴增的DNA進行測序,省去了耗時的克隆步驟,避免了傳統的細菌培養,模板提取等重復性操作,可以從少量的原始樣品中得到正確的DNA序列信息.PCR產物直接測序技術具有快速、簡便、穩定經濟的優點. 試驗試劑 PCR擴增的雙鏈DNA模板長約20個核苷酸的DNA引物 DNA聚合酶測序膠 0.1mol/L DDT α-32P-dATP dNTP/ddNTP混合物(80μmol/L/8μmol/L) dNTP(dCTP、dGTP 、dTTP 各0.75μmol/L) 測序反應緩沖液：40mmol/L Tris-HCl(pH7.5),20mmol/L MgCl2,50mmol/L NaCl 終止緩沖液：95% 甲醯胺,20mmol/L EDTA,0.05% 溴酚藍,0.05% 二甲苯腈試驗步驟： 1、 4個微量離心管中各加入dNTP/ddNTP混合物2.5μl,混合物37OC溫浴5min,備用. 2、 在一個空的微量離心管中加入1pmol的PCR擴增雙鏈DNA,10pmol測序引物,2μl 5×測序緩沖液,加雙蒸水至總體積10μl,96OC加熱8min,冰浴泠卻1min,4OC 10000g離心10s. 3、 加入2μl預冷的標記混合物(dCTP、dGTP 、dTTP 各0.75μmol/L),α-32P-dATP 5μCi,1μl 0.1mol/L DDT,測序酶2U,加水至15μl,混勻後置冰上2min,標記新合成的DNA鏈. 4、 在第1步驟的4個管中各加入3.5μl標記反應混合物,37OC溫浴5min.每管各加入4μl終止液. 5、 樣品在80OC的水浴中熱變性5min,每一泳道加2μl 加到測序膠上,電泳分離這些片段. 注意事項： 1.?PCR產物要有一定的長度(>200bp),因為測序結果兩端20-30bp的電泳峰圖的准確性較低. 2.?純化PCR產物可通過離子交換層析使擴增的DNA段與反應剩餘的dNTP及引物分離；也可通過瓊脂糖凝膠電泳,將PCR產物與非特異性擴增產物和引物分離開來；如果擴增的特異性較高時,可直接通過酚：氯仿抽提,乙醇沉澱的方法來純化. 3.?測序引物設計原則類似於PCR引物設計,可在DNA合成儀上合成20個左右的核苷酸作為引物,經過高壓液相層析或聚丙烯醯胺凝膠電泳純化後,即可用作測序引物. PCR循環測序法 PCR循環測序法是將PCR擴增和核酸序列分析技術相結合,從而形成的一種測定核苷酸序列的研究方法,也稱作線性擴增測序.該方法採用PCR儀加熱使DNA模板變性,在TaqDNA聚合酶作用下,以溫度循環模式在模板上進行多輪的雙脫氧核苷酸測序反應,線性擴增標記的DNA分子. PCR循環測序法與以往的測序方法相比,其優點在於：大大減少所需的模板量；能提高測序反應產生的信號,降低了操作的復雜性,且聚合酶的用量減少；可在小量制備的模板上進行篩選反應；高溫下進行的測序反應使DNA聚合酶催化的聚合反應能夠通過模板二級結構的區域；雙鏈閉環DNA可以直接作為反應模板應用,不用作預先鹼變性處理.由於PCR循環測序法能夠簡單、快速地檢測特定序列,因此, PCR循環測序法在核酸序列分析研究中受到廣泛的重視. 試驗試劑： DNA測序試劑盒 dNTP ddNTP 丙烯醯胺雙丙烯醯胺尿素 TEMED(N,N,N『,N』-四甲基乙二胺) 過硫酸銨 6%測序膠：6%丙烯醯胺,7mmol/L 尿素,1×TBE. 10×測序緩沖液：100mmol/L Tris-HCl(pH8.8),500mmol/L KCl,40mmol/L MgCl2,0.01%明膠,20μmol/L dATP,50μmol/L dCTP,50μmol/L dGTP,50μmol/L dTTP 終止混合液：ddATP (600μmol/L),ddCTP (600μmol/L),ddGTP (100μmol/L),ddTTP(1000μmol/L) 終止緩沖液：95%甲醯胺,20mmol/L EDTA,0.05%溴酚藍,0.05%二甲苯腈試驗步驟 1、 4個小離心管,每個小管加入3μl的終止混合液,將管子放在冰上. 2、 在DNA模板中加入引物(4pmol), 4μl 10×測序緩沖液, 10μlα-32P-dATP, 2U TaqDNA聚合酶,加雙蒸水到30μl徹底混勻,每管7μl加入上面4個小管中. 3、 反應液上加30μl的石蠟油. 4、 95OC 30S,50OC 30S,72OC 60S共30個循環,可根據具體的情況進行適當的調整循環條件及循環次數. 5、 反應結束後在油層下加入5μl的終止緩沖液並用加樣槍混勻. 6、 上樣前將樣品在大於80OC的水浴中熱變性5min,每一道加2μl加到測序膠上,電泳分離這些片段. 注意事項： 1、 制備測序模板：PCR 擴增的產物可以經過低熔點的瓊脂糖凝膠電泳純化回收後,用於序列分析；可經過柱層析純化,去除PCR 反應後剩餘的dNTP和引物後,用於序列分析.PCR 產物也可不經純化直接用於測序,但是這種測序產生的結果較差,建議測序之前應進行PCR產物的純化.各種標準的質粒制備方法所純化出的質粒均可作為測序模板使用.用標准方法制備的M13噬菌體、粘粒、λDNA都適合用作測序模板用.但要注意的是反應體系中不應有與引物互補的非目的基因序列,否則將會導致測序實驗的失敗. 2、 測序引物：測序引物是指合成的與測序模板鏈特異性互補的寡核苷酸序列.可用α-32P-dATP和T4多聚核苷酸激酶對引物的5『端進行標記,反應體系中引物、激酶和α-32P-dATP要保持在最佳的比例,以得到高比活性的標記引物；也可用α-32P-dATP標記新合成的DNA鏈.引物的濃度不宜高,否則容易形成引物二聚體,或產生非特異性的擴增引物. 3、 酶：各種缺乏3『—5『端外切活性的耐熱DNA聚合酶都可以用於循環測序,其中TaqDNA聚合酶在DNA測序中最為常用.雖然應用PCR循環測序法能夠簡單、快速的進行基因序列的測定,但仍未能適應大規模DNA序列測定的需要,而PCR循環測序法、熒游標記和自動測序儀的聯合使用成為大規模基因組測序的主要技術.該技術是採用熒游標記引物或雙脫氧核苷三磷酸,反應產物經聚丙烯醯胺凝膠電泳後,經特定的DNA序列分析儀和分析系統處理待測的DNA序列.它的應用減輕了DNA序列測定的工作量,提高了測序的效率.

『玖』 PCR實驗生理鹽水能否代替純化水

不可以
1、生理鹽水抄就襲是NaCl的水溶液 所以裡面會有Na離子和Cl離子
2、PCR過程中只需要Mg離子 其他的所有都是多餘的
3、所以使用水的時候也只能使用去離子水，既ddH2O，否則對PCR結果會有干擾
4、具體有什麼干擾 可能是條帶不清晰（產量少）甚至有些比較長鏈的DNA本來就不好P 會直接P不出來

『拾』 pcr用超純水

最好還是在冰上做啦,一次兩次沒有問題,久了多了可能問題就出來了
一般用的是滅菌的雙蒸水
保證引物的終濃度就可以.都是用水稀釋的,沒啥差別