① 離子色譜柱能用純水沖洗嗎,這樣是否會影響柱子的性能。
按看說明書或咨詢色譜柱廠商,防止損害色譜柱,離子柱都不便宜,小心為上。
用純水短時間內沖洗色譜柱,通常不會對色譜柱造成較大的損傷,但如果長時間用水沖洗色譜柱則
可能引起固定相流失和相塌陷現象,所以若非必要請盡量避免用純水沖洗色譜柱,建議在水中加入一定
量的甲醇或乙腈進行沖洗,通常水的含量<90%不會對色譜柱造成任何影響。
原因分析:
首先,由於目前所用的色譜柱大多以硅膠為基質,硅膠的溶解特點是在純水中的溶解度比在含有一
定濃度有機溶劑的流動相中要大得多,所以長時間的用純水沖洗會導致固定相的流失,引起柱效下降。
其次,對於常規的 C18 柱而言,由於C18 長鏈與水是不互溶的,C18 長鏈之間的相互作用力大於
C18 與水分子的作用力,長時間的用水沖洗,使得C18 長鏈之間相互靠近,水流的沖刷,導致相互聯結
的C18 長鏈倒伏在硅膠基質的表面,對疏水性物質的保留能力下降,即相塌陷。針對用純水沖洗容易出
現相塌陷的現象,有些廠家推出了純水柱(如我公司的UltimateTM AQ-C18 柱),這種純水柱可以用純
水作流動相而不會產生相塌陷,這對只溶於純水的樣品的分析提供了一個很好的選擇。
第三,如使用過含緩沖鹽的流動相的色譜柱,用純水沖洗,並一定能將緩沖鹽完全洗去。因為,由
於緩沖鹽難溶於有機溶劑,C18 反相柱中用的填料是在硅膠表面上接上許許多多的C18 長鏈,相當於一
個疏水的有機相,而硅膠基體被有機物質包裹著,所以用純緩沖鹽水溶液做流動相時也許緩沖鹽不容易
到達硅膠基質,不至損害基體。但所用的流動相通常會含一部分有機溶劑,而且這些有機溶劑與C18
長鏈是互溶的,因此有機溶劑的加入增強了流動相滲入硅膠基質的能力,能使部分緩沖鹽達到硅膠基質。
同樣的道理,用純水沖洗只能洗掉表面的緩沖鹽,而滲入深處的緩沖鹽則仍然殘留在那裡。所以最好在
水中加入部分有機溶劑進行沖洗,一般的C18 柱通常用含水20%~90%都可以,含水的比例要視分析
時使用的流動相來定,原則上,用於沖洗的流動相中水的比例應該等於或高於(緩沖鹽用後清洗的情況,
推薦使用「等於」)分析時所用流動相中水的比例。
② 新買的高效液相色譜柱在正式使用之前需要做什麼比如什麼配比的流動相沖洗
主要是看你購買的是哪個品牌的液相,首先應該進行性能測試,對各個部件的性能有所了解,大部分的液相都可以用乙腈比水進行沖洗系統,希望我的答案能幫到你。
③ 2、簡述反相高效液相色譜中常用的流動相系統
同一根柱子,可能是正相,也可能是反相,例如安捷倫 ZORBAX CN柱,用正己烷-異丙醇作流動相就是正相HPLC,用水-甲醇/乙腈就是反相HPLC
④ 反相鍵合相色譜中,C18柱的分離原理是什麼
針對常規C18反相色譜柱無法滿足在高水相及純水流動相條件下的液相色譜分析,採用混合鍵合的方式得到一種新型親水
⑤ 為什麼高效液相色譜要用甲醇和水做洗脫劑
因為水的極性最高,甲醇也是強極性的,如果你是做反相色譜(流動相極性強於固定相)通常就是用甲醇和水做流動相,如果是正相色譜可以使用極性較低的溶劑,如乙酸乙酯、苯之類的,一般來講液相色譜法大多數是反相色譜,所以使用甲醇水做流動相很常見,流動相可以100%的甲醇,但是沒辦法100%的水,因為純水做流動相壓力過大,儀器承受不住。
⑥ 反相液相色譜法固定相和流動相通常為哪類物質
反相色譜:流動相極性大於固定相極性的情況,稱為反相色譜。
常用的固定相:氰基、苯基、C8、C18等
常用的流動相:有機相為乙腈,甲醇,四氫呋喃,水相為超純水。調節ph值一般酸有磷酸,三氟乙酸,乙酸,三乙胺,磷酸鹽(鉀鹽和鈉鹽),乙酸鈉等。
⑦ 那些HPLC色譜柱可以用純水
你問的應該是反相色譜抄柱,因為凝膠過濾用純水相是司空見慣的。
Agilent的Bonus系列,Aichorm的Aqua系列,都是可以做純水相的。
但你如果只是考慮梯度起點的高水相比例,那就不必了,普通的C18、C8都可以用純水相短時間沖洗,不超過10個柱體積,是沒什麼問題的。
⑧ 液相色譜可以用100%水沖嗎,我的色譜柱不小心用純水沖了10分鍾左右,然後壓力就上不去了,我該怎
如果流動相里本來就有水 短時間內沒問題 切成流動相多沖一會兒就沒事了
⑨ 純水是否能通過高效液相色譜柱
看是什麼柱子,有一些做糖的柱子就是要求純水做流動相的。但一般的C8或C18柱子不行,要求最少5%有機相,以防對色譜柱傷害
⑩ 液相色譜裡面能只用水做流動相嗎
這個得看你的色譜柱。
一般的反相色譜柱不耐純水。如果用的話會特別費。專
我當初做過屬一個實驗,流動相是0.025mol/L的KH2PO4,色譜柱是C18柱,大概半個月換一根吧。
特殊的色譜柱可以耐受純水,但是可能分離效果不好,峰型也不一定好。
另外,純水很 容 易 長微生物。一般純凈水開瓶之後在25℃放置1天,過濾的速度就會緩慢,放三天就渾濁了。如果你的流動相是純水,那麼系統、色譜柱很容易堵塞。所以不建議使用。