純化水微生物檢測供試液的制備

1. 怎樣制備微生物回收實驗用的供試液

微生物限度檢查中，供試液制備方法反復提到製成1:10供試液，如「水溶性供試品：取供試品，用PH7.0無菌氣化鈉-蛋白腖緩沖液，或PH7. 2磷酸鹽緩沖液，或胰酪大豆腖液體培養基溶解或稀釋製成1:10供試液」。那麼這個1:10的供試液是怎麼配製？下面兩種做法：

1、目前多數做法，固體樣品，取10g，加入100ml稀釋液；液體樣品，取10ml，加入90ml稀釋液。

2、而有些人認為1:10是比例濃度，固體樣品，取10g，加入100ml供試液；液體樣品，是取10ml，加入100ml供試液。

從後續實驗操作過程來看，都是要求取相當於1g或1ml的供試液進行操作，另外從微生物限度判斷標准來看，也是以1g或1ml含有的菌落數報告，那麼，無疑，液體樣品的配製，取10ml，加入90ml稀釋液，這種方法是對的，利於後續實驗步驟的操作。同樣，固體樣品，也應該是配製完成後液體體積是100ml，但容量瓶不能滅菌，無法定容，同時固體樣品10g體積較小，忽略體積的話，直接加入100ml稀釋液也可以。

2. 純化水微生物限度檢查用薄膜過濾法怎麼做

准備工作：

用純化水浸泡濾膜，浸泡完全後放入濾杯中，包好濾杯，連同回量筒、培養基、平皿、答取膜器、三角燒瓶等一起121℃滅菌30min。

滅菌後的物品一並傳入潔凈室中，微生物限度過濾器上連好已經滅好的濾杯，用緩沖液先潤濕濾膜，抽掉緩沖液，然後倒入供試液（10倍稀釋），濾過，再用緩沖液沖洗濾膜。

過濾結束後取下濾膜平貼於R2A瓊脂培養基平板上，32℃倒置培養5天。菌落計數（平皿上長幾個菌結果就報幾個菌）

(2)純化水微生物檢測供試液的制備擴展閱讀：

薄膜過濾系統主要用於去除小顆粒及溶解鹽，一般可分為微濾、超濾、納濾和薄膜過濾反滲透。

微濾又稱微孔過濾，它屬於精密過濾，截留溶液中的砂礫、淤泥、黏土等顆粒和賈第蟲、隱抱子蟲、藻類和一些細菌等，而大量溶劑、小分子及少量大分子溶質都能透過膜的分離過程。

超濾是一種加壓膜分離技術，即在一定的壓力下，使小分子溶質和溶劑穿過一定孔徑的特製的薄膜，而使大分子溶質不能透過，留在膜的一邊，從而使大分子物質得到了部分的純化

納濾 ( NF，Nanofiltration)是一種介於反滲透和超濾之間的壓力驅動膜分離過程，納濾膜的孔徑范圍在幾個納米左右。

參考資料來源：網路-薄膜過濾

3. 純化水中的微生物檢測怎麼做 要詳細

採用濾膜法進來行微生物檢測源是一種國際公認的微生物標准檢驗方法，其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的葯典、FDA和EPA等組織的承認，廣泛應用於環境監測、食品及飲料工業、化妝品、制葯工業品質控制和電子工業等領域。賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產品成功地應用於濾膜法已有20多年的歷史，實用而且方便實用，它簡化了微生物檢測程序。
濾膜法微生物檢測：
將適當孔徑的濾膜放入濾器，過濾樣品，由於濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上。樣品中微生物生長抑制劑可在過濾後用無菌水沖洗濾器而除去。然後，將濾膜放在培養基上培養，營養物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換，在濾膜表面上培養出的菌落可以計數，並和樣品量相關。
濾膜法的優點：
- 與直接法比較，可以檢測大量的樣品
- 濃縮效應使微生物檢測的准確度提高
- 帶有菌落的濾膜，可作為檢測的永久記錄存檔
- 可見的菌落和樣品量直接對應，得出定量結果

操作具體一點就是：薄膜過濾法檢測，一個樣過濾一份，就是200ml的純化水通過濾膜，將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中，再接種到平皿中，製成10級、100級、1000級稀釋倍數的細菌、黴菌和酵母菌稀釋培養皿，即可

4. 中國葯典微生物限度檢查法的檢驗量和供試液制備

檢驗量即一次試驗所用的供試品量（g、ml或cm²）。
除另有規定外，一般供試品的檢驗量為10g或10ml；膜劑為100cm²；貴重葯品、微量包裝葯品的檢驗量可以酌減。要求檢查沙門菌的供試品，其檢驗量應增加20g或20ml（其中10g或10ml用於陽性對照試驗）。
檢驗時,應從2個以上最小包裝單位中抽取供試品，膜劑還不得少於4片。
一般應隨機抽取不少於檢驗用星（兩個以上最小包裝單位）的3倍最供試品。 根據供試品的理化特性與生物學特性，採取適宜的方法制備供試液。供試液制備若需加溫時，應均勻加熱，且溫度不應超過45℃。供試液從制備至加入檢驗用培養基，不得超過1小時。
除另有規定外，常用的供試液制備方法如下。
1.液體供試品
取供試品10ml，加pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液至100ml，混勻，作為l:10的供試液。油劑可加入適量的無菌聚山梨酯80使供試品分散均勻。水溶性液體制劑也可用混合的供試品原液作為供試液。
2.固體、半固體或黏稠性供試品
取供試品10g，加pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液至100ml，用勻漿儀或其他適宜的方法，混勻，作為1:10的供試液。必要時加適量的無菌聚山梨酯80，並置水浴中適當加溫使供試品分散均勻。
3.需用特殊方法制備供試液的供試品
（1）非水溶性供試品
方法1 取供試品5g（或5ml )，加至含溶化的（溫度不超過45℃）5g司盤80、3g單硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80無菌混合物的燒杯中，用無菌玻棒攪拌成團後，慢慢加人45 ℃的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液至100ml，邊加邊攪拌，使供試品充分乳化，作為1 : 20的供試液。
方法2 取供試品10g，加至含20ml無菌十四烷酸異丙酯（製法見附錄XII A無菌檢查法中供試品的無菌檢查項下）和無菌玻璃珠的適宜容器中．必要時可增加十四烷酸異丙酯的用量，充分振搖，使供試品溶解。然後加入45 ℃的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液100ml，振搖5～10分鍾，萃取，靜置使油水明顯分層，取其水層作為l : 10的供試液。
（2）膜劑供試品
取供試品100cm²，剪碎，加pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液100ml（必要時可增加稀釋液），浸泡，振搖，作為1:10的供試液。
（3）腸溶及結腸溶制劑供試品
取供試品10g，加pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液（用於腸溶制劑）或pH7.6無菌磷酸鹽緩沖液（用於結腸溶制劑）至100ml，置45 ℃水浴中，振搖，使溶解，作為1 :10的供試液。
（4）氣霧劑、噴霧劑供試品
取規定量供試品，置冰凍室冷凍約1小時，取出，迅速消毒供試品開啟部位，用無菌鋼錐在該部位鑽一小孔，放至室溫，並輕輕轉動容器，使拋射劑緩緩全部釋出。用無菌注射器吸出全部葯液，加至適量的pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液（若含非水溶性成分，加適覺的無菌聚山梨酯80）中，混勻，取相當於10g或10ml的供試品，再稀釋成1:10的供試液。
（5）貼劑供試品
取規定量供試品，去掉貼劑的保護層，放置在無菌玻璃或塑料片上，粘貼面朝上。用適宜的無菌多孔材料（如無菌紗布）覆蓋貼劑的粘貼面，以避免貼劑粘貼在一起。然後將其置於適宜體積並含有表面活性劑（如聚山梨酯80或卵磷脂）的稀釋劑中，用力振盪至少30分鍾，製成供試液。貼劑也可採用其他適宜的方法制備成供試液。
（6）具抑菌活性的供試品
當供試品有抑菌活性時，採用下列方法進行處理，以消除供試液的抑菌活性，再依法檢查。常用的方法如下。
①培養基稀釋法取規定量的供試液，至較大量的培養基中，使單位體積內的供試品含量減少，至不含抑菌作用。測定細菌、黴菌及酵母菌的菌數時，取同稀釋級的供試液2ml，每1ml供試液可等量分注多個平皿，傾注瓊脂培養基，混勻，凝固，培養，計數。每1ml供試液所注的平皿中生長的菌落數之和即為1ml的菌落數，計算每1ml供試液的平均菌落數，按平皿法計數規則報告菌數；控制菌檢查時，可加大增菌培養基的用量。
②離心沉澱法取一定量的供試液，500轉/分鍾離心3分鍾，取全部上清液混合。用於細菌檢查。
③薄膜過濾法見細菌、黴菌及酵母菌計數項下的「薄膜過濾法」。
④中和法凡含汞、砷或防腐劑等具有抑菌作用的供試品，可用適宜的中和劑或滅活劑消除其抑菌成分。中和劑或滅活劑可加在所用的稀釋液或培養基中。

5. 純化水微生物限度檢查法需要陽性對照嗎

4.10微生物限度(薄膜過濾法)
4.10.1取相當於每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數較多時，可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉－蛋白腖緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同「計數方法的驗證」。沖洗後取出濾膜，菌面朝上貼於營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉腖葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
4.10.2陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液1ml，照上述薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。
4.10.3培養和計數 除另有規定外，細菌培養48小時，逐日點計菌落數，一般以48小時的菌落數報告；黴菌、酵母菌培養72小時，逐日點計菌落數，一般以72小時的菌落數報告；必要時，可適當延長培養時間至5～7天進行菌落計數並報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數後，計算各稀釋級供試液的平均菌落數，按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不少於15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
4.10.4菌數報告原則 以相當於1g或1ml供試品的菌落數報告菌數；若濾膜上無菌落生長，以<1報告菌數（每張濾膜過濾1g或1ml供試品），或<1乘以稀釋倍數的值報告菌數。

6. 薄膜過濾法，純化水的微生物限度檢驗，都需要什麼設備

准備工作：
用純化水浸泡濾膜，浸泡完全後放入濾杯中，包好濾杯，連同回量筒、培養基、平皿答、取膜器、三角燒瓶等一起121℃滅菌30min。
滅菌後的物品一並傳入潔凈室中，微生物限度過濾器上連好已經滅好的濾杯，用緩沖液先潤濕濾膜，抽掉緩沖液，然後倒入供試液（10倍稀釋），濾過，再用緩沖液沖洗濾膜。
過濾結束後取下濾膜平貼於R2A瓊脂培養基平板上，32℃倒置培養5天。
菌落計數（平皿上長幾個菌結果就報幾個菌）

7. 純化水微生物限度檢查方法

4.10微生物限度(薄膜過濾法)
4.10.1取相當於每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數較多時，可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉－蛋白腖緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同「計數方法的驗證」。沖洗後取出濾膜，菌面朝上貼於營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉腖葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
4.10.2陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液1ml，照上述薄膜過濾法操作，作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。
4.10.3培養和計數 除另有規定外，細菌培養48小時，逐日點計菌落數，一般以48小時的菌落數報告；黴菌、酵母菌培養72小時，逐日點計菌落數，一般以72小時的菌落數報告；必要時，可適當延長培養時間至5～7天進行菌落計數並報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數後，計算各稀釋級供試液的平均菌落數，按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不少於15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
4.10.4菌數報告原則 以相當於1g或1ml供試品的菌落數報告菌數；若濾膜上無菌落生長，以<1報告菌數（每張濾膜過濾1g或1ml供試品），或<1乘以稀釋倍數的值報告菌數。
這是我們公司的純化水微生物檢測部分內容，請參考。

8. 中國葯典微生物限度檢查法的稀釋液和培養基制備方法

稀釋液配製後，應採用驗證合格的滅菌程序滅菌。
1 .pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液
照無菌檢查法（附錄XII A）制備。
2.pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液、pH7.6無菌磷酸鹽緩沖液
按緩沖液（二部附錄XV D）配製後，過濾，分裝，滅菌。
如需要，可在上述稀釋液滅菌前或滅菌後加入表面活性劑或中和劑等。
3.0.9%無菌氯化鈉溶液
取氯化鈉9.0g，加水溶解使成1000ml，過濾，分裝，滅菌。 培養基可按以下處方制備，也可使用按該處方生產的符合要求的脫水培養基。配製後，應採用驗證合格的滅菌程序滅菌。
1.營養瓊脂培養基、營養肉湯培養基、硫乙醇酸鹽流體培養基、改良馬丁培養基及改良馬丁瓊脂培養基
照無菌檢查法（附錄XII A）制備。
2.玫瑰紅鈉瓊脂培養基
腖 5.0g
玫瑰紅鈉 0.0133g
葡萄糖 10.0g
瓊脂 14.0g
磷酸二氫鉀 1.0g
水 1000ml
硫酸鎂 0.5g
除葡萄糖、玫瑰紅鈉外，取上述成分，混合，微溫溶解，濾過，加入葡萄糖、玫瑰紅鈉，分裝．滅菌。
3.酵母浸出粉腖葡萄糖瓊脂培養基（YPD )
腖 10.0g
瓊脂 14.0g
酵母浸出粉 5.0g
水 1000ml
葡萄糖 20.0g
除葡萄糖外，取上述成分．混合，微溫溶解，濾過，加人葡萄糖，分裝．滅菌。
4．膽鹽乳糖培養基(BL )腖20.0g
磷酸二氫鉀 1.3g
乳糖 5.0g
牛膽鹽 2.0g
氯化鈉 5.0g
（或去氧膽酸鈉） ( 0.5g)
磷酸氫二鉀 4.0g
水 1000ml
除乳糖、牛膽鹽或去氧膽酸鈉外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.4 ±0.2，煮沸，濾清，加人乳糖、牛膽鹽或去氧膽酸鈉，分裝，滅菌。
5.乳糖膽鹽發酵培養基
腖 20.0g
0.04%溴甲酚紫指示液 25ml
乳糖 10.0g
水 l000ml
牛膽鹽 5.0g
除0.04%溴甲酚紫指示液外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.4 ±0.2，加人0.04%溴甲酚紫指示液，根據要求的用量分裝於含倒管的試管中。滅菌。所用倒管的規格應保證產氣結果的觀察。
6．曙紅亞甲藍瓊脂培養基（EMB )
營養瓊脂培養基 100ml
曙紅鈉指示液 2ml
20%乳糖溶液 5ml
亞甲藍指示液 1.3～1.6ml
取營養瓊脂培養基，加熱溶化後，冷至60℃，按無菌操作加入滅菌的其他3種溶液，搖勻，傾注平皿。
7.麥康凱瓊脂培養基（MacC）腖20.0g
1%中性紅指示液 3ml
乳糖 10.0g
瓊脂 14.0g
牛膽鹽 5.0g
水 l000ml
氯化鈉 5.0g
除乳糖、1%中性紅指示液、牛膽鹽及瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.2 ±0.2，加入瓊脂，加熱溶化後，再加入其餘各成分，搖勻，分裝，滅菌，冷至約60℃，傾注平皿。
8.4 -甲基傘形酮葡糖昔酸（4-methylumbelliferyl-β-D-glucuionide，MUG）培養基
腖 10.0g
磷酸二氫鉀（無水） 0.9g
硫酸錳 0.5mg
磷酸氫二鈉（無水） 6.2g
硫酸鋅 0.5mg
亞硫酸鈉 40mg
硫酸鎂 0.1g
去氧膽酸鈉 1.0g
氯化鈉 5.0g
MUG 75mg
氯化鈣 50mg
水 l000ml
除MUG外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.3±0.1，加人MUG，溶解，每管分裝5ml，滅菌。
9.三糖鐵瓊脂培養基（TSI )
腖 20.0g
牛肉浸出粉 5.0g
乳糖 10.0g
蔗糖 10.0g
葡萄糖 1.0g
氯化鈉 5.0g
硫酸亞鐵 0.2g
硫代硫酸鈉 0.2g
0.2%酚磺酞指示液 12.5ml
瓊脂 12.0g
水 1000ml
除三種糖、0.2%酚磺酞指示液、瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.3±0.1,加入瓊脂，加熱溶化後，再加入其餘各成分，搖勻，分裝，滅菌，製成高底層（2～75px）短斜面。
10．四硫磺酸鈉亮綠培養基（TTB）
腖 5.0g
硫代硫酸鈉 30.0g
牛膽鹽 1.0g
水 l000ml
碳酸鈣 10.0g
取上述成分，混合，微溫溶解，滅菌。
臨用前，取上述培養基，每10ml加入碘試液0.2ml和亮綠試液0.lml，混勻。
11.沙門、志賀菌屬瓊脂培養基（SS）
腖 5.0g
硫代硫酸鈉 8.5g
牛肉浸出粉 5.0g
中性紅指示液 2.5ml
乳糖 10.0g
亮綠試液 0.33ml
牛膽鹽 8.5g
瓊脂 16.0g
枸櫞酸鈉 8.5g
水 1000ml
枸櫞酸鐵銨 1.0g
除乳糖、中性紅指示液、瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.2±0.1,濾過，加入瓊脂，加熱溶化後，再加入其餘各成分，搖勻，滅菌，冷至60℃，傾注平皿。
12．膽鹽硫乳瓊脂培養基（DHL )
腖 20.0g
枸櫞酸鈉 1.0g
牛肉浸出粉 3.0g
枸櫞酸鐵銨 1.0g
乳糖 10.0g
中性紅指示液 3ml
蔗糖 10.0g
瓊脂 16.0g
去氧膽酸鈉 1.0g
水 l000ml
硫代硫酸鈉 2.3g
除糖、指示液及瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.2±0.1,加入瓊脂，加熱溶化後，再加人其餘成分，搖勻，冷至60 ℃，傾注平皿。
13.溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養基
腖 10.0g
溴化十六烷基三甲銨 0.3g
牛肉浸出粉 3.0g
瓊脂 14.0g
氯化鈉 5.0g
水 l000ml
除瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.5±0.1，加入瓊脂，加熱溶化後，分裝，滅菌，冷至60 ℃，傾注平皿。
14．亞碲酸鹽肉湯培養基
臨用前，取滅菌的營養肉湯培養基，每100ml中加人新配製的1%亞諦酸鈉（鉀）試液0.2ml，混勻，即得。
15．卵黃氯化鈉瓊脂培養基
腖 6.0g
10%氯化鈉卵黃液 100ml
牛肉浸出粉 1.8g
瓊脂 14.0g
氯化鈉 30.0g
水 650ml
除10 %氯化鈉卵黃液外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.6土0 .1，滅菌，待冷至約60 ℃，以無菌操作加入10%氯化鈉卵黃液，充分振搖，傾注平皿。
10%氯化鈉卵黃液的制備取新鮮雞蛋1個，以無菌操作取出卵黃，放入10%無菌氯化鈉溶液100ml中，充分振搖，即得。
16.甘露醇氯化鈉瓊脂培養基
腖 10.0g
酚磺酞指示液 2.5ml
牛肉浸出粉 1.0g
瓊脂 14.0g
甘露醇 10.0g
水 l000ml
氯化鈉 75.0g
除甘露醇、酚磺酞指示液及瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節州值使滅菌後為7.4 ±0.2，加入瓊脂，加熱溶化後，濾過，分裝，滅菌，冷至60 ℃，傾注平皿。
17．乳糖發酵培養基
腖 20.0g
乳糖 10.0g
0.04%溴甲酚紫指示液 25ml
水 l000ml
除0.04%溴甲酚紫指示液外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.2±0.2，加入指示液，分裝於含倒管的小試管中，每管3ml．滅菌。
18．綠膿菌素（Pyocyanin）測定用培養基（PDP瓊脂培養基）
腖 20.0g
甘油 l0ml
氯化鎂（無水） 1.4g
瓊脂 14.0g
硫酸鉀（無水） 10.0g
水 1000ml
取腖、氯化鎂、硫酸鉀和水混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.3±0.1，加入甘油及瓊脂，加熱溶化，混勻，分裝於試管，滅菌，置成斜面。
19.梭菌增菌培養基
牛肉浸出粉 10.0g
鹽酸半胱氨酸 0.5g
腖 10.0g
氯化鈉 5.0g
酵母浸出粉 3.0g
醋酸鈉 3.0g
可溶性澱粉 1.0g
瓊脂 0.5g
葡萄糖 5.0g
水 1000ml
取上述成分，混合，加熱煮沸使溶解，調節pH值使滅菌後為6.8士0.2，加熱溶化，濾過，分裝，滅菌。
20.哥倫比亞瓊脂培養基
酪蛋白胰酶消化物 10.0g
肉胃酶消化物 5.0g
心胰酶消化物 3.0g
酵母浸出粉 5.0g
玉米澱粉 1.0g
氯化鈉 5.0g
瓊脂 15.0g
水 1000ml
除瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值使滅菌後為7.3士0.2，加入瓊脂，加熱溶化，濾過，分裝，滅菌，冷至45～50 ℃，加人相當於20mg慶大黴素的無菌硫酸慶大黴素，混勻，傾注平皿。
21．沙氏葡萄糖液體培養基
腖 10g
葡萄糖 40g
水 1000ml
除葡萄糖外，取上述成分，混合，微溫溶解，濾過。加人葡萄糖，溶解，分裝，滅菌。
22．沙氏葡萄糖瓊脂培養基
腖 10g
水 1000ml
葡萄糖 40g
瓊脂 14g
除瓊脂和葡萄糖外，混合，微溫溶解，濾過。加入瓊脂和葡萄糖，溶解，分裝，滅菌。
23.（科瑪嘉）念珠菌顯色培養基（注1）
腖 10.2g
瓊脂 15g
氫罌素 0.5g
滅菌水 1000ml
色素 22.0g
除瓊脂外，取上述成分，混合，微溫溶解，調節pH值至6.3士0.2。濾過，加入瓊脂，加熱煮沸，不斷攪拌至瓊脂完全溶解，傾注平皿。
24.1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養基
黃色玉米粉 40g
瓊脂 10～15g
聚山梨酯80 10ml
水 1000ml
取玉米粉、聚山梨酯80及蒸餾水500ml，混合，65℃加熱30分鍾，混勻，用紗布濾過，補足原水量。取瓊脂，水500ml，混合，加熱溶解。將以上兩種溶液混合，搖勻，分裝，滅菌。

9. 微生物純化水實驗，做幾個稀釋度，是將供試液放到培養皿里還是放到抽濾那塊兒

純凈水裡面的微生物本身就很少 如果多了，人喝了肯定得拉肚子 所以測裡面的微生物版含量的時候根本不用稀權釋
如果經過稀釋之後，測數反而長出菌來了，有可能是污染，有可能是本身水裡面含有的雜菌正好在那0.1ml的水裡存在，正好被吸上去了