雙水相萃取純化度高於色譜層析

❶ 雙水相萃取的原理

雙水相萃取的原理：分子間存在相互作用力，這種分子間作用力隨相對分子質量增大而回增大。當兩種高分子聚合答物之間存在相互排斥作用時，由於相對分子質量較大的分子間的排斥作用與混合熵相比佔主導地位，即一種聚合物分子的周圍將聚集同種分子而排斥異種分子，當達到平衡時，即形成分別富含不同聚合物的兩相。

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可形成雙水相的雙聚合物體系有：聚乙二醇（PEG）/葡聚糖（Dx）,聚丙二醇/聚乙二醇，甲基纖維素/葡聚糖。

雙水相萃取中採用的雙聚合物系統是PEG/Dx，該雙水相的上相富含PEG，下相富含Dx。另外，聚合物與無機鹽的混合溶液也可以形成雙水相，例如，PEG/磷酸鉀（KPi）、PEG/磷酸銨、PEG/硫酸鈉等常用於雙水相萃取。

雙水相萃取的應用：蛋白質、酶的純化、多肽的分離純化、核酸的分離純化等。

❷ 雙水相萃取中，為什麼要使目的蛋白質分配在上相核酸多糖分配在下相

1.根據分子大小不同進行分離純化 蛋白質是一種大分子物質,並且不同蛋白質的分子大小不同,因此可以利用一些較簡單的方法使蛋白 質和小分子物質分開,並使蛋白質混合物也得到分離.根據蛋白質分子大小不同進行分離的方法主要有透析

❸ 鹽析和雙水相萃取的區別與聯系

鹽析一般是指溶液中加入無機鹽類而使某種物質溶解度降低而析出的過程。 某些親水性高分子聚合物的水溶液超過一定濃度後可以形成兩相，並且在兩相中水分均占很大比例，，即形成雙水相系統

❹ 雙水相萃取蛋白質的方案

液- 液萃取技術是化學工業中普遍採用的分離技術之一,在生物化工中也有廣泛的應用。然而,大部分生物物質是有生物活性的,需要在低溫或室溫條件下進行分離純化,而採用傳統萃取技術無法完成。雙水相萃取就是考慮到這種現狀,基於液- 液萃取理論並考慮保持生物活性所開發的一種新型液- 液萃取分離技術。

與傳統的液- 液分離方法相比,雙水相萃取技術分離純化蛋白質具有以下優勢:體系含水量高,可達80 %以上;蛋白質在其中不易變性;界面張力遠遠低於水- 有機溶劑兩相體系的界面張力,有助於強化相際間的質量傳遞;分相時間短,一般只需5～15 min ;易於放大和進行連續性操作;萃取環境溫和,生物相容性高;聚合物對蛋白質的結構有穩定和保護作用等。正是由於雙水相萃取技術的諸多優勢,現已被廣泛用於蛋白質、核酸、氨基酸、多肽、細胞器等產品的分離和純化。

1 雙水相萃取原理
雙水相體系是指某些高聚物之間或高聚物與無機鹽之間,在水中以適當的濃度溶解後形成的互不相溶的兩相或多相水相體系。高聚物- 高聚物- 水體系主要依靠高聚物之間的不容性,即高聚物分子的空間阻礙作用,促使其分相;高聚物- 鹽- 水體系一般認為是鹽析作用的結果。

雙水相萃取與水- 有機相萃取的原理相似,都是依據物質在兩相間的選擇性分配,不同之處在於萃取體系的性質差異。當生物物質進入雙水相體系後,由於表面性質、電荷作用和各種力(如憎水鍵、氫鍵和離子鍵等) 的存在和環境的影響,使其在上、下相中的濃度不同。分配系數K 等於兩相中生物物質的濃度比,由於蛋白質的K 值不相同(大致在011～10 之間) ,因而雙水相體系對各類蛋白質的分配具有較好的選擇性。[/size]

❺ 什麼是吸附分離純化技術

你可以看一下《葯物分離純化技術》。該書於2009年6月由化學工業出版社出版發行，該書內介紹了葯物研究、開容發和生產中常用的分離純化技術的原理、工藝、特點和應用，以及葯物的液液萃取技術、浸取分離技術、超臨界流體萃取分離技術、雙水相萃取技術、制備色譜分離技術、大孔吸附樹脂分離技術、分子印跡技術、離子交換分離技術、分子蒸餾技術、膜分離技術、噴霧乾燥和真空冷凍乾燥技術等內容。內容全面、簡練，層次清晰，涵蓋了化學合成葯、生物葯、植物葯的分離純化。該書的特點是以大量實例說明各種分離技術在醫葯領域的應用，具有較強的專業性和實用性。

❻ 什麼是雙水相萃取

一些高分子水溶液（如分子量從幾千到幾萬的聚乙二醇硫酸鹽水溶液）可以分為兩個水相，蛋白質在兩個水相中的溶解度有很大的差別。故可以利用雙水相萃取過程分離蛋白質等溶於水的生物產品。
雙水相的優勢
ATPE作為一種新型的分離技術，對生物物質、天然產物、抗生素等的提取、純化表現出以下優勢：
(1)含水量高(70％--90％)，在接近生理環境的體系中進行萃取，不會引起生物活性物質失活或變性；
(2)可以直接從含有菌體的發酵液和培養液中提取所需的蛋白質（或者酶），還能不經過破碎直接提取細胞內酶，省略了破碎或過濾等步驟；
(3)分相時間短，自然分相時間一般為5min～15 min；
(4)界面張力小(10-7～ 10-4mN／m)，有助於兩相之間的質量傳遞，界面與試管壁形成的接觸角幾乎是直角；
(5)不存在有機溶劑殘留問題，高聚物一般是不揮發物質，對人體無害；
(6)大量雜質可與固體物質一同除去；
(7)易於工藝放大和連續操作，與後續提純工序可直接相連接，無需進行特殊處理；
(8)操作條件溫和，整個操作過程在常溫常壓下進行；
(9)親和雙水相萃取技術可以提高分配系數和萃取的選擇性。

❼ 雙水相萃取技術的應用

雙水相萃取技術已廣泛應用於生物化學、細胞生物學、生物化工和食品化工等領域，回並取得了答許多成功的範例，主要是分離蛋白質 ，酶，病毒，脊髓病毒和線病毒的純化，核酸，DNA的分離，干擾素，細胞組織，抗生素，多糖，色素，抗體等。
此外雙水相還可用於稀有金屬/貴金屬分離，傳統的稀有金屬/貴金屬溶劑萃取方法存在著溶劑污染環境，對人體有害，運行成本高，工藝復雜等缺點。雙水相技術萃取技術引入到該領域，無疑是金屬分離的一種新技術。
目前，用此法來提純的酶已達數十種，其分離過程也達到相當規模，I-Horng Pan等人利用PEG1500/ NaH2PO4體系從Trichoderma koningii發酵液中分離純化β-木糖苷酶，該酶主要分配在下相，下相酶活回收率96.3%，純化倍數33；

❽ 如何利用雙水相萃取實現直接從細菌發酵液或細胞破碎液中分離純化目標產物

雙水相萃取一般用於蛋白質萃取吧，用聚乙二醇和鹽溶液離心得到體系，然後萃取得到蛋白質，最後過柱子

❾ 花青素的純化方法

微波提取技術
一種採用頻率為2450 MHz或 915 MHz、功率為500 W～15 000 W 的微波對葡萄籽 在選用水、內碳鏈容長為C ～C，的醇、乙醚、丙酮、乙 酸乙酯、甲苯或其混合物的溶劑中進行處理，從葡 萄籽提取原花青素類物質的新方法。該方法較常規 化學法工藝簡便、高效、快速，成本低，廢液排放 量少。
花青素是一種水溶性色素，可以隨著細胞液的酸鹼改變顏色。細胞液呈酸性則偏紅，細胞液呈鹼性則偏藍。花青素(anthocyanidin)是構成花瓣和果實顏色的主要色素之一。花青素為植物二級代謝產物，在生理上扮演重要的角色。花瓣和果實的顏色可吸引動物進行授粉和種子傳播 (Stintzing and Carle, 2004)。常見於花、果實的組織中及莖葉的表皮細胞與下表皮層。部分果實以顏色深淺決定果實市場價格。

❿ 蛋白質分離純化的四種方法

1、鹽析法：

鹽析法的根據是蛋白質在稀鹽溶液中，溶解度會隨鹽濃度的增高而上升，但當鹽濃度增高到一定數值時，使水活度降低，進而導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，最終引起蛋白質分子間互相凝聚並從溶液中析出。

2、有機溶劑沉澱法：

有機溶劑能降低蛋白質溶解度的原因有二：其一、與鹽溶液一樣具有脫水作用；其二、有機溶劑的介電常數比水小，導致溶劑的極性減小。

3、蛋白質沉澱劑：

蛋白質沉澱劑僅對一類或一種蛋白質沉澱起作用，常見的有鹼性蛋白質、凝集素和重金屬等。

4、聚乙二醇沉澱作用：

聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質發生沉澱作用。

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蛋白質是生命的物質基礎，是有機大分子，是構成細胞的基本有機物，是生命活動的主要承擔者。沒有蛋白質就沒有生命。氨基酸是蛋白質的基本組成單位。它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯系在一起的物質。

機體中的每一個細胞和所有重要組成部分都有蛋白質參與。蛋白質占人體重量的16%~20% ，即一個60kg重的成年人其體內約有蛋白質9.6~12kg。

人體內蛋白質的種類很多，性質、功能各異，但都是由20多種氨基酸（Amino acid）按不同比例組合而成的，並在體內不斷進行代謝與更新。