A. C18色譜柱問題
你怎麼保存的？
用的時候不能用酸性鹼性過強的流動相，用完後一定要用有機相和水相梯度沖洗幾遍（可能的話直接沖過夜），尤其是你用的流動相有酸、鹼、緩沖液、鹽等東西的時候一定要換成蒸餾水好好沖洗。
另外最後保存的時候一定要把柱子里灌滿有機溶解（甲醇或乙腈），沖至平衡，一定不能留水在裡面（尤其是酸性的水液）。
20個柱體積不夠，你是不是用酸鹼鹽了？你最好用甲醇（乙腈）-水
梯度100%-10%
（每次梯度至少20min）反復洗滌，另外用乙腈保存比甲醇好。
B. 那些HPLC色譜柱可以用純水
你問的應該是反相色譜抄柱，因為凝膠過濾用純水相是司空見慣的。
Agilent的Bonus系列，Aichorm的Aqua系列，都是可以做純水相的。
但你如果只是考慮梯度起點的高水相比例，那就不必了，普通的C18、C8都可以用純水相短時間沖洗，不超過10個柱體積，是沒什麼問題的。
C. 正相C18色譜柱進一點水會影響柱效嗎
正相C18色譜柱。判斷色譜柱柱效下降可以通過以下幾個途徑： 1.看峰分離度內怎麼樣,分離度直接關系容測試結果准確性,可以判斷柱效是否下降,柱效下降分離度一般會變差. 2.通過譜圖峰型的變化,是否有嚴重前伸和拖尾現象,峰型是否規則來看,如果峰型很差了,柱效已經下降了,可以及時採用乙腈和甲醇等溶劑進行修復. 3.通過壓力變化和出峰時間來判斷,一般柱效下降時伴隨著柱壓的升高和降低,此時出峰的時間也會和之前有很大差異. 4.還可以根據新的柱子的保留時間判斷,看重復性,平行性如何. 1) 保留時間變短； 2）理論塔板數降低； 3）峰對稱度變差； 4）分離度減小.
D. 液相色譜C18柱堵塞後如何沖洗柱子，能用純水 沖柱子嗎
C18柱子不能用純抄水沖洗，再說本來就堵了，壓力很高應該選擇壓力低的溶劑。
如果你確定是堵塞了，就用純乙腈反沖，先用低一點的流速，比如01ml/min，看壓力情況，不要超過200bar，再慢慢提高流速，但不要超過1.的流速，如果是真的堵了，可能會壓力慢慢降下來的。
如果上面方法不行，那還有可能是鹽析堵的，那就用乙腈：水=90：10反沖。
E. 在沖洗高效液相C18反相柱的時候，為什麼不能用純水
相C18色譜柱（即憎水柱子）如果用純水沖洗後，如果立即停泵則由於其憎水（疏水專）的緣故使得柱子內屬的水因而流失掉，長時間停泵使得柱子幹掉（變干），會造成柱子內固定相填料表面鍵合的硅烷基結構塌陷（也說成是失去支撐倒下），柱子就這樣報廢了。那麼一旦沖洗柱子用了純水相怎麼辦呢？誒！不要驚慌，只要你不停泵，上述情況不會立即發生，我們只要保證最後用有機相沖洗柱子，停泵後使柱子內留存的是有機相，就無大礙，
F. 為什麼普通C18色譜柱不能用純水沖洗
容易引起疏水坍塌，把強保留物質沖出來，會毀了柱子的，所以水相不能超過95%，最開始的梯度淋洗也是高有機相到高水相，但是不是純水相。
G. 用0.3%的冰乙酸水進HPLC C18色譜柱，對柱子有影響嗎
如果所用色譜柱能耐酸和純水，應該沒有問題，但通常情況下，會加入一定量的有機相，如甲醇、乙腈等。
H. 純水是否能通過高效液相色譜柱
看是什麼柱子，有一些做糖的柱子就是要求純水做流動相的。但一般的C8或C18柱子不行，要求最少5%有機相，以防對色譜柱傷害
I. 菲羅門色譜柱 gemini c18能走100%的水嗎
可以。
但是對柱子損傷有點大，壽命會縮減很多。不光是菲羅門的，一般的色譜柱都會這樣。即便官方說是100%耐水的柱子，用純水相對於色譜柱也會有很大的傷害的。
記得用完之後一定要用甲醇或者乙腈封存。不然容易長微生物。
J. 色譜柱中固定相YWG-C18是什麼物質
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