① 請問如何配製細胞用的EGTA,母液濃度是2M
這個用母液稀釋就好了呀!細胞用的EGTA濃度要看你是做什麼用了,對照覺得應該是等滲液http://ajpregu.physiology.org/content/269/4/R848
http://www.jbc.org/content/275/52/41227.full
可以參考下
② EGTA能溶解在蒸餾水中嗎溶解度是多大
像這種多碳的有機酸都應該變成鹽類再溶解吧,參見詞條http://ke..com/view/1633343.htm,溶於氫氧化鈉溶液。
③ 水楊基熒光酮-氯代十六烷基吡啶光度法
方法提要
水中鋁離子與水楊基熒光酮及陽離子表面活性劑氯代十六烷基吡啶在pH在5.2~6.8范圍內形成玫瑰紅色三元配合物,用以光度法測定。
本法最低檢測質量為0.2μg。若取10mL水樣測定,檢測下限為0.02mg/L。
儀器和裝置
分光光度計。
具塞比色管25mL,使用前需經(1+9)HNO3浸泡除鋁。
試劑
水楊基熒火酮溶液(0.2g/L)稱取0.020g水楊基熒光酮,加入25mL(95+5)乙醇及1.6mLHCl,攪拌至溶解後加加純水至100mL。
氟化鈉溶液ρ(F-)=1.1mg/mL。
乙二醇雙(氨乙基醚)四乙酸(EGTA)溶液(1g/L)稱取0.1gETGTA,加純水約80mL,加熱並不斷攪拌至溶解,冷卻後加純水至100mL。
二氮雜菲溶液(2.5g/L)稱取0.25g二氮雜菲加90mL水,加熱並不斷攪拌至溶解,冷卻後加水至100mL。
除干擾混合溶液臨用前將EGTA溶液、二氮雜菲溶液及NaF溶液以(4+2+1)配製混合溶液。
緩沖液稱取16.4g六亞甲基四胺,用純水溶解後加入20mL三乙醇胺、80mL2mol/LHCl,加純水至500mL。此液用酸度計測定並用2mol/LHCl及六亞甲基四胺調pH至6.2~6.3。
氯代十六烷基吡啶溶液(CPC)(10g/L)稱取1.0g氯代十六烷基吡啶,加入少量純水攪拌成糊狀,加純水至100mL,輕輕攪拌並放置至全部溶解。此液在室溫低於20℃時可析出固形物。浸於熱水中即可溶解,仍可繼續使用。
鋁標准儲備溶液ρ(A1)=1.00mg/mL見81.30.1。
鋁標准溶液ρ(A1)=1.00μg/mL見81.30.1。
校準曲線
分取0mL、0.20mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL和3.00mL鋁標准溶液於25mL比色管中並加水至10.0mL。加入3.5mL除干擾混合溶液搖勻,加5.0mL緩沖液、1.0mLCPC溶液,蓋上比色管塞,上下輕輕顛倒數次(盡可能少產生泡沫以免影響定容),再加1.0mL水楊基熒光酮溶液,加水至25mL,搖勻。20min後,於波長560nm處,用1cm比色皿,以試劑空白為參比,測量吸光度,繪制校準曲線。
分析步驟
取10.0mL水樣於25mL比色管中。以下按校準曲線步驟操作,從曲線上查出水樣中鋁的質量。水樣中鋁的質量濃度計算參見公式(81.9)。
注意事項
水中常見的離子在以下濃度不幹擾測定:K+20mg/L;Na+500mg/L;Pb2+1mg/L;Zn2+1mg/L;Cd2+0.5mg/L;Cu2+1mg/L;Mn2+1mg/L,Li+2mg/L,Sr2+5mg/L,Cr6+0.04mg/L,SO42-250mg/L,Cl-300mg/L,NO3--N50mg/L,NO2--N50mg/L。在乙二醇雙(氨乙基醚)四乙酸(EGTA)存在下,Ca2+200mg/L,Mg2+100mg/L不幹擾測定。在二氮雜菲在存在下,Fe2+0.3mg/L不幹擾測定。磷酸氫二鉀可隱蔽0.4mg/LTi4+的干擾。Mo6+0.1mg/L以上嚴重干擾。除余氯的Na2S3O3(7~21mg/L)、二氮雜菲(0.1~0.4g/L),EGTA(0.2g/L)不幹擾測定。