Ⅰ 我的液相C18反相柱,用純乙腈沖洗的壓力由開始的3、4MPa上升到現在的20幾MPa,怎麼回事急需解救!
如果你接其他的柱子沒有問題的話,肯定是你的柱子之前的鹽沒有專沖洗干凈導致鹽結晶了。屬鹽用有機相是沖不掉的,只能用水沖,但是像這種反相柱不能用純水沖,純水會溶解硅膠,導致相坍塌。
你可以視情況改變有機相與水的比例來沖。一般可用5%的甲醇溶液小流速沖洗。 不行就反沖吧。
希望對你有幫助,望採納!!
Ⅱ 反相C18柱的展開劑怎麼確定恩
相C18色譜柱(即憎水柱子)如果用純水沖洗後,如果立即停泵則由於其憎水版(疏水)的緣故使得柱權子內的水因而流失掉,長時間停泵使得柱子幹掉(變干),會造成柱子內固定相填料表面鍵合的硅烷基結構塌陷(也說成是失去支撐倒下),柱子就這樣報廢了。
Ⅲ 安捷倫高效液相色譜c18柱的洗柱方法
第一、安捷倫的色譜柱有很多種,所以要分清類型去沖洗。
第二、作為普通C18柱,尤其是硅膠基質的普通C18柱,對酸鹼鹽以及水,都是造成柱子的損壞的流動相構成。水不能過多(除了帶AQ的純水柱,一般各家品牌都有這款防水柱)我個人認為只要超過80%的水的流動相,都會造成C18的壽命縮短。所以做高水相的流動相分析時請注意選合適的柱子。酸對柱子的損傷是不可逆的,一定要控制PH,我個人認為PH在2以下的都要做好費柱子的准備。鹼性條件是對於硅膠基質的C18的弱項,一般的硅膠基質的C18鹼性條件都不太耐用,但現在也有鹼性PH11的柱子,但比較貴。鹽對色譜柱的影響主要是鹽析造成的,而且是致命。
第三沖洗方法的問題。沖洗方法根據使用的流動相和樣品的不同沖洗方法要加以區分。一般不加酸鹼鹽,水相也不高的情況(如甲醇水60:40),無需太過沖洗,沖洗的目的就是為了把樣品的雜質沖出即可。保存流動相保存即可。酸和鹼的條件下,原則上是將酸鹼沖出色譜柱,保存在甲醇水即可(如60:40比例可根據要使用的流動相,只要水相不高即可)。鹽的條件比較麻煩,處理不好,不僅僅色譜柱出問題而且儀器也比較麻煩。常用的就是高水相流動相甲醇-水(10:90)將鹽沖出(注意壓力),然後用純甲醇沖洗(這一步是恢復高水相對色譜柱的損傷),最後保存在一般的甲醇水體系即可。
第四點,沖洗的時候注意是壓力,最好是從小流速開始慢慢提升流速到壓力許可的范圍。沖洗的時間,准確的是流量一般色譜柱的沖洗都要達到10-20倍的柱體積。
Ⅳ 老師,我做液相的,昨晚Agilent XDB C18的柱子被我用水沖了40分鍾,有什麼解救方法
你好,咱們C18的柱子一般是不能走純水的,40min水應該還不是很嚴重,你用純甲醇版低流速沖色譜柱2小時,進權樣一個以前走過的物質,看看柱效情況。如果不理想了,進一針二氯甲烷,再用甲醇沖。沖完後,在進樣看看。
Ⅳ C18反相柱怎樣才能沖得夠干凈
相C18色譜柱(即來憎水柱自子)如果用純水沖洗後,如果立即停泵則由於其憎水(疏水)的緣故使得柱子內的水因而流失掉,長時間停泵使得柱子幹掉(變干),會造成柱子內固定相填料表面鍵合的硅烷基結構塌陷(也說成是失去支撐倒下),柱子就這樣報廢了。
Ⅵ 在沖洗高效液相C18反相柱的時候,為什麼不能用純水
相C18色譜柱(即憎水柱子)如果用純水沖洗後,如果立即停泵則由於其憎水(疏水專)的緣故使得柱子內屬的水因而流失掉,長時間停泵使得柱子幹掉(變干),會造成柱子內固定相填料表面鍵合的硅烷基結構塌陷(也說成是失去支撐倒下),柱子就這樣報廢了。那麼一旦沖洗柱子用了純水相怎麼辦呢?誒!不要驚慌,只要你不停泵,上述情況不會立即發生,我們只要保證最後用有機相沖洗柱子,停泵後使柱子內留存的是有機相,就無大礙,
Ⅶ 有誰知道用c18柱進行液相色譜,Boc-His(Boc)-OH的保留時間是多少
由於不知道是整來體後移還是部分源後移,我把兩個問題都寫出來了
保留時間漂移
首先走樣之前色譜柱是否平衡好,壓力是否穩定,還有,流動相的PH值會影響色譜柱的固定相,必須在范圍內,否則固定相可能會溶解,還有就是色譜柱是不是被污染了,強保留組分可能降低或者影響柱效。
及時更換流動相也是必要的,有些流動相會隨著時間而改變,影響檢測,還有就是如果用的是疏水的色譜柱(如C18),不能用純水相洗,防止疏水坍塌。
保留時間波動
色譜柱的溫度是影響關鍵,需與室內溫度上下波動二度為宜,還有就是流速是否穩定,泵中是否有氣泡。是否平衡好,流動相是否不恰當等。
Ⅷ 為什麼普通C18色譜柱不能用純水沖洗
容易引起疏水坍塌,把強保留物質沖出來,會毀了柱子的,所以水相不能超過95%,最開始的梯度淋洗也是高有機相到高水相,但是不是純水相。
Ⅸ 液相色譜C18柱堵塞後如何沖洗柱子,能用純水 沖柱子嗎
C18柱子不能用純水沖洗,再說本來就堵了,壓力很高應該選擇壓力低的溶劑。
如果內你確定是堵容塞了,就用純乙腈反沖,先用低一點的流速,比如01ml/min,看壓力情況,不要超過200bar,再慢慢提高流速,但不要超過1.的流速,如果是真的堵了,可能會壓力慢慢降下來的。
如果上面方法不行,那還有可能是鹽析堵的,那就用乙腈:水=90:10反沖。