㈠ 如何檢驗環境水中的微生物
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水質微生物
一、水質微生物及指示菌
在各種水體,特別是污染水體中存在有大量的有機物質,適於各種微生物的生長,因此水體是僅次於土壤的第二種微生物天然培養基。水體中的微生物主要來源於土壤,以及人類的動物的排泄物及污染。水體中微生物的數量和種類受各種環境條件的制約。
一般認為,水中微生物以革蘭氏陰性桿菌佔有較大優勢。與其他水體相比,河水及溪水中革蘭氏陽性菌相對較多,這是因為陸地微生物沖洗污染的緣故。
水體中的致病性微生物一般並不是水中原有微生物,大部分是從外界環境污染而來,特別是人和其它溫血動物的糞便污染。水中常見的致病性細菌主要包括:志賀氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌、小腸結炎耶爾森氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌等。
在實際控制中,對水質衛生質量的評價和控制,是無法對各種可能存在的致病微生物一一進行檢測,而一般利用對指示菌的檢測和控制,來了解水體是否受到過人畜糞便的污染,是否有腸道病原微生物存在的可能,從而評價水的質量,以保證水質的衛生安全。
目前,世界各國一般認為大腸菌群是指示水質受糞便污染較好的指示菌。
我國水質控制也採用大腸菌群作為指示菌,GB5749-85《中華人民共和國國家標准 生活飲用水衛生標准》規定,生活飲用水中大腸菌群每升不得超過3個。
在某些情況下,水體中的細菌總數也可指示水體受糞便等污染物污染的情況。這里的細菌總數其實是指營養瓊脂培養後形成的菌落總數。目前世界各國對於控制飲用水的衛生質量,除採用大腸菌群等指標外,一般還採用細菌總數這個指標。我國GB5749-85《中華人民共和國國家標准 生活飲用水衛生標准》中規定生活飲用水細菌總數每毫升不得超過100個。
二、水質微生物檢驗方法
GB5750-85《中華人民共和國國家標准 生活飲用水標准檢驗法》提供了水質中細菌總數和總大腸菌群的檢測方法。
(一)細菌總數的檢測:
國家標准中,細菌總數是指1ml水樣在營養瓊脂培養基中,於37℃經24h培養後,所生長的細菌菌落的總數。
對生活飲用水,直接吸取1ml水樣於平皿中,加入營養瓊脂後混勻,37℃培養24h,進行計數。
對水源水,根據情況對樣品進行10倍梯度稀釋,選擇適宜稀釋液1ml,加註平皿,營養瓊脂混勻,37℃培養24h,進行計數。
按照規定格式報告每毫升水中細菌總數。
(二)總大腸菌群的檢測:
國家標准中,利用總大腸菌群作為糞便污染的指標。總大腸菌群是指一群需氧及兼性厭氧的,37℃生長時能使乳糖發酵,在24h內產酸產氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。水樣中總大腸菌群數的含量,表明水被糞便污染的程度,而且間接地表明有腸道致病菌存在的可能。
國家標准提供了多管發酵法及濾膜法檢測總大腸菌群的方法。
多管發酵法檢測總大腸菌群,分為三步:初發酵試驗,平板分離,復發酵證實試驗。初發酵試驗,採用乳糖蛋白腖培養液37℃培養24h,觀察產酸產氣情況。對陽性管培養物,接種於品紅亞硫酸鈉培養基或伊紅美藍培養基,觀察菌落特徵,並進行革蘭氏染色和鏡檢。對典型和可疑菌落,接種於乳糖蛋白腖培養液,進行復發酵證實試驗,並根據標准所附檢數表報告結果。
其中,對生活飲用水,初發酵試驗接種水樣總量300ml,即100ml接種2管,10ml接種10管,採用兩個稀釋度,12支發酵管。對水源水,初發酵試驗接種水樣總量55.5ml,即10ml接種5管,1ml接種5管,0.1ml接種10管,共採用三個稀釋度,15支發酵管。兩種接種方法,所用的檢數表是不同的。
濾膜法檢測總大腸菌群,就是利用微孔濾膜,過濾一定量水樣,將水樣中含有的細菌截留在濾膜上,然後將濾膜帖放在選擇性培養基上(如品紅亞硫酸鈉培養基),經培養和證實試驗後,直接計數濾膜上生長的典型大腸菌群菌落,並計算出每升水樣中含有的總大腸菌群數。
三、說明:
1.菌落總數測定中,應選擇合適的稀釋度進行。生活飲用水,國家標准規定每毫升不得超過100個,因此可以直接吸取1毫升到平板進行培養。
2.培養時間。與食品中菌落計數不同,測定水中細菌總數,培養時間採用24h。
3.總大腸菌群的測定方法,由於飲用水和水源水可能的污染程度不同,因此採用不同的接種量,檢數表也不相同。
4.當接種量超過1毫升時,一般採用多倍濃度培養液。如配製3倍濃縮乳糖蛋白腖培養液50mL,加入100mL水樣後,總體積為150mL,培養液恢復到正常濃度。
5.濾膜法檢測總大腸菌群,一般在檢測較大量低濁度水樣時採用,大量水樣濾過濾膜後,水中所含有的所有細菌均截留在濾膜上。
㈡ 如何簡易測飲用水中微生物的含量
利用稀釋塗布平板法
㈢ 純化水的微生物驗證大家是怎麼做的
首先:只做菌落總數和總大腸菌群兩項。
其次:當總大腸菌群產酸回產氣時,根據需要做耐熱大腸答菌群,和大腸埃希氏菌檢測。
在做大腸檢測時,有多管發酵法、濾膜法、酶底物法三種方法,可根據實驗室實際情況選擇具體方法。
標准參照「GB/T 5750.12-2006 生活飲用水標准檢驗方法 微生物指標」
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㈣ 純化水微生物限度檢測
採用濾膜法進行微生物檢測是一種國際公認的微生物標准檢驗方法,其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的葯典、FDA和EPA等組織的承認,廣泛應用於環境監測、食品及飲料工業、化妝品、制葯工業品質控制和電子工業等領域。賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產品成功地應用於濾膜法已有20多年的歷史,實用而且方便實用,它簡化了微生物檢測程序。
濾膜法微生物檢測:
將適當孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由於濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上。樣品中微生物生長抑制劑可在過濾後用無菌水沖洗濾器而除去。然後,將濾膜放在培養基上培養,營養物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換,在濾膜表面上培養出的菌落可以計數,並和樣品量相關。
濾膜法的優點:
- 與直接法比較,可以檢測大量的樣品
- 濃縮效應使微生物檢測的准確度提高
- 帶有菌落的濾膜,可作為檢測的永久記錄存檔
- 可見的菌落和樣品量直接對應,得出定量結果
操作具體一點就是:薄膜過濾法檢測,一個樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,製成10級、100級、1000級稀釋倍數的細菌、黴菌和酵母菌稀釋培養皿,即可
滿意請採納。
㈤ 純化水微生物限度檢查方法
4.10微生物限度(薄膜過濾法)
4.10.1取相當於每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液,加至適量的稀釋劑中,混勻,過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數較多時,可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白腖緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜,沖洗方法和沖洗量同「計數方法的驗證」。沖洗後取出濾膜,菌面朝上貼於營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉腖葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
4.10.2陰性對照試驗
取試驗用的稀釋液1ml,照上述薄膜過濾法操作,作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。
4.10.3培養和計數
除另有規定外,細菌培養48小時,逐日點計菌落數,一般以48小時的菌落數報告;黴菌、酵母菌培養72小時,逐日點計菌落數,一般以72小時的菌落數報告;必要時,可適當延長培養時間至5~7天進行菌落計數並報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數後,計算各稀釋級供試液的平均菌落數,按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不少於15,則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
4.10.4菌數報告原則
以相當於1g或1ml供試品的菌落數報告菌數;若濾膜上無菌落生長,以<1報告菌數(每張濾膜過濾1g或1ml供試品),或<1乘以稀釋倍數的值報告菌數。
這是我們公司的純化水微生物檢測部分內容,請參考。
㈥ 純凈水微生物檢測方法
電導率越低,水越純。電導率很低是不是說明水中的微生物也不存在了呢?微生物檢測等很長時間才出結果,要是能夠通過這樣的方法檢測純凈水的話,那就可以省了很多微生物檢測步驟.
在現代食品安全速測技術中確實有利用電導變化原理來測量微生物含量的方法,叫做:Bactometer系統,是一種用於估計微生物數量的新方法
比較快速的方法是有的,設備也比較先進,可能用的並不多
例如:直接外熒光濾過技術(DEFT)
即用膠系統(SimPlate)
Bactometer系統
Malthus微生物快速測試儀
ATP生物發光技術(BL)
微量量熱法
接觸酶測定儀
放射測量法
奧地利Sy-Lab公司的BacTrac4300和BioTrac4200自動微生物快速檢測系統可以根據微生物在生長過程中利用低電導率的大分子物質(如蛋白質,多肽及碳水化合物等)進行新陳代謝,生成低分子帶電荷的分解物,使電導率發生變化,電信號經放大後顯示並記錄,檢測系統每10分鍾檢測一次電導率的變化,由計算機實時監控並自動給出結果。因此,只要先用標准方法對比做出標准曲線,就可以達到快速定量檢測菌數的目的。對於致病菌或某些特殊應用場合,則不需要做標准曲線,如有電導率顯著突變,則可以判斷為初篩陽性,用標准方法進一步確認。
其特點是:
1。採用獨創的測量培養基電導(M值)和電極電導(E值)結合的方法,測量相對電導率變化,使靈敏度大大提高,E值測量法尤其適用於一些高鹽分(高電導率)的選擇性增菌培養基,使電導率法用於致病菌快速初篩成為可能。
2。對於難以測量電導變化的微生物,如酵母和黴菌,直接電導測量經常會出現假陰性。Sylab公司採用測間接電導率的方法,通過測量KOH吸收微生物代謝產生CO2後電導率的變化反映微生物的生長情況,檢測靈敏度大大提高,杜絕假陰性可能。
3。靈敏度高。最低可檢測出0.2-1個/mL(克)樣品。
4。可檢測樣品種類廣。可檢測常見的各種食品、化妝品、葯品、環境拭子等,還可用於微生物代謝、防腐及消毒效果研究等。
5。檢測的微生物項目多。可檢測常規微生物項目(菌落總數、大腸菌群、酵母和黴菌總數)及致病微生物(沙門氏菌、李斯特菌、金黃色葡萄球菌等)。
6。檢測速度快。樣品含菌量越高,出結果越快,只需4-24小時即給出結果。大腸菌群最長12小時出結果。
7。檢測步驟簡單。廠家提供特殊配方的培養基,您只需制備好培養基,將樣品加入培養基中,放入儀器,然後啟動程序即可自動出結果。對於液體樣品無需復雜前處理,固體樣品只需進行必要的均質和稀釋即可。不需要將樣品進行梯度稀釋,不需要人工計數,輕松完成每天繁瑣的微生物檢測工作,省時省力。
8。針對中國市場,廠家可以只提供乾燥培養基,單次檢測成本低廉,特別適合中國國情。
9。基於Windows系統的智能化軟體,可對單個檢測瓶進行控制,特別適合HACCP企業進行風險評估分析。
10。與標准方法相比,符合率達到90-97%,完全能滿足檢測機構和企業對快速檢測的需要。
11。該方法通過歐洲各國的認證。
㈦ 純凈水的微生物檢測怎麼做什麼用生理鹽水稀
微生物檢測是食品檢測的重要項目,餐飲業、加工食品的微生物指標都需要達到標准,否則將危害人類健康。
還是生理鹽水好,因為生理鹽水是等滲溶液,菌體不容易破裂,而無菌蒸餾水是低滲溶液,容易使菌體自溶.
㈧ 純水怎樣做細菌檢測
濾膜法微生物檢測:
將適當孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由於濾膜的作用而將微生物保留在專膜的表面上.樣品中微屬生物生長抑制劑可在過濾後用無菌水沖洗濾器而除去.然後,將濾膜放在培養基上培養,營養物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換,在濾膜表面上培養出的菌落可以計數,並和樣品量相關.
濾膜法的優點:
- 與直接法比較,可以檢測大量的樣品
- 濃縮效應使微生物檢測的准確度提高
- 帶有菌落的濾膜,可作為檢測的永久記錄存檔
- 可見的菌落和樣品量直接對應,得出定量結果
操作具體一點就是:薄膜過濾法檢測,一個樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,製成10級、100級、1000級稀釋倍數的細菌、黴菌和酵母菌稀釋培養皿,即可
㈨ 純化水中的微生物檢測怎麼做 要詳細
需要提取某種微生物的話就提供該只能由微生物分解吸收的碳源,可用稀釋塗布平板法和平板劃線法分離出單個菌落