超純水可以用了做RNA提取嗎

㈠ 提取細胞的RNA時，如何有超純水還是去離子水

提取細胞的RNA時，如何有超純水還是去離子水
提取RNA時應該使用DEPC處理過的水版,999ml三蒸水中加入權1mlDEPC,攪拌過夜使之充分溶解,分裝到小瓶里,121℃高壓30min,使DEPC分解,封口膜包口就可以保存備用了.配置及分裝時候小心點,DEPC具有一定的毒性.

㈡ rna的提取還有何種方法是比較各自的優缺點

常見的的總RNA提取方法有苯酚法、陰離子去污劑法、LiCl一尿素法、改良的內Gomez法、容異硫氫酸胍法、CTAB法、熱硼酸法及改良熱硼酸法、TRIZOL試劑快速提取法。
RNA提取時，就變性劑的選擇來說，CTAB（CTAB法）比異硫氰酸胍（RIZOL試劑法）和SDS（改良熱硼酸法）更有效；就CTAB法來說，由於以CTAB為變性劑，同時加入PVP和β一巰基乙醇共同作用變性蛋白、抑制RNase的活性，使用無水乙醇或異丙醇沉澱雜蛋白和總核酸等，然後再選擇性地分離出RNA。所以CTAB法是一種很好得總RNA得提取方法。

㈢ 請教哪位高人能夠提供一套有效提取水中的RNA方法

北京華越洋生物，核酸提取試劑領導者！

㈣ 提取細胞的RNA時，如何有超純水還是去離子水

2．加熱至90 100℃使蛋白質變性，破壞兩類磷酸酯酶，有利於RNA的提取。 *1）、6孔板細胞（CNE-2）匯合度為90-100%時，取出無菌室，去其上清，

㈤ RNA提取問題

純的RNA加異丙醇後:溶液開始稍稍變白濁，只有離心後才能看到沉澱。
我倒覺得，你別管黃色東專西是什麼，就那個屬時候離心，然後去上清作為rna去跑膠，看看如果效果很好就可以了。顯然黃色物是不容於水的，離心很容易去掉。但是如果跑膠效果不理想可能需要考慮換方法了。

㈥ RNA的提取方法步驟及原理.

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:

Trizol是一種總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速裂解細胞，抑制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。

Trizol作用原理:

在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心後，裂解液分層成水相和有機相。RNA存在於水相中。

水相轉移後，RNA通過異丙醇沉澱回收。移去水相後，用乙醇可從中間相沉澱得到DNA，加入異丙醇沉澱可從有機相得到蛋白質。

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與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結構，但是很多RNA也需要通過鹼基配對原則形成一定的二級結構乃至三級結構來行使生物學功能。

RNA的鹼基配對規則基本和DNA相同，不過除了A-U、G-C配對外，G-U也可以配對。

在細胞中，根據結構功能的不同，RNA主要分三類，即tRNA（轉運RNA），rRNA（核糖體RNA），mRNA（信使RNA）。mRNA是合成蛋白質的模板，內容按照細胞核中的DNA所轉錄；tRNA是mRNA上鹼基序列（即遺傳密碼子）的識別者和氨基酸的轉運者；rRNA是組成核糖體的組分，是蛋白質合成的工作場所。

㈦ 有關RNA提取的問題

RNA極易變性，你那樣不可能提到，頂多是DNA.提取RNA需要加入極強的蛋白質變性劑，比如：專異硫氰酸屬胍！目前提取RNA的方法：用酸性胍鹽/苯酚/氯仿抽提！注意事項：提取用的玻璃器皿要經過高溫焙燒，塑料用具經過高壓滅菌，不能滅菌的用0.1％的焦炭酸二乙酯處理，再煮沸以除凈焦炭酸二乙酯；在破碎細胞細胞的同時加入強的變性劑使RNase失活；在RNA反應體系中加入RNase的抑制劑。

㈧ pcr用超純水

最好還是在冰上做啦,一次兩次沒有問題,久了多了可能問題就出來了
一般用的是滅菌的雙蒸水
保證引物的終濃度就可以.都是用水稀釋的,沒啥差別

㈨ 無RNA酶水(RNase-free &DNase-free水)是指DEPC處理過的超純水嗎可以直接用來溶解RNA嗎

外源RNA酶處理一下超純水就可以溶解RNA了。

㈩ RNA的提取方法

1、酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細胞，消化蛋白，然後用酚和酚-氯萃取，高速離心後取上清，所得DNA大小為100-150kb

2、甲醯胺解聚法：破碎細胞同上，然後用高濃度甲醯胺解聚蛋白質與DNA的結合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。

3、玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細胞，將裂解物鋪於乙醇上，然後用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉澱液繞於玻棒。生成DNA約80kb。

4、異丙醇沉澱法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態）

5、表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細胞，然後用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉澱或透析。

6、加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鍾，然後離心後取上清，可用於PCR反應。

7、鹼變性快速制備：先用NaOH作用20分鍾，再加HCI中和，離心後取上清，含少量DNA。

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DNA提取原則：

1、保證核酸一級結構的完整性；

2、核酸樣品中不應存在對酶有抑製作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；

3、其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到最低程度；

4、其他核酸分子，如RNA，也應盡量去除。