雙水相法分離純化花青素

⑴ 求高人~葡萄籽原花青素的成分到底是「聚多酚類」還是「黃酮類物質」

花青素屬於酚類化合物中的類黃酮類(flavonoids)。基本結構包含二個苯環，並由一3碳的單位連結(C6-C3-C6)。花青素經由苯基丙酸路徑和類黃酮生合成途徑生成，由許多酵素調控催化。

⑵ 雙水相萃取的操作步驟

一、重點
雙水相萃取放大容易：一般10ml離心管的實驗結果可直接放大到工業規模。具體實驗步驟：
1、配製一系列不同濃度、pH及離子強度的雙水相，每個雙水相改變一個參數。
2、加入料液，再加水使整個系統質量達到5~10g。離心管封口後充分混合。
3、1800－2000g下離心3－5min，使兩相完全分離。
4、用吸管或移液管將上相和下相分別吸出，測定上、下相中目標產物的濃度或生物活性，計算分配系數。
5、上、下兩相中目標產物的總量應與加入量對比，以檢驗是否存在沉澱或界面吸附現象，並可確認濃度或活性測定中產生的系統誤差。
6、分析目標產物的收率和純化倍數，確定最佳雙水相系統。
二、特點：
1、含水量高（70%～90%），適宜提取水溶性的蛋白質、酶等生物活性物質，且不易引起蛋白質的變性失活。2、不存在有機溶劑殘留問題。3、易於放大，各種參數可按比例放大而產物收率並不降低。這是其他分離技術無法比擬的。
萃取是在兩個液相間進行。大部分萃取採用一個是水相。另一個是有機相。但有機相易使蛋白質等生物活性物質變性。最近，發現有一些高分子水溶液（如分子量從幾千到幾萬的聚乙二醇硫酸鹽水溶液）可以分為兩個水相，蛋白質在兩個水相中的溶解度有很大的差別。故可以利用雙水相萃取過程分離蛋白質等溶於水的生物產品。
例如用聚乙二醇（PEG Mr為6000）/磷酸鉀系統從大腸桿菌勻漿中提取β-半乳糖苷酶。這是一個很有前途的新的分離方法，特別適用於生物工程得出的產品的分離。

⑶ 蛋白質分離純化的四種方法

1、鹽析法：

鹽析法的根據是蛋白質在稀鹽溶液中，溶解度會隨鹽濃度的增高而上升，但當鹽濃度增高到一定數值時，使水活度降低，進而導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，最終引起蛋白質分子間互相凝聚並從溶液中析出。

2、有機溶劑沉澱法：

有機溶劑能降低蛋白質溶解度的原因有二：其一、與鹽溶液一樣具有脫水作用；其二、有機溶劑的介電常數比水小，導致溶劑的極性減小。

3、蛋白質沉澱劑：

蛋白質沉澱劑僅對一類或一種蛋白質沉澱起作用，常見的有鹼性蛋白質、凝集素和重金屬等。

4、聚乙二醇沉澱作用：

聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質發生沉澱作用。

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蛋白質是生命的物質基礎，是有機大分子，是構成細胞的基本有機物，是生命活動的主要承擔者。沒有蛋白質就沒有生命。氨基酸是蛋白質的基本組成單位。它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯系在一起的物質。

機體中的每一個細胞和所有重要組成部分都有蛋白質參與。蛋白質占人體重量的16%~20% ，即一個60kg重的成年人其體內約有蛋白質9.6~12kg。

人體內蛋白質的種類很多，性質、功能各異，但都是由20多種氨基酸（Amino acid）按不同比例組合而成的，並在體內不斷進行代謝與更新。

⑷ 花青素的純化方法

微波提取技術
一種採用頻率為2450 MHz或 915 MHz、功率為500 W～15 000 W 的微波對葡萄籽 在選用水、內碳鏈容長為C ～C，的醇、乙醚、丙酮、乙 酸乙酯、甲苯或其混合物的溶劑中進行處理，從葡 萄籽提取原花青素類物質的新方法。該方法較常規 化學法工藝簡便、高效、快速，成本低，廢液排放 量少。
花青素是一種水溶性色素，可以隨著細胞液的酸鹼改變顏色。細胞液呈酸性則偏紅，細胞液呈鹼性則偏藍。花青素(anthocyanidin)是構成花瓣和果實顏色的主要色素之一。花青素為植物二級代謝產物，在生理上扮演重要的角色。花瓣和果實的顏色可吸引動物進行授粉和種子傳播 (Stintzing and Carle, 2004)。常見於花、果實的組織中及莖葉的表皮細胞與下表皮層。部分果實以顏色深淺決定果實市場價格。

⑸ 在大孔吸附樹脂法分離純化果蔬花青素的生物化學實驗中，為何加入0.5%檸檬酸提取劑和0.1%檸檬酸水洗劑

花青素分子有5個羥基的類黃酮類，加酸可以讓花青素游離出來，以達更好的分離效果。

⑹ 雙水相萃取的原理

雙水相萃取的原理：分子間存在相互作用力，這種分子間作用力隨相對分子質量增大而回增大。當兩種高分子聚合答物之間存在相互排斥作用時，由於相對分子質量較大的分子間的排斥作用與混合熵相比佔主導地位，即一種聚合物分子的周圍將聚集同種分子而排斥異種分子，當達到平衡時，即形成分別富含不同聚合物的兩相。

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可形成雙水相的雙聚合物體系有：聚乙二醇（PEG）/葡聚糖（Dx）,聚丙二醇/聚乙二醇，甲基纖維素/葡聚糖。

雙水相萃取中採用的雙聚合物系統是PEG/Dx，該雙水相的上相富含PEG，下相富含Dx。另外，聚合物與無機鹽的混合溶液也可以形成雙水相，例如，PEG/磷酸鉀（KPi）、PEG/磷酸銨、PEG/硫酸鈉等常用於雙水相萃取。

雙水相萃取的應用：蛋白質、酶的純化、多肽的分離純化、核酸的分離純化等。

⑺ 是否有人成功用雙水相萃取技術提純茶多酚相比其它茶多酚提取方法優勢何處成本如何應用前景如何

萃取工藝一般採用多級萃取 操作，溶劑回收需要進行多級蒸餾，工藝操作復雜，能耗大。雙內水相提取成本較高容，試驗復雜。需要比較PET200，400，800，1000，1500，2000，4000，5000考慮材料，一般不採用。但可以嘗試但經費高，做實驗時間長。光乙醇就要用一箱。研究此法主要是看提取最優，條件，需大量分析。應用前景不大。現在企業一般用超臨界，這是趨勢。

⑻ 葡萄中花青素提取方法花青素對人體的作用有哪些

一：葡萄中花青素的提取方法步驟如下：

(1)取葡萄原料，加入提取劑，靜置；其中，所述的提取劑由乙醇和呋喃混合而成，按照體積比乙醇：呋喃＝1～2:0.5～1.5；
(2)將步驟(1)中靜置後所得物質放入-8～-1℃放置，取出，升溫至40℃後，再升溫至65～85℃，保持該溫度提取1～3小時，即得。
2.根據權利要求1所述的提取方法，其特徵在於：步驟(1)中所述的葡萄原料為葡萄皮。
3.根據權利要求1所述的提取方法，其特徵在於：步驟(1)中葡萄原料與提取劑成質量比1:3～5。
4.根據權利要求1所述的提取方法，其特徵在於：步驟(1)中靜置10～20分鍾。
5.根據權利要求1所述的提取方法，其特徵在於：步驟(2)中靜置後所得物質放入-8～-1℃放置1～2小時。
6.根據權利要求1所述的提取方法，其特徵在於：步驟(2)中保持升溫速率為1～3℃/10分鍾升溫至40℃後，再保持升溫速率為5～10℃/10分鍾升溫至65～85℃。
二：花青素對人體的作用：
1、花青素是一種強有力的抗氧化劑，它能夠保護人體免受自由基的損傷。
2、花青素還能夠增強血管彈性，改善循環系統和增進皮膚的光滑度，抑制炎症和過敏，改善關節的柔韌性。
3、花青素有助於預防多種與自由基有關的疾病，包括癌症、心臟病、過早衰老和關節炎；
4、花青素可通過防止應激反應和血小板凝集來減少心臟病和中風的發生;
5、花青素還可以幫助降低感冒的次數並縮短持續時間。
原花青素葡萄枸杞糖果，由葡萄、枸杞、桂圓肉、大棗、酸棗仁、茯苓等成分組成，休閑時來兩顆。

⑼ 雙水相萃取蛋白質的方案

液- 液萃取技術是化學工業中普遍採用的分離技術之一,在生物化工中也有廣泛的應用。然而,大部分生物物質是有生物活性的,需要在低溫或室溫條件下進行分離純化,而採用傳統萃取技術無法完成。雙水相萃取就是考慮到這種現狀,基於液- 液萃取理論並考慮保持生物活性所開發的一種新型液- 液萃取分離技術。

與傳統的液- 液分離方法相比,雙水相萃取技術分離純化蛋白質具有以下優勢:體系含水量高,可達80 %以上;蛋白質在其中不易變性;界面張力遠遠低於水- 有機溶劑兩相體系的界面張力,有助於強化相際間的質量傳遞;分相時間短,一般只需5～15 min ;易於放大和進行連續性操作;萃取環境溫和,生物相容性高;聚合物對蛋白質的結構有穩定和保護作用等。正是由於雙水相萃取技術的諸多優勢,現已被廣泛用於蛋白質、核酸、氨基酸、多肽、細胞器等產品的分離和純化。

1 雙水相萃取原理
雙水相體系是指某些高聚物之間或高聚物與無機鹽之間,在水中以適當的濃度溶解後形成的互不相溶的兩相或多相水相體系。高聚物- 高聚物- 水體系主要依靠高聚物之間的不容性,即高聚物分子的空間阻礙作用,促使其分相;高聚物- 鹽- 水體系一般認為是鹽析作用的結果。

雙水相萃取與水- 有機相萃取的原理相似,都是依據物質在兩相間的選擇性分配,不同之處在於萃取體系的性質差異。當生物物質進入雙水相體系後,由於表面性質、電荷作用和各種力(如憎水鍵、氫鍵和離子鍵等) 的存在和環境的影響,使其在上、下相中的濃度不同。分配系數K 等於兩相中生物物質的濃度比,由於蛋白質的K 值不相同(大致在011～10 之間) ,因而雙水相體系對各類蛋白質的分配具有較好的選擇性。[/size]