dhanks液過濾除菌

Ⅰ 細胞培養用胰蛋白酶溶液如何配製與消毒

博凌科為生物科技-為你解答：胰蛋白酶溶液的配製與消毒：胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰 酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關，在pH為8.0、溫度為37℃時，胰酶溶液的作用能力最強。使用胰酶時，應把握 好濃度、溫度和時間，以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、 Mg2+和血清、蛋白質克降低胰酶的活性，所以配製胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks 液。終止消化時，可用含有血清培養液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。1. 稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.25％，用電子天平準確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調PH到7.2左右）或PBS（D- hanks）液中。攪拌混勻，置於4℃內過夜。2. 用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈台內用注射濾器（0.22微米微孔濾膜）抽濾除菌。然後分裝成小瓶於-20℃保存以備使用。

Ⅱ 什麼是D－Hanks液有什麼作用

D-hanks液是一種平衡鹽溶液
主要用於洗滌細胞和組織的 也是合成培養基的基礎液。如果含有鈣鎂離子的話 當用消化液消化細胞時 鈣鎂離子會破壞消化液的活力 影響消化作用

Ⅲ D-Hanks液如何配製啊能不能高壓滅菌

這里有很詳細的介紹：
動物細胞培養: Hanks、D-Hanks液和消化液(胰酶液)的配製
http://sky.scnu.e.cn/life/class/cellbiologylab/experim/lexp/lexp03.asp
可以進行高壓滅菌。

Ⅳ 非最終滅菌產品除菌過濾後有沒有必要檢無菌

非最終滅菌產品的無菌生產
A級(B 級背景)：處於未完全密封狀態下產品的操作和轉運，如產品灌裝（或灌封）、分裝、壓塞、軋蓋等；灌裝前無法除菌過濾的葯液或產品的配製；直接接觸葯品的包裝材料、器具滅菌後的裝配以及處於未完全密封狀態下的轉運和存放
B級：處於未完全密封狀態下的產品置於完全密封容器內的轉運；直接接觸葯品的包裝材料、器具滅菌後處於密閉容器內的轉運和存放
C級：灌裝前可除菌過濾的葯液或產品的配製；產品的過濾
D級：直接接觸葯品的包裝材料、器具的最終清洗、裝配或包裝、滅菌

Ⅳ 細胞換液為什麼用D-HANKS液洗

細胞換液為什麼用D-HANKS液洗
知不知道細胞很小的，你細胞衰老後會被水解掉留下部分營養物質於細胞外液中供新分化的利用，位置恰不恰當當然恰當，這是基因決定的，再說了細胞可在特定范圍內流動，新細胞在此范圍里就可以了.。總之，就是基因的作用，讓你細胞該在哪就在哪
可能有多種原因： 目標蛋白對細胞有毒性，導致細胞死亡； 轉染試劑以及DNA用量信息需要優化，否則對細胞具有傷害； 細胞貼壁轉染之後沒有正常換液。 建議： 考慮對目標蛋白進行截短構建、嘗試其他細胞系統； 摸索轉染試劑以及DNA用量信息，如果轉染試劑毒性太大，可以考慮嘗試義翹轉染試劑sinofection； 對轉染後的細胞進行換液處理，如果細胞狀態感覺不夠理想，可以考慮添加一些血清來幫助細胞恢復健康。 以上所有分析、建議的前提是，細胞培養、無菌操作等等都沒有問題。

Ⅵ 過濾除菌的溶液在配製時用在超凈工作台進行么

過濾除菌的溶液在配製時用在超凈工作台進行么
細胞培養用液的配製與消毒；器材與試劑：；乾粉型培養基、胰蛋白酶，青黴素、鏈黴素.純凈水系；一.PBS的制備與消毒(也可用於其它BSS，如：；1.溶解定容：將葯品（NaCl8.0g，KCl0；2.移入溶液瓶內待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的；3.把已消毒的PBS拿出來時將針頭拔出，膠布封住；4.移至超凈台中，用消過毒的無針眼膠塞換下有針眼；二.胰蛋白酶溶液的配

細胞培養用液的配製與消毒

器材與試劑：

乾粉型培養基、胰蛋白酶，青黴素、鏈黴素. 純凈水系統、電子天平、PH計、磁力攪拌器。

一. PBS的制備與消毒(也可用於其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配製)：

1.溶解定容：將葯品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO4 0. 2g
）倒入盛有雙蒸水的燒杯中，玻璃棒攪動，充分溶解，然後把溶液倒入容量瓶中准確定容至1000ml，搖勻即成新配製的PBS溶液。

2.移入溶液瓶內待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的吊針瓶）內，蓋上膠帽，並插上針頭放入高壓鍋內8磅消毒20分鍾。注意高壓消毒後要用滅菌蒸餾水補充蒸發掉的水份。
（或分裝至5個250ml瓶中，每瓶200ml左右加針頭高壓消毒）

Ⅶ D-Hanks液和PBS有什麼區別

一、含義不同：PBS為磷酸緩沖鹽溶液，D-Hanks液為（不含有鈣和鎂離子）平衡鹽溶液。

二、用途不同：PBS是常用的用於生物學研究的一個緩沖溶液，D-Hank's常用於配製胰酶溶液、細胞培養取材時組織塊的漂洗、細胞的漂洗、配製其他試劑等。

三、配置方法不同：

PBS配置方法：先將磷酸鹽溶解於500mL蒸餾水中，用1mol/L氫氧化鈉溶液校正pH後，再用蒸餾水稀釋至1000mL。

D-Hanks液配置方法：

1、將原液A和原液B與雙蒸水（18份）混合後，分裝於200ml小瓶中，10磅高壓蒸氣滅菌15分鍾，臨用前用無菌的5.6% NaHCO3調pH至7.2~7.6，最後除去鈣和鎂離子即D-Hanks液。

2、原液A：將NaCl（160g ）、MgSO4·7H2O（ 2g ）、KCl （8g）、Mg Cl2·6H2O （2g）、 CaCl2（2.8g）溶於1000ml雙蒸水。

3、原液B：將Na2HPO4·12H2O（3.04g）、KH2PO4（1.2g）、葡萄糖（20.0g）溶於800ml雙蒸水後加100ml0.4%酚紅溶液再加蒸餾水到1000ml。

(7)dhanks液過濾除菌擴展閱讀：

1、Hanks 液為生物醫學實驗中最常用的無機鹽溶液和平衡鹽溶液，簡稱H。主要用於配製培養液，稀釋劑和細胞清洗液，而不能單獨作為細胞組織培養液。

2、PBS的用途：主要用於一些化學實驗中不影響實驗反應的情況下調節pH值，以便讓實驗的化學反應在最佳條件下進行。部分用於食品或是飼料行業加工。

3、PBS可以為三種溶液的英文縮寫，分別是磷酸鹽緩沖溶液、磷酸鹽緩沖鹽水及 磷酸鹽緩沖鈉，其配製方法不同，pH值不同，發揮的生物學作用亦不完全相同。

Ⅷ 最終滅菌產品為什麼要加一部除菌過濾

處於未完全密封狀態下的產品置於完全密封容器內的轉運、壓塞非最終滅版菌產品的無菌生產權
A級(B 級背景)、器具滅菌後處於密閉容器內的轉運和存放
C級、分裝、軋蓋等：直接接觸品的包裝材料：處於未完全密封狀態下產品的操作和轉運；產品的過濾
D級：灌裝前可除菌過濾的液或產品的配製；灌裝前無法除菌過濾的液或產品的配製；直接接觸品的包裝材料、器具的最終清洗；直接接觸品的包裝材料，如產品灌裝（或灌封）、裝配或包裝、器具滅菌後的裝配以及處於未完全密封狀態下的轉運和存放
B級

Ⅸ Hanks溶液與D-hanks液的區別,誰知道啊

D-hanks是不含鈣鎂離子的hanks，主要用於洗滌細胞和組織的 也是合成培養基的基礎液。如果含有鈣鎂離子的話 當用消化液消化細胞時 鈣鎂離子會破壞消化液的活力 影響消化作用

Ⅹ D-Hanks配好後,115度滅菌30分鍾後變黃了,還可以用嗎 應該怎麼滅菌啊

不可以.碳酸氫鹽不可以加熱滅菌,而且你的配方里不知道有沒有別的成分.但顏色變了就不行.過濾除菌最好,高溫滅菌一定不含容易分解的成分