1. HPLC系統由哪些部分組成簡述各部分的功能
HPLC儀一般由溶劑輸送系統、進樣系統、分離系統(色譜柱)、檢測系統和數據處理與記錄系統組成。
1、溶劑輸送系統
儲液器:用來貯存數量足夠、符合要求的流動相。配有溶劑過濾器,以防止流動相中的顆粒進入泵內。
脫氣器:脫氣的目的是為了防止流動相從色譜柱內流出時釋放出氣泡進入檢測器,從而引起雜訊,不能正常檢測。
輸液泵:將儲液器中的流動相連續不斷地以高壓形式進入液路系統,使樣品在色譜柱中完成分離過程。
梯度洗脫裝置:是在分離過程中通過逐漸改變流動相的組成增加洗脫能力的一種裝置。
2、進樣系統
進樣器:是將樣品送入色譜柱的裝置,進樣方式可以分為兩種:閥進樣或自動進樣。比較常用的是採用自動進樣器裝樣。
3、分離系統
色譜柱:對樣品進行分離,是整個色譜系統的心臟,它的質量優劣直接影響到分離的效果。
4、檢測系統
檢測器:將色譜柱連續流出的樣品組分轉變成易於測量的電信號,被數據系統接收,得到樣品分離的色譜圖。
5、數據處理和記錄系統
對色譜數據進行處理,並參與HPLC儀器的自動控制。
(1)液相色譜溶劑過濾器擴展閱讀
應用
高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。
與試樣預處理技術相配合,HPLC 所達到的高解析度和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。
2. 液相色譜的新過濾頭怎麼上,管子太小
是溶劑瓶里那個過濾器嗎?你可以去貝克曼的網站去查看規格,如果你懷疑過濾版器堵了可以按照以下操作來清洗過濾權器:1.先檢查溶劑過濾器是不是堵了-擰開脫氣機出口或比例閥入口管線,並使液面高於出口30cm此時溶劑會因為重力流出,脫氣機或溶劑過濾頭堵塞時,溶劑會流出不暢或不流出。-查看過濾器是否變色.-臨時取下過濾器,檢查柱前壓力是否正常.2.清潔溶劑過濾器-將堵塞的溶劑過濾器從瓶頭組件中拿下。先用水沖洗殘留之溶劑然後將過濾器放在裝有濃硝酸(35%)的燒杯里浸一小時。-用二次蒸餾水徹底沖洗過濾器。建議不使用超聲波清洗機清洗。-將過濾器重新裝好。-建議定期清洗溶劑過濾器及溶劑瓶,每三個月至少清洗一次。還有就是最好使用滅過菌的溶劑瓶,這樣可以減少瓶里藻類的生長防止其堵塞過濾器
3. 高效液相色譜儀器的結構及其各部分作用
1、溶劑輸送系統;儲液器,用來貯存數量足夠、符合要求的流動相。配有溶劑過濾器,以防止流動相中的顆粒進入泵內。脫氣器,脫氣的目的是為了防止流動相從色譜柱內流出時釋放出氣泡進入檢測器,從而引起雜訊,不能正常檢測。
輸液泵,將儲液器中的流動相連續不斷地以高壓形式進入液路系統,使樣品在色譜柱中完成分離過程。梯度洗脫裝置,是在分離過程中通過逐漸改變流動相的組成增加洗脫能力的一種裝置。
2、進樣系統;進樣器:是將樣品送入色譜柱的裝置,進樣方式可以分為兩種:閥進樣或自動進樣。比較常用的是採用自動進樣器裝樣。
3、分離系統;色譜柱:對樣品進行分離,是整個色譜系統的心臟,它的質量優劣直接影響到分離的效果。
4、檢測系統;檢測器:將色譜柱連續流出的樣品組分轉變成易於測量的電信號,被數據系統接收,得到樣品分離的色譜圖。
5、數據處理和記錄系統;對色譜數據進行處理,並參與HPLC儀器的自動控制。
(3)液相色譜溶劑過濾器擴展閱讀
與試樣預處理技術相配合,HPLC 所達到的高解析度和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。
HPLC成為解決生化分析問題最有前途的方法。由於HPLC具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫葯研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。
4. 高效液相色譜儀出現基線穩,但壓力線呈鋸齒型波動,變化范圍在2MPa,是什麼原因
先檢查一下輸送來管路是否有問題源,看其是否漏氣或有彎折的地方,再有就是泵的問題了,看泵所接的電壓是否穩定,如果是蠕動泵看蠕動齒輪是否有缺損
把流速調高試試 ,在流速升高的情況下,如果鋸齒還有就可能是溶劑過濾器堵了 看過濾器是否變色來判斷是不是堵了
5. 中國市面上最好的液相色譜儀是哪個
液相色譜是一類分離與分析技術,其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式回,如紙、薄板和填充床等。答在色譜技術發展的過程中.為了區分各種方法,根據固定相的形式產生了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
經典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分離後的樣品是被分級收集後再進行分析的,使得經典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢,而且操作也比較復雜。直到20世紀60年代.發展出粒度小於10μm的高效固定相,並使用了高壓輸液泵和自動記錄的檢測器,克服了經典液相色譜的缺點,發展成高效液相色譜,也稱為高壓液相色譜。
6. 高效液相色譜法,進對照品之前,需要用0.45 μm針筒式過濾器過濾嗎
對照品溶液可不用經微孔濾膜過濾,因為對照品溶液都是用標准對照品經色譜純溶劑或流動相稀釋進行配製的。因此對照品溶液中沒有不溶性的雜質,可省去過濾,直接進樣。
7. 求急:高效液相色譜溶劑過濾器因過濾甲醇時放了水相濾膜被堵塞了,怎麼解決
高效液相色譜儀如圖1所示,是由溶液貯器、高壓泵、進樣系統、色譜分離柱、真空抽濾既過濾顆粒也脫了氣泡,非常②應逐漸改變溶劑的組成,特別是
8. 液相色譜儀的使用方法以及注意事項有哪些!
液相色譜儀的品牌、種類很多,各家的使用方法也不盡一樣,主要看你是那一款的液相色譜儀,當初購買設備時,廠家的工程師會培訓使用方法。建議你還是多跟你的設備廠家的工程師聯系,發一份島津LC-10ATvp的液相色譜儀作業指導書你參考一下,內容也包含使用中的注意事項。
LC-10ATvp的液相色譜儀作業指導書
1.目的
規范LC-10ATvp液相色譜儀使用及維護保養操作規程,使其能在正常條件下工作。
2.范圍
適用於島津LC-10ATvp高效液相色譜儀的使用和維護。
3.責任人
檢測員、設備管理員
4.內容
4.1系統組成
SPD-10Avp 檢測器,LC-10ATvp泵,N-2000工作站。
4.2 操作方法
4.2.1開機前檢查
儲液瓶倒凈,換上實驗需要的流動相(抽濾並超聲過的)。
4.2.2開機
按溶劑輸液泵上的power鍵,待自檢完畢後開始進行操作。
4.2.3排氣
逆時針旋轉排氣閥(不可超過180°),打開排氣閥,按purge鍵排氣泡,在此期間流動相連續流出並且無氣泡;按purge鍵,泵停止,將排液閥旋鈕順時針方向旋轉到底,關閉排液閥
4.2.4沖流動相
按Pump鍵,泵啟動,觀察屏幕上壓力顯示,壓力上昇平穩後,繼續按上述方法升高流速,使流速上升到實驗需要的流速。
4.2.5進樣
打開檢測器,調節波長為實驗需要的波長;打開工作站,查看基線,待基線走平後,進樣。
4.3 使用後維護
4.3.1 水或含水甲醇溶液沖洗
使用結束後,將流速降到0.1 ml/min,按Pump鍵,泵停止。換下流動相,換上已抽濾並超聲過的純凈水或含水甲醇溶液。按Pump鍵,泵啟動,觀察屏幕上壓力顯示,壓力上昇平穩後,繼續按上述方法升高流速。如流動相含有無機鹽,必須保證足夠的沖洗時間。
4.3.2甲醇溶液沖洗
換上已抽濾並超聲過的甲醇溶液,按3.1的操作進行封柱處理。
4.4 關機
按Pump鍵,關閉泵;關閉桌面在線工作站;按Power鍵關閉LC-10ATvp。
5.注意事項
5.1 不能使用濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、二氯甲烷、氯仿、二甲基亞碸等作為流動相。
5.2 流動相溶劑選擇HPLC為準的溶劑,使用前必須用過濾器(0.45μm以下)
除去微粒或塵埃。
5.3 流動相溶劑必須進行脫氣。若不脫氣則在溶劑混合時或壓力、溫度變化時容易產生氣泡,會引起泵的誤動作和生產檢測器信號噪音。
5.4 以硅膠作載體的化學鍵合填充劑的穩定性受流動相pH值的影響,使用時應詳細閱讀該柱的說明書,在規定的pH值范圍內使用。使用時,可在泵與進樣器之間連接一硅膠柱,以保護分析柱。當使用高PH或含鹽的流動相時,盡可能縮短使用時間,用後立即沖洗。
5.5 分析結束後,從色譜流路系統,泵、進樣器、色譜柱至檢測器流通池,均應充分沖洗,特別是含鹽的流動相,更應注意先用水、再用含水甲醇溶液充分沖洗。如發現嚴重故障,應與廠家聯系維修。
5.6 請在使用前充分閱讀作業指導書,不得擅自拆卸儀器的零部件。
6.日常維護
6.1 維護周期
15-30天為一個周期。
6.2 維護前准備
6.2.1 擦去前面板和主箱蓋上的灰塵。
6.2.2 使用紙或軟布沾少許水擦去鍵板上的灰塵。
6.3 檢查控制面板
6.4 管路徹底清洗
6.4.1將儲液瓶中的流動相更換為異丙醇或30%異丙醇或10%異丙醇,放入吸濾器。
6.4.2松開柱兩端的螺帽,從管路中卸下色譜柱,在原來界色譜柱的位置接一阻力管(0.1mmI.D.×2m長)或接一空的預柱管。
6.4.3按「pump」鍵,設定流速為1-2ml/min,輸液2小時。
6.4.4更換甲醇,設定流速為1-2ml/min,輸液1小時。
6.4.5更換水,設定流速為1-2ml/min,輸液1小時。
6.4.6更換甲醇,設定流速為1-2ml/min,輸液1小時。
6.5維護後的漏夜檢查
維護後,啟動泵輸液,檢查管路中是否有漏液,如果存在漏液,採取適當措施。
9. Agilent1100高壓液相色譜儀使用問題,如何防止溶劑瓶內溶劑過濾器的堵塞,以及堵塞後的處理
溶劑的質量或污染以及藻類的生長會堵塞溶劑過濾器,從而影響泵的運行,尤其水溶液或磷酸鹽緩沖液(PH=47)。以下幾種方法可以有效防止溶劑瓶內溶劑 過濾器的堵塞。
10. 我想知道有關實驗室使用的過濾器的一些事情,能幫個忙嗎,用於液相色譜使用的
流動相過濾:採用砂芯漏斗+濾膜+真空泵的組合模式。有的是有機相和水相分開過濾,回然後混合,超聲波答脫氣。這樣就需要兩套砂芯漏斗和濾膜(有機膜、水膜);有的是有機相和水相混合後,一起過濾,此種方式只需一套砂芯漏斗和有機膜。
溶劑過濾:你可以直接使用過濾流動相的砂芯漏斗。
樣品過濾:相信經過上面兩道程序的過濾,配置樣品的溶劑應該很乾凈了,也就不需要針式過濾器了,那是一次性的,實際操作起來太繁瑣;除非,你要檢測的樣品實在太臟,含有肉眼可見的不溶物,那就只能用針式過濾器進行處理了。
按道理,正常是不會出現什麼大問題的。因為,除去以上三種過濾,HPLC自身也存在三層過濾機制:1、流動相的入口 2、泵中砂芯 3、預柱
所以 正常是不會出現堵塞的。
同時,儀器使用完,注意清洗保養也是必要的。水相,鹽分,都是細菌生長的優良環境,是導致堵塞的主要原因。