A. 請教.流動相是甲醇水，進甲醇為什麼會出峰
請教.流動相是甲醇水，進甲醇為什麼會出峰
不會出峰，要不然干嗎用它做流動相。 即使出峰，也是一些溶劑小峰，在樣品中也會予以扣除，不會計入雜質含量。 用甲醇做溶劑的進樣液，也可能出現雜峰。 可能幹擾因素有如下： 1，甲醇不幹凈。 2，柱子是舊柱子，可能會有一些雜質的干擾。
B. 甲醇,水,冰醋酸為流動相,這屬於哪種高相液相色普
反相化學鍵合相色譜
固定相極性比流動相極性小，通常用ODS柱
C. 用甲醇做流動相和用乙腈做流動相有什麼區別
乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色譜柱方法開發中廣泛使用的兩種常見溶劑。所以，除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脫能力這一事實外，色譜分析人員還應該知道其他的特性嗎?讓我們來討論一些所有色譜專家都應該知道的問題。
首先，對流動相溶液的准備提出幾點意見。
只有純水溶液部分才能正確調整pH值。不要嘗試測量或調整有機或有機混合物的pH值。
制備二元混合物的方法有兩種，即V/V流動相溶液。
方法#1是用特定體積的「A」溶液填充一個量瓶，然後用「B」溶液將量瓶填滿。
方法#2是用指定數量的「A」溶液填充量筒(或容量瓶)；用指定數量的「B」溶液填充第二個量筒(或容量瓶)，然後將兩者的內容混合在一起。
無論您使用哪種方法，請在您的高效液相色譜法中完整地記錄它，以便任何閱讀它的人都能准確地復制它。上面描述的兩種方法在設計上都是正確的，但是會產生不同性質的結果。
紫外線吸光度
對於HPLC級溶劑(我們在HPLC分析中應始終使用HPLC級溶液)，乙腈的吸光度在這兩種溶劑中最低，非常適合低紫外光分析。甲醇在205-210nm左右有較高的紫外光吸收值，在非常低的紫外光范圍內略有限制。
溶劑溶解性
乙腈和甲醇在溶解多種緩沖鹽和樣品的能力上存在顯著差異。這些差異在方法開發中至關重要。
1.流動相溶解度
梯度運行顯示低重現性或失敗的一個常見原因可能與運行高濃度緩沖液和高濃度有機溶液有關。而含有濃度小於10mM鹽溶液的水溶液/有機溶液在大多數梯度條件下不太可能沉澱（最多98%是有機溶劑，而不是100%)，大多數與高效液相色譜應用一起使用的緩沖溶液會有更高的鹽濃度，當分析條件中有機溶劑含量較高時可能會從溶液中析出（導致堵塞，泄漏，插頭和不準確的結果）。在反向色譜法中選擇有機組成時要謹慎。確保使用的溶液在所有濃度下都是穩定的。還要驗證緩沖能力是否仍然存在，當使用高有機濃度時(當緩沖液被稀釋時)。
不確定鹽是否會溶解?只要把同樣濃度的溶劑混合起來做測試就行了。觀察它，有任何渾濁或可見顆粒嗎?你就可以得到你需要的答案。
甲醇總體上具有更好的溶解度特性(優於乙腈)，這意味著它在較高濃度下能更好地溶解大多數鹽，從而獲得更好的性能和更少的沉澱。
2.樣品的溶解度(對峰形和保留的影響)
液相色譜的一個基本要求是樣品完全溶解在流動相(初始流動相)中。在分析前，將樣品溶解在流動相或強度稍弱的溶液（不是更強的溶液）。這確保它將作為一個集中的段塞載入到柱的頂部，以改善峰形和RSD。如果樣品沒有完全溶解在流動相，那麼你實際上並沒有分析整個樣品。甲醇優於乙腈的另一個方面是它能完全溶解更多類型的樣品。這一改進的溶解度可能導致更好的整體峰形。甲醇的選擇性也不同於乙腈(不僅僅是洗脫強度)，這可能導致峰洗脫時間與預期的保留時間不同。這也是為什麼在開發反向方法時，我們總是嘗試使用含有乙腈或甲醇的不同流動相混合物的另一個原因。
永遠不要假設一種溶劑會比另一種溶劑更好。太多的色譜新手只使用乙腈作為他們方法開發的主要有機溶劑。請不要犯他們的錯誤，這樣的策略表明缺乏實踐經驗和知識。您必須首先分別嘗試它們（乙腈&甲醇）用你的樣品來評估結果（在適用的情況下最好從不同pH值的全面梯度開始）。如果您在最初的時間內測試了這兩種類型的溶劑，那麼將獲得回報，因為還沒有開發出能夠使用您自己的樣品來預測真正准確的結果的模擬器。可能會驚訝地發現，有多少樣品使用甲醇溶液顯示出更好的峰形和性能。如果沒有看到任何改善，至少你現在知道了，因為你已經嘗試過了，並且可以滿懷信心地前進。
背壓
乙腈的粘性比甲醇小，因此通常會導致整體柱壓和系統背壓降低。乙腈和水的混合物也會發生吸熱反應(冷卻溶液)，從而在溶液中捕獲氣體。如果你預先混合你的流動相，讓它靜置幾分鍾後在制備。
甲醇比乙腈更粘稠。它還有一個不尋常的特性，就是甲醇和水的50/50混合物會產生一個比甲醇或水更高的系統和柱背壓。它的峰值壓力是由50/50的混合物所觀察到的。兩種溶液在開始混合釋放出一些氣體也會產生放熱反應。在制備溶液時，最好是讓溶液靜置幾分鍾，然後在高壓液相色譜系統中使用。
D. 以甲醇-水-1%醋酸體系為流動相,應該選擇哪種濾膜有機相還是水相
一般採用有機膜
E. 液質流動相為什麼選甲醇和水體系
液質流動相選甲醇和水體系是因為對於液相色譜而言，物質的分離是基於被測物在流動相和固定相間的分配比不同而獲得的，不管是不是中性物質，只要它們在兩相間的分配比不同就可以分離。而流動相的改變也不過是為了獲取這個分配比的差異而已。
液質流動相的選擇方法：
1、流動性主要看結構，極性大小，溶解性，對酸鹼的敏感性等等。
大體上有機相是乙腈，甲醇，水相是甲酸水，乙酸水，甲醇水或者加點乙酸銨等。
2、再看化合物質譜條件是（+），則水相可加甲酸，乙酸，一般0.1%，也可以0.2%，可以是條件，原則是能濃度低就不要濃度高，（-），不要用酸，會有抑制。
3、液相分離效果，可以用不同的有機相：水相比例，是分離效果好就可以。
4、觀察uv最佳吸收是多少？若離200nm很近，建議有機相用乙腈。
5、重要的是，水相不加任何物質就可楚風很好，建議不要加其他的。
6、液質聯用所用的流動相，不能用不揮發性的物質，如：磷酸鹽緩沖液等，常用甲酸鹽，乙酸鹽等易揮發的物質用作緩沖鹽的首選。
在做液質聯用測定生物樣品時，若選擇M
H峰可在流動相中加入一些添加劑提供H離子，如甲酸等，一般準分子離子峰較穩定。
7、液質聯用的流動相要求使用揮發性的酸鹼鹽，常用的如下：
酸---甲酸、乙酸（＜2.0%），三氟醋酸（≤0.5%）
鹼---甲胺、乙胺、三乙胺（＜1.0%）
鹽---醋酸銨（10-5mmol/L）。
F. 甲醇和水混合作為流動相用過濾嗎
首先，作為流動相的試劑首先應該是色譜純或者質譜純級別的。
其次，①如果是要經過液相色譜，一般情況下是要進行過濾的，有機相用0.22um濾膜過濾，水相用0.45um濾膜過濾。因為無論是水相還是有機相，尤其是水相，會長細菌。②同時也會存在制備時的一些雜質。如果不小心進入到色譜柱當中，不但影響分析結果，甚至可能會損壞色譜柱。
所以，一定要過濾，最好是抽濾，超聲排氣後，靜置15min之後使用
G. 氣相色譜法用得流動相是什麼液相色譜法用得流動相是什麼
氣相色譜法用得流動相是氣體，一般有氮氣，氦氣，氫氣等，而液相色譜法流動相是液體，一般有乙腈，甲醇，水（反相），正乙烷，乙醇，異丙醇（正相）等。
H. HPLC中甲醇水用什麼膜過濾
HPLC 的流動相選用的膜是根據的你的流動相甲醇水比例的,一般有機系佔得比例大,都是有機系膜,就是「油膜」.當然,有的比例也有用水膜的,具體要看你的具體比例的
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I. 高效液相流動相中甲醇乙腈與水的配比的多少有什麼區別
一般對於C18柱，有機相比例越大，分離效果越好，但是不是所有比例都允許用的，有些比例會導致流動相極易產生氣泡而不能使用，所以一般不採用有機相和水相比例相近的配比。而且對於一些不溶於水的有機物，只能用高比例有機相流動相。