1. Morris水迷宮的系統特點
◆採用視頻攝像 跟蹤技術,實現了實驗過程的自動化,避免了人工計數引入的主觀誤差和對實驗動物的干擾,增加了實驗結果的真實性和可靠性;
◆採用視頻追蹤技術,提取出Morris水迷宮實驗中實驗動物的運動軌跡,並據此計算出豐富的行為學定量指標,實現了Morris水迷宮實驗的定量化、精確化和客觀性,增加了實驗結果的可信性;
◆Morris水迷宮的尺寸規格 按照Morris本人的設計,採用玻璃鋼製作,可長期使用,視頻攝像系統固定在特製的支架上,可拆卸,方便實驗;
◆視頻文件格式支持AVI和MPEG-4壓縮格式,MPEG-4文件的壓縮比率高,可有效減少存儲空間,有利於進行長時間實驗;
◆面向科研和計算機輔助教學(CAI),能夠 儲存原始的視頻圖像,並提供完整的實驗資料庫功能,作為研究的真實記錄和今後進行教學演示的素材;
◆可在星光條件(0.01Lux)下進行視頻分析(包括實時分析),對動物的干擾更小,星光條件符合嚙齒類動物(例如大鼠、小鼠)的生活習性;
◆採用開放式、模塊化設計,系統可擴展性強,可外接其他的分析模塊,軌跡點坐標序列數據和指標結果可導入到Excel,便於用戶在Excel、SPSS、SAS等分析統計軟體中作進一步 分析處理;
◆分析靈活,支持時段分析,支持定時終止和人工終止,並具有豐富的顯示方式,能對動物的運動情況採用軌跡圖、參數指標、曲線、直方圖等多種顯示方式,並可生成完整的報告,供列印輸出;
◆空間解析度最高可達640x480像素,時間解析度最高可達25幀/秒,測量所得的指標結果精度高。
2. 大物實驗RLC求助
可以做小鼠的行為學實驗,確定小鼠的神經系統發育狀況,比如水迷宮,洞板實驗,風箱實驗,基爾頓新引進了一套用於小鼠水迷宮的實驗設備,可以去問問
3. Morris水迷宮的實驗方法
(1)將動物(大鼠或小鼠)頭朝池壁放入水中,放入位置隨機取東、西、南、北四個起始位置之一。記錄動物找到水下平台的時間(s)。在前幾次訓練中,如果這個時間超過60s,則引導動物到平台。讓動物在平台上停留10s.
(2)將動物移開、擦乾。必要時將動物(尤其是大鼠)放在150W的白熾燈下烤5min,放回籠內。每隻動物每天訓練4次,兩次訓練之間間隔15~20min,連續訓練5天。
(3)最後一次獲得性訓練結束後的第二天,將平台撤除,開始60s的探查訓練。將動物由原先平台象限的對側放入水中。記錄動物在目標象限(原先放置平台的象限)所花的時間和進入該象限的次數,以此作為空間記憶的檢測指標.
(4)測定動物的工作記憶(working memory)。探查訓練結束後的第二天,開始維持4天的對位訓練。將平台放在原先平台所在象限的對側象限,方法與獲得性訓練相同。每天訓練4次。每次記錄找到平台的時間和游泳距離以及游泳速度。
4. 做morris水迷宮實驗時,為什麼有的小鼠開始能找到平台,後來又找不到了
後來找不到是因為實驗者把他們的海馬定點損毀了,這樣證明了海馬與空間記憶有關
5. 實驗動物36隻隨機分為6組,每組6隻怎麼分
小鼠的行為學實驗,確定小鼠的神經系統發育狀況,比如水迷宮,洞板實驗,風箱實驗,基爾頓新引進了一套用於小鼠水迷宮的實驗設備。
6. 小鼠水迷宮實驗求助
水迷宮般設計四五檢測訓練期表現或者表現
鼠台(60s或者120s)實驗員訓練期間給引導幾鼠進行訓練檢測環行游泳鼠缺乏引導
剔除實驗鼠指游泳或者游泳障礙(比運能力缺陷)等
祝福運
7. 求助大家關於samp8小鼠的問題
隨著我國人口老齡化進程的不斷加快,生育率的下降和人均期望壽命的進一步升高,空巢獨居現象日趨突出,已成為我國老齡化進程中不容忽視的重要問題之一。本實驗對SAMP8小鼠進行豐富環境的干預,觀察小鼠認知功能的改善情況,並觀察了解社會交往(群居或者獨居)對SAMP8小鼠的影響,同時應用光鏡及透射電鏡觀察分析豐富環境與普通環境對SAMP8小鼠海馬神經元的影響。以此論證豐富環境及社會交往對老年痴呆患者護理措施的可靠性和作用機制,為老年痴呆症患者的早期干預及早期預防提供科學客觀的依據。
方法:選用健康雄性6月齡快速老化SAMP8小鼠32隻,隨機分為豐富環境+群居組
(A)、豐富環境+獨居組
(B)、普通環境+群居組(C)和普通環境+獨居組(D)。其他如飼養溫度、光照、飲水、飲食等條件和環境相同。總干預時間為6周。
1.Morris水迷宮試驗:環境干預結束後,小鼠在水迷宮實驗室環境下飼養2d。每天上午8:00~12:00間進行水迷宮實驗訓練。定位航行試驗:將Morris水迷宮圓形水池平均分為4個象限,其中1個象限中放入一平台。小鼠自每個象限中點面向池壁入水,視頻採集系統跟蹤並記錄小鼠找到平台所需的時間(逃避潛伏期:s)。每天每隻小鼠在4個象限依次訓練1次,訓練共進行5d。空間探索試驗:訓練結束後撤掉水下平台,小鼠自距平台最遠的入水點面向池壁入水,觀察小鼠的游泳軌跡並記錄小鼠120s內跨越原平台位置的次數。 2.組織切片制備及觀察:每組取4隻小鼠,開胸暴露心臟後,將輸液針刺入左心室,同時剪開右心耳,用0.9%生理鹽水快速沖洗,沖凈小鼠體內血液後用4%多聚甲醛灌注,然後進行多聚甲醛後固定。自上丘至視交叉節段取腦組織,制備四套石蠟切片,分別用於HE染色,尼氏染色,抗NMDAR1免疫組化染色和陰性對照。 3.海馬CA1區神經元超微結構觀察:灌注取腦後迅速游離海馬,4%預冷的戊二醛溶液固定,切片,厚約1mm;1h後再次切成<1mm3的海馬CA1區組織塊,鋨酸固定,脫水,樹脂包埋,LKB-5超薄切片機切片,厚度50nm。醋酸鈾—檸檬酸鉛染色,透射電鏡觀察CA1區神經元及其內超微結構的變化。 結果: 1.Morris水迷宮實驗結果:定位航行實驗中,隨訓練天數增加,各組潛伏期均有縮短;豐富環境群居組潛伏期明顯短於其他各組(P<0.05),空間探索試驗中跨越平台次數最多(P<0.05)。豐富環境、群居能改善學習認知功能,與普通環境、獨居組比較差異有統計學意義(P<0.05)。 2.HE染色結果:相比其他三組,普通環境獨居組海馬CA1區神經元病理性改變最嚴重,呈現彌漫性空泡變性,細胞腫脹,核深染、固縮現象。而豐富環境群居組神經元結構較其餘各組正常,細胞層數多,神經元排列相對緊密整齊,層次清楚。 3.尼氏染色結果:豐富環境群居組海馬神經元形態規則,排列整齊且密集,胞漿中尼氏體豐富緻密,細胞數較多,與其它各組相比有統計學意義(P<0.05);豐富環境獨居組海馬神經元體積較小,尼氏體較稀疏。普通環境獨居組海馬神經元排列稀疏、紊亂,丟失嚴重,細胞核濃密深染、固縮現象明顯,胞漿內尼氏體減少,細胞數與豐富環境獨居組的細胞數相比明顯減少,差異有統計學意義(P<0.05)。普通環境群居組的尼氏體較普通環境獨居組增多,細胞數增加,差異有統計學意義(P<0.05)。 4.抗NMDAR1免疫組化染色結果:普通環境獨居組免疫反應產物表達最少,細胞排列鬆散,染色最淡;豐富環境群居組可見NMDAR1蛋白免疫反應產物表達較多,細胞排列緊密,染色較深。光密度值分析顯示豐富環境群居組光密度值最高,普通環境獨居組光密度值最低。 5.電鏡觀察海馬CA1區神經元超微結構結果:電鏡觀察豐富環境群居組神經元核膜完整光滑,核內染色質均勻,電子密度低。豐富環境獨居組神經元核型不規則,細胞器容量較少,有脂褐素的沉積。普通環境群居組神經元核周隙輕度擴張,核質輕度濃縮,有少量脂褐素沉積。普通環境獨居組神經元核周隙擴張,核膜局部消失融散,胞質腫脹發白,形成不規則的高電子密度團塊;脂褐素沉積,細胞器明顯減少。
結論:
豐富環境、群居(增加社會交往)能夠改善SAMP8小鼠的學習記憶及認知功能。
2. 豐富環境、群居(增加社會交往)能改善SAMP8小鼠海馬神經元的病理性損傷,減輕尼氏體、神經元及其細胞器的變性和丟失。
3. 豐富環境、群居(增加社會交往)能夠增加SAMP8小鼠海馬CA1區NMDAR1的蛋白含量。
4. 豐富環境和群居(增加社會交往)對SAMP8小鼠的海馬神經元及其認知功能具有獨立性保護作用,二者無交互作用。
8. 小鼠morris水迷宮以及小鼠跳台實驗的詳細步驟
跳台裝置為一25 cm ×20 cm ×75 cm 的被動迴避反應箱,箱底鋪直徑為1 mm 銅柵,通36V 交流電,銅柵的一角固定一8 cm ×8 cm ×5 cm 大小的塑料泡沫塊作為動物迴避電擊反應的安全區。先將大鼠放入箱中自由活動3 min ,熟悉環境,然後接通銅柵電源,大鼠受到電擊,其正常反應是跳回泡沫塊以躲避傷害性刺激,多數動物可能再次或多次跳至銅柵上,受到電擊(雙足同時接觸銅柵) 又跳回安全區,如此訓練5 min ,並記錄每隻大鼠首次找到安全區所需的時間(反應時間) 和5 min 內受到的電擊次數(錯誤次數) ,作為學習測試成績。24 h 後重復上述試驗,記錄每隻大鼠第一次跳下安全區的時間(潛伏期) 和錯誤次數,作為記憶測試成績。