視神經樹脂包埋

A. 電鏡的標本為什麼要脫水

1.透射電鏡的電子束是要穿透樣本而因原子密度差異顯示出明暗圖像的，因此要求樣品得非常薄（百納米級），但我們不可能用刀直接對著一個細胞切，因此要把它包埋在樹脂中對樹脂進行超薄切片。因為樹脂是脂類，因此樣品得是脂溶性的，用乙醇或丙酮對樣品進行脫水就行了。
掃描電鏡對樣品鍍膜也得先脫水
2.某人說離體細胞處於低大氣壓下，膜結構容易被破壞。
3.但有資料說1980年我們已經可以用電鏡觀察濕樣品.

B. 透射電鏡樣品制備方法是什麼

透射電鏡試樣制備：

一、實驗內容及目的：了解透射電鏡對試樣的要求，熟悉透射電鏡試樣的制備過程，制備一個合格的透射 電鏡試樣。

二、薄膜樣品的制備：用於透射電鏡下觀察的試樣厚度要求在50-200nm 之間，對於不導電的陶瓷材料和脆性材料，最終減薄可採用離子減薄法。

該法是用離子束在樣品的兩側以一定的傾角（5-30）轟擊樣品，使之減薄。由於陶瓷樣品硬度高，耐腐蝕，因此，離子減薄的時間長。對於要求較高的金屬薄膜樣品，在雙噴後再進行一次離子減薄，效果會更好。

預減薄

預減薄的目的在於使圓片的中心區域進一步減薄，以確保最終在圓片的中心部位穿孔(其邊緣附近區域可供觀察)，預減薄通常採用專用的機械研磨機，使中心區域減薄至約10μm厚，藉助於微處理器控制的精密研磨有時可以獲得使電子束透明的厚度(<1μm)．有時也用化學方法進行預減薄。

以上內容參考：網路-樣品制備

C. 812包埋劑的配方

用於透射電鏡樣品的包埋液,數年來一直延用幾種固定的配方,即常用的812、國產樹脂618、Spurr等等,各種包埋劑各有其優缺點.
Spurr包埋劑:粘度低,浸透容易,包埋聚合時間短,硬度及韌性均很好,經免疫標記的樣品,常用此液進行包埋.另外還可用於難以浸透、硬度高、緻密性較高組織.但此包埋液價格昂貴,不宜作為常規的包埋液來使用.
812包埋液:粘度低,韌性好,易切出較大的超薄切片,但組織包埋塊易吸潮,不易保存 ,包埋液的價格也較高.
國產樹脂618:價格便宜,購買方便,組織塊不易吸潮,保存方便,切割性能較好.但此包埋液粘度高,浸透速度緩慢,配製時不易攪拌均勻.
根據以上常用的幾種包埋液的優缺點,我室經數年的摸索,按自己的條件,重組了國產61 8樹脂包埋液配方:
618環氧樹脂 5ml
DDSA(十二碳烯基丁二酸酐) 2ml
MNA(甲基內次甲基四氫鄰苯二甲酸酐) 2.5ml
DBP(苯二甲酸二丁酯) 1ml
DMP-30(2-4-6-三(二甲氨基甲基)苯酚) 0.11ml
該包埋液中的增塑劑DBP可根據季節的變化或組織的硬度進行適當的調整(冬季包埋時, DBP可增加至1.5ml,使包埋塊的韌性增加).
此配方的優點是:粘度降低,浸透力增強,聚合後的組織塊顏色淡黃,硬度均等,韌性良好 ,切割性能較佳.經我室數年使用,對不易製片的眼球、耳蝸、皮膚、血管等組織,均取得了較好的超薄切片效果,現已成為我室的常規配方.