① 流式細胞儀激光濾光片有什麼作用
能衰減激光強度，改變激光光譜成分或限定激光振動方向。
② 流式細胞儀
有幾種方法。一是要研究的蛋白是通過載體在細胞中過表達的，而且這種蛋白還帶有一個熒光蛋白作為標記，那可以直接使用流式細胞儀來測量熒光強度，熒光強度越高，就說明蛋白的表達量越高。
如果這個蛋白是細胞本身固有的蛋白，就需要用熒游標記的抗體來識別。抗體和蛋白結合後，在用流式細胞儀檢測，熒光強度高的那組細胞就是高表達的（和其他組比較）。
這個方法，你必須有幾組對照。一是無熒光抗體的細胞，原來設定陰性閾值。另外，還要有同型對照，就是非特異性的熒游標記的同型抗體，用來設定非特異性的抗體結合。最後就是你的幾組實驗細胞，比較熒光強度。熒光強度最高的，一般就是高表達。不過也可能所有的都是低表達。
③ 流式細胞儀的價格
產品名稱 流式細胞儀
英文名稱 Flow Cytometer
國產/進口 進口
產地/品牌 美國貝克曼庫爾特有限公司
型號 EPICS® ALTRA™
參考報價
銷售商 貝克曼庫爾特香港有限公司
流式細胞儀
【性能參數】
EPICS® ALTRA™ Flow Cytometer with HyPerSort Cell Sorting
DATA Management
FlowCentreTM流式工作中心與建於Windows平台的EXPOTM32軟體系統相配合，建立了強大的、多任務操作的工作環境，這一工作環境可用於數據採集、分析以及結果報告。
A CHOICE OF Sorters
小型、經濟的空冷激光允許分選速度提高到10,000個／秒，為大多數應用領域提供了充足的空間，如果您的購買能力允許，或者研究工作需要，HyPerSort 系統將在更高分選速度的前提下提供更高效、精確的分選效果。
DESIGNED Simplicity
操作人員可以直接檢查或更換光學濾片以便獲得更廣泛的熒光染料組合，不需要重新進行光路校準。
CONFIGURATION Optics
ALTRA多光源選擇為用戶當前及未來的研究工作提供最多的匹配空間。
MULTIPLE Lasers
光學工作台及工業標准組件允許多激光組合支持應用工作，經濟的空冷激光及高功率的水冷激光為使用者提供多種選擇，使用者可以極方便地在多光束間進行聯合使用或相互切換。
QUARTZ FIOW Cells
貝克曼庫爾特公司在行業中率先設計高靈敏度石英流動室SortSense，這項技術允許使用者在標准及高速分選模式中使用任何參數，包括側向散射光。
INTELLIGENT Soting
嶄新的ALTRA分選模式使得在保證得率的前提下最終達到99％的純度，使用AccuSORT模式可以將特定數量的細胞分別選人微孔板中不同的微孔。標准分選模式與高速分選模式之間可以極方便地切換。
Sort LOCK
SortLOCK功能真正實現了無需守候分選，監視屏直觀地實時顯示分選監控狀態，確保分選結果的可信度。
SPECFICATIONS
檢測參數
前向-LOG，INT及PEAK
PMT 1—LOG，INT
PMT2-PMT 5-LOG，INT，PEAK
兩個附加信號通道(AUX)可以任意附加到PMT2-PMT5；可選GATE AMP功能
參數，可指定至任意的PEAK信號
1043寸數放大器
數據採集
27項參數中，12項參數可以同步採集
一個前向散射信號
二個AUX信號
TIME時間參數
RATIO
PRISM
激光器選擇
空冷激光
Cyonicsl5mW，488nm氬離子激光
MellesGriot氦氖激光,633nm，10mW
Omnichromee氦氖激光,325nm，20mW
MellesGriot氦氖激光，544nm，1．5mW
Coherent Enterprise II627氬離子激光，UV(50mW)，488nm(180mW)
可選帶LASERPURE 5i空冷操作系統
Coherentlnnova 70系列、90系列、300系列激光。
流動室
76 µm SortSense石英流動室
100，140pmSortSense石英流動室
250 µm Biohazard石英流動室
51，61，76，100 and 150 µm jet-in-air
高速分選系統流動室
70µm及76µmHyPerSortSense石英流動室
光束成型器及光電倍增管
光斑大小(µm) 高x寬(µm)
12x51 15x60
12x151 15x80
12x70* 15x80
8x151* 10x80
6．5x151 8x80
6 x 112 15x80
17x34 40x80
*可選件
光電倍增管(PMT)光譜檢測范圍300-800nm，電壓調整0-2000V
樣品管
多種規格的樣品管選擇：12X75、12X76、13X100，保證在進行大量
樣本分選時，避免頻繁更換樣本管
分選
標准套提供
分選純度大於99％，該分選純度的速度前提為10,000個／秒(SortSense)
與15，000個／秒(Jet-in-Air)9種分選模式，包括3種ALTRASort分選模式，同步提供大於99％純度，大於99％回收率及大於98％的生存能力；Enrichment模式，以及AccuSortTM Exact Count模式用於分選矩陣建立及AUTOCLONE。
HyPerSort System可選件提供
在速度為25,000個／秒時分選純度大於98％，回收率大於95％及生存能力大於97％
靈敏度
<100MESF(Spherotech Beads)
價格64萬
④ 100微米無菌細胞濾網哪裡有
師兄用的晶安生物100um細胞篩網還不錯，希望可以幫到您。
⑤ 流式細胞儀的原理和操作過程
原理：
流式細胞儀可同時進行多參數測量，信息主要來自特異性熒光信號及非熒光散射信號。測量是在測量區進行的，所謂測量區就是照射激光束和噴出噴孔的液流束垂直相交點。液流中央的單個細胞通過測量區時，受到激光照射會向立體角為2π的整個空間散射光線，散射光的波長和入射光的波長相同。散射光的強度及其空間分布與細胞的大小、形態、質膜和細胞內部結構密切相關，因為這些生物學參數又和細胞對光線的反射、折射等光學特性有關。未遭受任何損壞的細胞對光線都具有特徵性的散射，因此可利用不同的散射光信號對不經染色活細胞進行分析和分選。經過固定的和染色處理的細胞由於光學性質的改變，其散射光信號當然不同於活細胞。散射光不僅與作為散射中心的細胞的參數相關，還跟散射角、及收集散射光線的立體角等非生物因素有關。
在流式細胞術測量中，常用的是兩種散射方向的散射光測量：①前向角（即0角）散射（FSC）；②側向散射（SSC），又稱90角散射。這時所說的角度指的是激光束照射方向與收集散射光信號的光電倍增管軸向方向之間大致所成的角度。一般說來，前向角散射光的強度與細胞的大小有關，對同種細胞群體隨著細胞截面積的增大而增大；對球形活細胞經實驗表明在小立體角范圍內基本上和截面積大小成線性關系；對於形狀復雜具有取向性的細胞則可能差異很大，尤其需要注意。側向散射光的測量主要用來獲取有關細胞內部精細結構的顆粒性質的有關信息。側向散射光雖然也與細胞的形狀和大小有關，但它對細胞膜、胞質、核膜的折射率更為敏感，也能對細胞質內較大顆粒給出靈敏反映。
在實際使用中，儀器首先要對光散射信號進行測量。當光散射分析與熒光探針聯合使用時，可鑒別出樣品中被染色和未被染色細胞。光散射測量最有效的用途是從非均一的群體中鑒別出某些亞群。
熒光信號主要包括兩部分：①自發熒光，即不經熒光染色細胞內部的熒光分子經光照射後所發出的熒光；②特徵熒光，即由細胞經染色結合上的熒光染料受光照而發出的熒光，其熒光強度較弱，波長也與照射激光不同。自發熒光信號為雜訊信號，在多數情況下會干擾對特異熒光信號的分辨和測量。在免疫細胞化學等測量中，對於結合水平不高的熒光抗體來說，如何提高信噪比是個關鍵。一般說來，細胞成分中能夠產生的自發熒光的分子（例核黃素、細胞色素等）的含量越高，自發熒光越強；培養細胞中死細胞/活細胞比例越高，自發熒光越強；細胞樣品中所含亮細胞的比例越高，自發熒光越強。
減少自發熒光干擾、提高信噪比的主要措施是：①盡量選用較亮的熒光染料；②選用適宜的激光和濾片光學系統；③採用電子補償電路，將自發熒光的本底貢獻予以補償。
操作過程：
①打開電源，對系統進行預熱；
②打開氣體閾，調節壓力，獲得適宜的液流速度；開啟光源冷卻系統；
③在樣品管中加入去離子水，沖洗液流的噴嘴系統；
④利用校準標准樣品，調整儀器，使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調定的 基礎上，0和90散射的熒光強度最強，並要求變異系數為最小；
⑤選定流速、測量細胞數、測量參數等，在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品；同時選 擇計算機屏上數據的顯示方式，從而能直觀掌握測量進程；
⑥樣品測量完畢後，再用去離子水沖洗液流系統；
⑦因為實驗數據已存入計算機硬碟（有的機器還備有光碟系統，存貯量更大），因此可關閉 氣體、測量裝置，而單獨使用計算機進行數據處理；
⑧將所需結果列印出來。
⑥ 流式細胞儀實驗可以用pp膜過濾細胞嗎
流式樣本應該用網目40-70微米的尼龍網過濾不能用
pp膜過濾啊
⑦ 上流式細胞儀前能用1ml的注射器給樣品的過濾嗎
幾毫升不是問題，而是你使用的濾網，一般建議使用70微米網目的濾網。
注射器加針頭是沒有過濾作用的。
⑧ 流式細胞儀如何設置凋亡陽性對照
1、必須活細胞檢測,不能用能破壞細胞膜完整性的固定劑和穿透劑固定或穿膜.
2、特殊細胞的染色方法：在消化或吹打時,有些細胞（如神經元細胞）很容易受到損傷,導致晚期凋亡或壞死比例非常高,不能反映真實結果.實驗的解決方法：先低速離心,吸取細胞培養板中的液體,留少許液體,加入適量PI和Annexin-V染色10min後,將漂浮細胞吸至離心管中,離心洗滌兩次,用PBS漂洗貼壁細胞兩次,加胰酶消化後將細胞懸液移至另一離心管中,離心洗滌,再與漂浮細胞合並後上流式細胞儀檢測.應用該法可降低晚期凋亡和壞死比例,增加早期凋亡細胞比例.
3、由於Annexin-V為鈣離子依賴的磷脂結合蛋白,只有在鈣離子存在的情況下與PS的親和力才大,因而在消化細胞時,建議一般不採用含EDTA的消化液.
4、必須設置陰性對照和補償對照（分別單染）.
⑨ 如何用流式細胞儀檢測細胞內的ROS
流式檢測ROS的特異性比較差。一般來說，針對過氧化氫和超氧化物有熒光探針。加到細胞培養液後，細胞攝齲遇到ROS，可以發出熒光，上機檢測可以比較各組之間熒光強度的變化從而代表ROS水平的不同。你這個圖橫坐標代表的是相對熒光強度，縱坐標代表的是細胞計數。 圖的含義就是在每個熒光強度有多少細胞。 估計你用了氧化敏感的熒光指針，ROS反應後熒光增加。所以你應該先用對照組設一個閾值，看實驗組的熒光強度有沒有高於或者低於該閾值。
⑩ 流式細胞儀帶通濾光片500/25是什麼意思
這個濾片是Band pass濾片，也就是只能通過一定波長的光線。500是指500nm，也就是能通過的光線的波長是以500nm為中心，波長的范圍有25nm的幅度。換句話說，只有487.5-512.5nm波長范圍內的光線可以通過這個濾片。