中葯超濾需要什麼緩沖液

① 胃蛋白酶、胰蛋白酶處理樣品時需要什麼樣的緩沖液啊終濃度和工作條件是什麼啊

胰蛋白酶工作條件為37度，PH8.5的微鹼性環境，緩沖液使用25mM的碳酸氫銨即可，終濃度為0.01ug/ul

② 我純化的抗體，甘氨酸鹽酸洗脫，TRIS-HCL中和，我要把緩沖液改成PBS，超濾可以嗎透析要用多大濃度的PBS

您好！你這個是換緩沖體系，超濾能達到你需要的目的，用連續洗濾的方法需要5倍體積的PBS，就能達到對之前緩沖液99.3%的去除。
體積小的樣品可用超濾離心管，體積大用超濾系統

如還有疑問可QQ89347157交流

③ 跑SDS-PAGE的電泳緩沖液需要什麼水來配製

1.配製電泳試劑用水蒸餾水就可以了就是單蒸水,如果條件允許的話,可以只用更好的當然純水是最好了;
2.一般實驗室都會有蒸餾水,雙蒸水,其實雙蒸水就能滿足大多數實驗室的要求,純水才是所謂的去離子水

④ EMS-TRIS 緩沖液是什麼需要自己配嘛怎麼

配置相同濃度的MES和Tris，用6M的NaOH調節pH後定容即可。
4度保存1個月左右，不宜放置太久，建議現用現配。

⑤ 縮短透析時間為什麼要增加緩沖液的量

從生理學的角度來看， 它可以保持恆定的溶質清除率和超濾，以補充缺乏物質，如鈣離子和氨基酸供應營養物質，而不增加代謝並發症的吸收滲透物質很少或沒有吸收可以糾正酸中毒從細菌學的角度來看，酸鹼度是生理的， 沒有過敏原，無菌可以抑制細菌和真菌的生長而不損害人類的防禦機制身體。

透析液中含有K＋，還有Na＋，還有Ca2＋，還有Mg2＋，Cl－，還有HCO3乙酸，透析液具有一定的滲透壓，用於直腸、腹腔或體外透析。這里提到的 “體外透析” 實際上是我們常見的血液透析，因為透析過程不同於腹膜透析和結腸透析，所以如果會發現不好或者特別的情況，那麼他們也是發生在體外。

⑥ 需要不同pH的krebs-ringer緩沖液，不知道不同pH的配製方法有什麼不同。最好能給出處，感激不盡

krebs-Ringer phosphate（KRPD緩沖液）的配製：
130 mM NaCl, 5mM KCl, 1.27 mM MgSO4, 0.95 mM CaCl2, 5 mM glucose, 10 mMNaH2PO4/Na2HPO4, pH 7.4

配製方法：

A液：NaCl7.5985g ; KCl 0.3727g ; CaCl2 0.1054g，glucose-H2O 0.9495g, 加ddH2O 100ml溶解；

B液：NaH2PO4-2H2O 0.2964g Na2HPO4-12H2O 2.9011g，加100mlddH20溶解後加入MgSO4-7H2O0.3130g，充分溶解。

將A、B混合，用ddH20將體積調節至990ml左右，用1M NaOH或1M HCl調節pH至7.2~7.4，定容至1000ml。

⑦ 什麼是超濾液

循環血液經過腎小球毛細血管時，血漿中的水和小分子溶質，包括少量分子量較小的血漿蛋白，可以濾入腎小囊的囊腔而形成濾過液。這種濾過液就是超濾液。

尿液首先在腎臟，通過腎小球濾過，形成超濾液，人體每天正常生成的超濾液可以達到180升。超濾液進入腎小管後，稱為小管液，那麼腎小管和集合管可以把人體大部分的水分和各種溶質重吸收回血液，稱之為重吸收。

除此以外，腎小管和集合管還有分泌的功能，可以將某些物質分泌入小管腔內，稱為分泌。經過腎小管和集合管的重吸收和分泌，人體正常每天生成的尿液只有1.5升。

(7)中葯超濾需要什麼緩沖液擴展閱讀：

超濾技術：

超濾是一種加壓膜分離技術，即在一定的壓力下，使小分子溶質和溶劑穿過一定孔徑的特製的薄膜，而使大分子溶質不能透過，留在膜的一邊，從而使大分子物質得到了部分的純化。超濾原理也是一種膜分離過程原理.

超濾利用一種壓力活性膜，在外界推動力(壓力)作用下截留水中膠體、顆粒和分子量相對較高的物質，而水和小的溶質顆粒透過膜的分離過程。通過膜表面的微孔篩選可截留分子量為3x10000—1x10000的物質。當被處理水藉助於外界壓力的作用以一定的流速通過膜表面時.

水分子和分子量小於300—500的溶質透過膜，而大於膜孔的微粒、大分子等由於篩分作用被截留，從而使水得到凈化。也就是說，當水通過超濾膜後，可將水中含有的大部分膠體硅除去，同時可去除大量的有機物等。

超濾原理並不復雜。在超濾過程中，由於被截留的雜質在膜表面上不斷積累，會產生濃差極化現象，當膜面溶質濃度達到某一極限時即生成凝膠層，使膜的透水量急劇下降，這使得超濾的應用受到一定程度的限制。

為此，需通過試驗進行研究，以確定最佳的工藝和運行條件，最大限度地減輕濃差極化的影響，使超濾成為一種可靠的反滲透預處理方法。

超濾是一種膜分離技術，(UItrafil-tration 簡稱UF)。能夠將溶液凈化，分離或者濃縮。超濾是介於微濾與納濾之間，且三者之間無明顯的分界線。一般來說，超濾膜的孔徑在0.05 um–1 nm之間，操作壓力為0.1–0.5 Mpa。

主要用於截留去除水中的懸浮物、膠體、微粒、細菌和病毒等大分子物質。超濾膜根據膜材料，可分為有機膜和無機膜。按膜的外型，又可分為：平板式、管式、毛細管式、中空纖維和多孔式。目前家用超濾凈水器，多以中空膜為主。

超濾膜的工作以篩分機理為主，以工作壓力和膜的孔徑大小來進行水的凈化處理。以中空纖維為例。

以進水方式可分為外壓式：原水從膜絲外進入，凈水從膜絲內製取。反之則為內壓式。內壓式的工作壓力較外壓式要低。超濾膜在飲用水深度處理，工業用超純水和溶液濃縮分離等許多領域中，得到了廣泛應用。

參考資料資料：網路-原尿

參考資料資料：網路-超濾技術

⑧ 緩沖液的定義是什麼.

什麼是緩沖液？
緩沖液是有著恆定pH值通常用來標定pH計的溶液.一般來
說,緩沖液是以液體或片劑的形式提供,其pH值為4,7,10.

在日常使用過程中,緩沖液易變臟.因此,在
把電極浸入緩沖液之前,一定要仔細用蒸餾水漂洗.緩沖液應貯藏在陰涼,乾燥的容器中.未啟封的緩沖液具
有12個月的貯藏壽命期,在經常使用的情況下,緩沖液應每六個月更換一次.
如何保管好pH電極 在貯藏期間,電極末端的玻璃泡一定保持在潮濕狀態,每次更換電極保護帽,都要
在帽內注入pH值為7的緩沖液.在乾燥環境下貯藏電極將縮短電極工作壽命,從而永久性損壞電極.
多長時間進行一次pH計標定 除去兩個因素外,pH計的標定是不確定的.這兩個因素是電極標准化或斜
率調整和電極老化處理.在通常使用情形下,應把電極放入pH值為7的緩沖液中確保pH計進行標定.在標准
化控制過程中,將進行一些調整.每月一次的兩點法標定需要執行.採用pH計值為7和4,或7和10緩沖液
進行標定.也需要進行斜率調整,該調整能夠保證pH計電路適應電極老化的需要.
溫度對pH計讀數有何影響 溫度每變化1攝氏度,樣品pH值將變化0.003pH單位.為了消除溫度變化對
測量的影響,pH計中具有溫度補償功能(ATC).如果pH計具有人工補償性能,需要確定樣品的溫度,並要
將之輸入pH計中.
什麼是氧化還原 使用pH/mV計的mV功能能夠測量氧化還原性能.氧化還原電極監測化學反應,量化離
子活動和確定溶液的氧化還原特性.
電導率
什麼是電導率 電導率(micromhos/cm微姆歐/厘米)是溶液傳導電流的能力.溶液中自由離子的總量決定
導電強度.但電導率計不能測量特殊離子的強度.
測量單位是什麼 阻抗的基本單位是ohm,而電導率是阻抗的倒數,即mho,且1 mho=1 siemens.
PPM和micromho(us)量程有何不同 PPM量程相當於us量程的70%.該比率由廠商內置表中,用戶
根據自己需要可以更改.
什麼是標定液
標定液可以採用不同的量程,即PPM和us.標定液具有恆定電導率值,用來進行電導率計的電性能標
定.在陰涼,乾燥環境中保存的條件下,未啟封的標定液具有12個月的貯藏壽命期.在經常使用的情況下,需
每6個月更換一次緩沖液.
溫度對電導率影響如何 溫度是影響電導率的關鍵因素,測量時必須加以考慮並加以調整.以水為例,它
的電導率變化率是+/- 2% /℃.
什麼是電阻率 當電導率讀數小到0.1us,讀數會變得不穩定.這是由於樣品導電性太低,儀表電路不能進
行准確測量.建議使用電阻率表進行對電阻率的測量.電阻率(ohm/cm)是電導率的倒數.電導率為0.1 us的
溶液,它的電阻率是10 MΩ.
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典型數值 量程
蒸餾水——1~2 us PPM=TDS(Total Dissolved Solids)
自來水——200~300 us Mg/L=PPM
海 水——45,000~47,000 us Micromho=電導率
溶 氧
如何進行溶氧的測量 有兩種可供選擇的技術方法進行對溶氧的測量,一種是化學實驗法如溫克勒(溶
氧)測定法,另外一種是採用溶氧儀測量.溶氧計通常在日常現場測試,連續監測和要求快速測量的場合中得
到應用.
原電池(Galvanic)電極和 極譜法(Polarigraphic)電極.這兩種電極是用於溶氧儀最流行的電極.極譜法
電極要求定期更換膜和注入電解溶液.原電池電極不需要維護,定期更換即可,且使用完後便於處理.
原電池電極的壽命怎樣 該電極的壽命取決於暴露接觸氧的時間.通常的壽命為12個月.
如何保管溶氧電極 適當保存能延長電極壽命.決不能將電極放至較熱環境中儲存.建議把電極儲存在低
溫的冰箱中,在無氧的環境中,如氮氣環境中,將增加電極的惰性.也可購買無氧儲藏箱.
樣品流速對測量有多重要 所有的溶氧計都要求液體流動經過電極薄膜.每個型號對樣品流動程度的要求
不盡相同.如果樣品不流動,流速為0,通過輕敲和搖擺電極的辦法,使電極移動,但要保證電極薄膜接觸溶
氧的連續性和一致性.
特殊離子電極
特殊離子電極用於溶液中含量較大的特殊離子(specific-ion)濃度的測量,如 溴(Br-) 鈣(Ca+) 氯(Cl-
) 氟(F-)鉀(K+) 銀(Ag+) 鈉(Na+)硫(S-)等.特殊離子計是專門測量這些離子濃度的儀器,它是
利用電極電壓與特殊離子劇烈活動程度的對數成線性比例的原理來對特殊離子濃度進行測量的.特殊離子計的
使用方法與pH計相似,但有時需要離子強度調節儀和pH值調節儀,以避免強酸,強鹼對特殊離子電極的腐
蝕.

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信

T21通用型變送器

通用性強,適用於各種感測器(PH,
ORP,DO,電導率等),只是軟體不
同,硬體完全相同.
輸出隔離,變送器接收各種電化學分析傳
感器的信號,輸出4~20mA或20~4mA
號給接受器,控制器或記錄儀.輸出的電
流信號穩定,不受噪音信號干擾.
雙通道測量,T21型通用變送器可以接收
兩個感測器的輸入信號,提供2或3路輸
出信號.這兩路感測器可以是PH,
ORP,DO(溶解氧)和pION(特殊離
子)中的任意兩種組合.電導率和電阻率
變送器只允許單路輸入.
可選溫度和PID輸出.
自動緩沖液標定,只需簡單地將標准緩沖
液數值輸入內存,然後將感測器插入標准
緩沖液,待顯示數據穩定後,按鍵存儲即
完成標定.
32字元超寬液晶顯示,可同時顯示測量
值,溫度,百分比等.
可在電極信號衰減後重新標定,延長電極
使用壽命.
安裝簡便,配備不同安裝附件,可盤裝,
掛牆或立柱安裝.
產品描述:
T21型帶微處理器兩線制通用變送器功能強
大,通用性好,可以測量PH,ORP,pION(特殊
離子),DO(溶解氧),電導率和電阻率.調試簡
便,精度高.電子單元在防護等級NEMA 4X
(IP66)的外殼內,適用於大多數應用場合,兩線
制迴路推薦24VDC供電.可選電源模塊輸入
110/220VAC, 60/50Hz輸出24VDC/0.5A,可選兩個
觸電容量5A的繼電器用於報警和控制.防爆變送
器參見第五頁T28型變送器.
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T21變送器性能指標
外殼:
NEMA 4X IP66聚碳酸酯材質,
尺寸122mm×203mm×74.9mm
重量 標准T21: 0.91kg;
發貨重量: 1.41kg
精度 ±0.10%的滿量程
線性度
±0.05%的滿量程
靈敏度
PH: ±0.01PH;
ORP: ±0.1mv;
DO: ±0.01ppm;
pION: ±0.1mv;
電導率: ±0.01西門子(mho)
電阻率: ±0.1mv;
穩定性
每年±0.2%@00C~700C
響應時間
達到90%變化僅需1秒
重復性
PH: ±0.01PH;
ORP: ±0.1mv;
DO: ±0.01ppm;
pION: ±0.1mv;
電導率: ±0.01西門子(mho)
電阻率: ±0.1mv;
環境溫度
-200C~+700C
溫度補償
-300C~+1400C自動補償
當跨度超過00C ~1000C時精度小於±0.10C
輸入/輸出隔離
感測器輸入和4-20mA輸出迴路間最大耐壓
300V
標定
自動緩沖標定
返廠標定
現場可選溫度單位0C或0F
現場可調式對比顯示

測量參數及范圍
PH:
0.00~14.00PH -2.00~15.50PH(可選)
ORP:
-2000~+2000mv
pION(特殊離子):
從ppb到千分之一自動調整.
濃度從1到999.00Molar (克分子濃度)或從0.1
到9.999ppm
DO(溶解氧):
0~200%飽合或0-20mg/l
電導率:
1 s到1.5s
電阻率:
0~2M , 0~20 M
輸出
4~20mA 或 20~4mA 線性
最多3路模擬輸出(通道1,通道2,溫度)
通道2可選PID輸出
輸入
可接兩個感測器
pH, ORP, DO和特殊離子中的任意兩種組合.
電導率/電阻率感測器只有單路輸入.
供電
*兩線制,13.5VDC到50VDC,推薦24VDC.
最大迴路負載@24VDC
單通道輸出為525 ,雙通道輸出約800
*四線制電源(可選)
115/230VAC,50/60Hz,0.5A
繼電器模塊(可選)
2路SPDT(單刀雙擲)干節點
5A容量,可調節設置點和差動
115VAC 5A無感,3A有感.
220VAC 1.5A無感,0.75A有感.
雙通道:一個通道一個繼電器,輸出隔離
繼電器可現場按鍵設置高低位輸出,
死區全量程完全可調
顯示
32字元超寬液晶顯示
主菜單同步顯示:1)測量類型
2)測量值
3)輸出百分比
4)溫度

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T21變送器外形尺寸圖

背板尺寸外形圖

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T21變送器安裝圖
1.立柱安裝

2.護欄安裝 3.壁掛安裝

4.盤裝

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T21變送器兩線制接線圖
1.常用型

2.帶溫度輸出

3.雙通道

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T21變送器220V四線制線制接線圖
1.常用型接線

2.帶溫度輸出

3.雙通道

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4.帶繼電器輸出

注:
繼電器電源模塊與T21變送器組合模型,如上圖(1),(2)
圖(1) 圖(2)

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T28防爆變送器

獨特的技術優勢:
T28型智能兩線制變送器外觀簡單而符合人類
工程學原理.通用性強,可以測量PH/ORP,
溶解氧,電導率,電阻率和特殊離子.
外殼材質為316不銹鋼,防護等級NEMA7C
(室內危險場合應用),前後表蓋可以方便地
拆裝,電氣介面(1/2〃NPT)在兩側.
經FM和CSA認證符合要求本安和防爆的應
用.變送器允許安裝在I區I,II,III級A到
G組的危險場合.
4~20mA或20~4mA信號輸出,給接受器,控
制器或記錄儀.迴路供電典型為24VDC,輸
出的電流信號穩定,不受噪音信號干擾,最大
可距電源可達3英里.
調試簡單,調試及現場參數設置均可用ECD
的磁性螺絲刀通過磁感應鍵輸入,無須擰開儀
表蓋,從而解決了電子單元暴露於危險環境的
問題.溫度顯示可以是攝氏度,也可以是華氏
度;
自診斷功能在發現故障或感測器失效後會及時
顯示,通知操作者盡快處理.
萬能安裝支架即可用於牆壁安裝,也可用於護
欄管道安裝,支架上的調節螺釘可以調節顯示
方位和角度.
產品簡介:
T28型帶微處理器兩線制通用變送器功能
強大,通用性好,可以測量PH,ORP,pION
(特殊離子),DO(溶解氧),電導率和電阻
率.調試簡便,精度高.電子單元在經本安及
防爆(IP66)認證的外殼內,適用於大多數普
通及各種不同的危險場合應用,採用兩線制回
路24VDC供電.可選4-20mA或20-4mA輸
出.

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T28 型本安防爆變送器性能指標
測量參數及范圍
PH:
0.00~14.00PH
-2.00~15.50PH(可選)
ORP:
-2000~+2000mv
pION(特殊離子):
從ppb到千分之一自動調整.
濃度從1到999.00Molar (克分子濃度)或從0.1
到9.999ppm
DO(溶解氧):
0~200%飽合或0-20mg/l
電導率:
1 s到1.5s
電阻率:
0~2M , 0~20 M
輸出
4~20mA 或 20~4mA
電源要求
推薦24VDC
最大50VDC
最小14VDC
最大迴路負載
4-20mA@24VDC為500
4-20mA@50VDC為1,800
可選供電
115vac,220Vac,50/60hz,0.5amp
操作溫度
-40F~+1580F(-200C~+700C)
顯示
菜單驅動,24字元超寬耐高溫液晶顯示
向內旋轉±1800C以尋找最佳的觀測角度.主
菜單將同步顯示:1)測量類型
2)測量值
3)電流輸出
4)溫度
外殼
316不銹鋼材質,NEMA7C防護等級,FM和
CSA認證.加合適的電纜密封接頭在Ⅰ區Ⅰ級C
到G組防爆電子單元FM認證,本質安全,在Ⅰ區
Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ級A到G組本安.
外殼尺寸為Φ8.7cmх12.5cm
精度
PH: ±0.10%的滿量程;
ORP: ±0.10%的滿量程;
DO: ±0. 10%的滿量程;
pION: ±0.10%的滿量程;
電導率: ±1mV R.T.L
電阻率: ±1mV R.T.L
線性度
±0.05%的滿量程
靈敏度
PH: ±0.01PH;
ORP: ±0.1mv;
DO: ±0.01O2;
pION: ±0.01ppm;
電導率: ±0.01西門子(mho)
電阻率: ±0.05的滿量程;
穩定性
每年±0.2%@00C~700C
(DO:每年±0.2%@00C~500C)
響應時間
達到90%變化少於1秒
存儲器
永久性存儲器,EEPROM
溫度補償
-30~+140°C自動補償,精度在0~+100°C
小於±1%
操作特點
通過前面板的四個非侵入式電磁開關可實
現菜單驅動,按鍵標定和組態.
標定
現場可調式標定值
自動標定
在開始階段定義兩個標定點,只需兩個按
鍵即可完成隨後的標定
溫度顯示
現場可選溫度單位0C或0F
顯示對比
現場可調式對比顯示
安裝附件
通用不銹鋼安裝支架可用於2英寸管及牆
壁式安裝
重量 標准T28 2.95kg
發貨重量 3.4kg
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四海歸一的解決之道 An International Solution Provider
T28變送器尺寸外形圖

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四海歸一的解決之道 An International Solution Provider
T28變送器安裝圖
1.安裝於護欄管道上

2.安裝於牆壁或盤櫃上

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T28變送器接線圖
參考資料：
http://cache..com/c?word=%CA%B2%C3%B4%3B%CA%C7%3B%BB%BA%B3%E5%3B%D2%BA&url=http%3A//www%2Ewbzk%2Enet/Proct/%5Fvti%5Fcnf/ph%2DECD%2Epdf&b=0&a=9&user=

⑨ 如何進行蛋白超濾設備選型

如何進行蛋白超濾設備選型？在分離分析特別是蛋白質分離分析中，層析是相當重要、且相當常見的一種技術，其原理較為復雜，對人員的要求相對較高，這里只能做一個相對簡單的介紹。
一、 吸附層析
1、 吸附柱層析
吸附柱層析是以固體吸附劑為固定相，以有機溶劑或緩沖液為流動相構成柱的一種層析方法。
2、 薄層層析
薄層層析是以塗布於玻板或滌綸片等載體上的基質為固定相，以液體為流動相的一種層析方法。這種層析方法是把吸附劑等物質塗布於載體上形成薄層，然後按紙層析操作進行展層。
3、 聚醯胺薄膜層析
聚醯胺對極性物質的吸附作用是由於它能和被分離物之間形成氫鍵。這種氫鍵的強弱就決定了被分離物與聚醯胺薄膜之間吸附能力的大小。層析時，展層劑與被分離物在聚醯胺膜表面競爭形成氫鍵。因此選擇適當的展層劑使分離在聚醯胺膜表面發生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的連續過程，就能導致分離物質達到分離目的。
二、 離子交換層析
離子交換層析是在以離子交換劑為固定相，液體為流動相的系統中進行的。離子交換劑是由基質、電荷基團和反離子構成的。離子交換劑與水溶液中離子或離子化合物的反應主要以離子交換方式進行，或藉助離子交換劑上電荷基團對溶液中離子或離子化合物的吸附作用進行。`
三、 凝膠過濾
凝膠過濾又叫分子篩層析，其原因是凝膠具有網狀結構，小分子物質能進入其內部，而大分子物質卻被排除在外部。當一混合溶液通過凝膠過濾層析柱時，溶液中的物質就按不同分子量篩分開了。
四、 親和層析
親和層析的原理與眾所周知的抗原一抗體、激素一受體和酶一底物等特異性反應的機理相類似，每對反應物之間都有一定的親和力。正如在酶與底物的反應中，特異的廢物(S')才能和一定的酶(E)結合，產生復合物(E－S')一樣。在親和層析中是特異的配體才能和一定的生命大分子之間具有親和力，並產生復合物。而親和層析與酶一底物反應不同的是，前者進行反應時，配體(類似底物)是固相存在；後者進行反應時，底物呈液相存在。實質上親和層析是把具有識別能力的配體L(對酶的配體可以是類似底物、抑制劑或輔基等)以共價鍵的方式固化到含有活化基團的基質M(如活化瓊脂糖等)上，製成親和吸附劑M－L，或者叫做固相載體。而固化後的配體仍保持束縛特異物質的能力。因此，當把圍相載體裝人小層析柱(幾毫升到幾十毫升床體積)後，讓欲分離的樣品液通過該柱。這時樣品中對配體有親和力的物質S就可藉助靜電引力、范德瓦爾力，以及結構互補效應等作用吸附到固相載體上，而無親和力或非特異吸附的物質則被起始緩沖液洗滌出來，並形成了第一個層析峰。然後，恰當地改變起始緩沖 液的PH值、或增加離子強度、或加人抑③劑等因子，即可把物質S從固相載體上解離下來，並形成了第M個層析峰(見圖6－2)。顯然，通過這一操作程序就可把有效成分與雜質滿意地分離開。如果樣品液中存在兩個以上的物質與固相載體具有親和力(其大小有差異)時，採用選擇性緩沖液進行洗脫，也可以將它們分離開。用過的固相載體經再生處理後，可以重復使用。
上面介紹的親和層析法亦稱特異性配體親和層析法。除此之外，還有一種親和層析法叫通用性配體親和層析法。這兩種親和層析法相比，前者的配體一般為復雜的生命大分子物質(如抗體、受體和酶的類似底物等)，它具有較強的吸附選擇性和較大的結合力。而後者的配體則一般為簡單的小分子物質(如金屬、染料，以及氨基酸等)，它成本低廉、具有較高的吸附容量，通過改善吸附和脫附條件可提高層析的解析度。
五、 聚焦層析
聚焦層析也是一種柱層析。因此，它和另外的層析一樣，照例具有流動相，其流動相為 多緩沖劑，固定相為多緩沖交換劑。
聚焦層析原理可以從PH梯度溶液的形成、蛋白質的行為和聚焦效應三方面來闡述。
1、PH梯度溶液的形成
在離子交換層析中，PH梯度溶液的形成是靠梯度混合儀實現的。例如，當使用陰離子 劑進行層析時，制備PH由高到低呈線性變化的梯度溶液的方法是，在梯度儀的混合室(這層析柱者)中裝高PH溶液，而在另一室裝低PH極限溶液，然後打開層析柱的下端出口，讓洗脫液連續不斷地流過柱體。這時從柱的上部到下部溶液的PH值是由高到低變化的。而在聚焦層析中，當洗脫液流進多緩沖交換劑時，由於交換劑帶具有緩沖能力的電荷基團，故PH梯度溶液可以自動形成。例如，當柱中裝陰離子交換劑PBE94(作固定相)時，先用起始緩沖液(配方見表了一2)平衡到PHg，再用含PH6的多緩沖劑物質(作流動相)的淋洗液通過柱體，這時多緩沖劑中酸性最強的組分與鹼性陰離子交換對結合發生中和作用。隨著淋洗液的不斷加人，住內每點的PH值從高到低逐漸下降。照此處理J段時間，從層析柱頂部到底部就形成了PH6～9的梯度。聚焦層析柱中的PH梯度溶液是在淋洗過程中自動形成的，但是隨著淋洗的進行，PH梯度會逐漸向下遷移，從底部流出液的PH卻由9逐漸降至6，並最後恆定於此值，這時層析柱的PH梯度也就消失了。
2．蛋白質的行為
蛋白質所帶電荷取決於它的等電點(PI)和層析柱中的PH值。當柱中的PH低於蛋白質的PI時，蛋白質帶正電荷，且不與陰離於交換劑結合。而隨著洗脫劑向前移動，固定相中的PH值是隨著淋洗時間延長而變化的。當蛋白質移動至環境PH高於其PI時，蛋白質由帶正電行變為帶負電荷，並與陰離子交換劑結合。由於洗脫劑的通過，蛋白質周圍的環境PH 再次低於PI時，它又帶正電荷，並從交換劑解吸下來。隨著洗脫液向柱底的遷移，上述過程將反復進行，於是各種蛋白質就在各自的等電點被洗下來，從而達到了分離的目的。
不同蛋白質具有不同的等電點，它們在被離子交換劑結合以前，移動之距離是不同的，洗脫出來的先後次序是按等電點排列的。

供靜脈注射的25%人胎盤血白蛋白（即胎白）通常是用硫酸銨鹽析法、透析脫鹽、真空濃縮等工藝制備的，該工藝流程硫酸銨耗量大，能源消耗多，操作時間長，透析過程易產生污染。改用超濾工藝後，平均回收率可達97.18%；吸附損失為1.69%；透過損失為1.23%；截留率為98.77%。大幅度提高了白蛋白的產量和質量，每年可節省硫酸銨6.2噸，自來水16000噸。目前國外生產超濾膜和超濾裝置最有名的廠家是美國的Milipore公司和德國的Sartorius公司。
隨著現代生物技術的發展, 通過基因工程生產蛋白質葯物在治療人類面臨的重大疾病如癌症等方面展示出巨大的潛力. 為滿足生物技術產品工業化生產的需要, 開發高通量、低成本、高效的分離純化方法已引起人們的高度關注. 超濾技術由於具有通量高, 操作條件溫和, 易於放大等特點, 特別適合生物活性大分子的分離. 在生物技術領域, 超濾技術目前已廣泛應用於細胞收集分離、除菌消毒、緩沖液置換、分級( fract ionatio n) 、脫鹽及濃縮[ 1] . 近年來越來越多的研究表明, 通過選擇適當的膜或膜表面改性,以及對分離過程進行優化, 充分利用和調控膜—蛋白質以及蛋白質—蛋白質之間的靜電相互作用, 可以實現分子量相近的兩種蛋白質的高選擇性超濾分離[2- 7] .

為克服常規蛋白質超濾分離過程優化中存在的實驗蛋白質消耗多、工作量大、費時以及費用高等缺點, 我們相繼開發了脈沖進樣技術( Pulsed sampleinject ion technique ) [8]和參數連續變化超濾技術( Parameter scanning ultraf ilt ration) [9]. 並以此為基礎, 結合載體相超濾技術( Carrier phase ult rafil—t rat ion) [10]進一步提出了一種蛋白質超濾分離快速優化新方法[11], 實現了人血漿白蛋白—免疫球蛋白[12]、人源化單克隆抗體( A lemtuzumab) 單體— 二聚體[13]的超濾分離過程快速優化和高選擇性分離,並在膜的篩選及其適用性快速評估方面展現出巨大的潛力. 該方法的主要特徵是與AKTA Prime 系統聯用, 採用脈動進樣技術顯著減少了蛋白質的用量;而利用雙緩沖體系( 類似梯度洗脫) 的參數連續變化超濾技術, 在pH 或離子強度連續變化的情況下考查pH 或離子強度對蛋白質透過率或截留率的影響, 進一步縮短了實驗時間, 降低了蛋白質的用量,極大地減少了實驗量, 加快了過程優化進程; 另外,載體相超濾技術的應用則可保證超濾分離自始至終在設定的條件下進行, 從而最大限度地保證超濾過程的穩定性.
2012-02-25
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⑩ 中葯口服液分離純化主流工藝是什麼

中葯制劑口服液在醫葯行業越來越受到重視，目前在《中國葯典》中收納了數十種中葯口服液，相關的生產工藝也不斷的完善。但是其中除雜的工序大多數仍然採用醇沉法，離心和板框。
中葯原料經過浸提和煎制後，其中存在一些無葯物活性的生物大分子雜質，這些物質能影響產品的質量與穩定性。向其中加入乙醇能夠影響這些物質的溶解度，使其析出沉澱，例如乙醇會改變溶劑環境的介電常數，使蛋白質的水合作用以及自身構象發生轉變，去折疊，影響彼此之間的相互作用，最終導致聚集沉澱。但是醇沉法還具有一些弊端，比如造成一些有效成分損失，或殘留其中影響產品質量。離心或者板框工藝，過濾精度低，製造的產品存在黑粗大的問題。
陶瓷膜是主要由氧化鋁、氧化鋯、氧化鈦等無機金屬氧化物材料經高溫燒結而成的精密過濾元件，過濾精度涵蓋微濾、超濾、納濾三個范圍。陶瓷膜分離技術兼具過濾、分離、濃縮的功能，又具有耐酸鹼、耐高溫、抗污染、易清洗、高效、節能、環保、操作簡單等特點，在中葯制劑領域具有獨特的應用優勢。
目前已有多家生產企業，將陶瓷膜技術用於中葯制劑的生產，以陶瓷超濾膜作為中葯制劑的除雜工藝，能夠有效除去其中的蛋白、多糖等無用大分子。進而也可以採用陶瓷納濾膜作為濃縮工藝代替傳統聚合物膜。由於陶瓷膜優秀的耐高溫特性，易於設備滅菌，因此膜工藝段能夠保證無菌環境。